胡飄萍

(南昌大學第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

·講座·

交叉配血不合原因分析及處理

胡飄萍

(南昌大學第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

交叉配血；不合；輸血；紅細胞凝集

輸血治療是一項重要的臨床治療手段，在病員救治的過程中發(fā)揮著不可替代的作用。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展，輸血安全成為日益關注的問題。臨床輸注全血或含紅細胞成分血液前需要做交叉配血試驗，發(fā)現(xiàn)供血者和受血者的紅細胞和血漿間是否存在抗原抗體反應，以保證臨床用血安全。實際工作中，往往會發(fā)生交叉配血不相合的情況，即主側(cè)或次側(cè)出現(xiàn)紅細胞凝集?；诨颊哐丸b定無誤前提下，本文就可能引起配血困難的情況進行總結并提出相應的處理方法。

1 紅細胞假凝集

部分交叉配血實驗是由于血液標本的原因?qū)е录訇栃越Y果，干擾實驗結果。其中可以是患者的血液中含有某些物質(zhì)、抽取患者血液時未與抗凝劑充分混勻或供血者血辮抗凝不充分。

1.1 患者高免疫球蛋白血癥或靜脈輸入高分子藥物多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白血癥、霍奇金病、嚴重肝臟疾病等，由于血清蛋白分泌增加，白蛋白/球蛋白比例失調(diào)，血漿黏稠度增加。交叉配血時，主側(cè)交叉中供者紅細胞表面Zeta電位降低，形成緡錢狀假凝集。靜脈輸入高分子藥物如甘露醇、羥乙基淀粉或右旋糖酐等亦可導致紅細胞呈緡錢狀改變。

消除方法：采用試管法配血(聚凝胺法和鹽水法)，在配血的主管離心后去血漿，加3滴生理鹽水觀察結果。

1.2 患者血液中白細胞或血小板數(shù)量增高慢性粒細胞性白血病患者白細胞計數(shù)明顯增高時，血液標本經(jīng)1000g離心1min處理，血漿中混有大量的白細胞。由于白細胞平均體積大于紅細胞并且其變形能力僅為紅細胞的1/1000，微柱凝膠卡配血離心時，交叉配血反應體系中的細胞在微柱凝膠中下移，白細胞不能全部通過微孔進而將微孔堵塞導致游離的紅細胞不能順利通過微孔到達底部，導致假陽性[1]。EDTA抗凝標本中的血小板計數(shù)較高時，大量血小板聚集成團塊狀。交叉配血前，標本離心速度、時間不夠會導致血小板懸浮于血漿中，對結果產(chǎn)生影響[2]。

消除方法:將患者EDTA抗凝血液經(jīng)2000g離心5~10 min處理，將血漿中的白細胞或血小板充分沉淀，可消除血液細胞成分對交叉配血結果的影響。

1.3 血漿中纖維蛋白原增高患者血漿存在大量的纖維蛋白原，或供血者血辮呈部分抗凝時，交叉配血試驗過程中纖維蛋白原有可能被激活轉(zhuǎn)變成纖維蛋白，夾帶紅細胞形成凝塊，干擾交叉配血結果的判斷。

消除方法:①加溫孵育法去除交叉配血過程中纖維蛋白原干擾，將標本在37~42℃孵育10~ 30min，離心后再進行交叉配血試驗。②可采用細玻璃棒碾壓進行鑒別。用細玻璃棒對凝集塊輕輕碾壓，在顯微鏡下觀察碾壓前后，紅細胞是否由凝集現(xiàn)象轉(zhuǎn)變成分散狀態(tài)，且紅細胞形態(tài)改變，出現(xiàn)該現(xiàn)象為假凝集[3]。③為排除纖維蛋白原的干擾，可考慮使用血清進行交叉配血試驗。

1.4 標本溶血溶血性貧血患者或是燒傷科患者，由于存在大量的紅細胞碎片，微柱凝膠法時，紅細胞碎片容易堵塞凝膠微孔而使紅細胞不能完全到達底部，導致假陽性。

消除方法:改用凝聚胺法交叉配血[4，5]，在顯微鏡下仔細觀察紅細胞是否真凝集。

2 紅細胞真凝集

2.1 不規(guī)則抗體紅細胞血型不規(guī)則抗體是ABO系統(tǒng)的以外的同種抗體，可經(jīng)譜細胞鑒定抗體特異性。不規(guī)則抗體多因同種異體輸血、妊娠產(chǎn)生，新生兒可從母體被動獲得IgG類抗體，李雪英等[6]

對無償獻血人群紅細胞血型不規(guī)則抗體篩查，共檢出0.3%的人存在不規(guī)則抗體，其中女性抗體檢出率明顯高于男性。如果供血者的紅細胞含有與受血者的不規(guī)則抗體相對應的抗原，交叉配血時，可出現(xiàn)凝集。配血時，選擇不含有與不規(guī)則抗體對應的紅細胞抗原的血液交叉配血。

2.2 藥物致敏臨床上，部分患者既無輸血史，又無自身免疫性疾病病史且血漿總蛋白正常，無白球蛋白比例倒置和纖維蛋白原增高，出現(xiàn)直接抗人球蛋白實驗(DAT)陽性[7]，如果患者有明確的相關藥物使用史，應考慮為藥物致敏。患者紅細胞膜受某些藥物(以頭孢菌素類最多見)而改變，導致非特異性地吸附蛋白，造成DAT陽性。由藥物影響造成的DAT陽性[8]，導致的配血困難的比例越來越大。懷疑藥物致敏時可進行藥物抗體檢測，若確定某種藥物所致，應避免使用，在停藥一段時間后，DAT結果可轉(zhuǎn)為陰性。

2.3 自身抗體

2.3.1 冷凝集冷凝集是指由自身抗體引起的，紅細胞在冷環(huán)境中的凝集成團的現(xiàn)象。紅細胞膜表面物質(zhì)的構型會隨環(huán)境溫度的變化而發(fā)生改變。在較低溫度時，紅細胞膜表面物質(zhì)的構型發(fā)生改變，暴露出某些抗原決定簇，能與相應抗體結合。而在體溫條件下，紅細胞膜物質(zhì)的構型阻礙了冷凝集素與相應的抗原決定簇結合。冷凝集反應在0～4℃時最強，紅細胞凝集最明顯；隨溫度的升高，抗原抗體復合物逐漸解離，凝塊消失。

患者含有較高效價的冷凝集素時，血樣采取以下方法處理：采集血樣后，立即離心，獲得壓積紅細胞；用37℃溫生理鹽水洗滌紅細胞；如仍有凝集現(xiàn)象，將洗滌后的紅細胞45℃水浴放散3min或巰基試劑處理以破壞IgM；交叉配血在37℃進行。

2.3.2 溫自身抗體部分免疫性疾病患者，血清和紅細胞中均具有高效的病理性自身抗體，可與供血者紅細胞及自身紅細胞發(fā)生凝集，造成交叉配血主次側(cè)均發(fā)生凝集。在交叉配血時可采取如下措施：(1)將患者紅細胞與自身血漿吸收，用吸收后的血漿交叉配血；(2)與多人份ABO血型相同的血液做配血試驗，選擇主側(cè)凝集最弱的供血者血液，制成洗滌紅細胞后輸注；(3)如果自身抗體干擾ABO血型鑒定，而患者的病情危急，需緊急輸血搶救生命時，可立即給與O型洗滌紅細胞輸注。

2.4 移植患者接受ABO血型不同的造血干細胞移植后，受者原有血型的紅細胞不斷衰亡，相應的抗體逐漸消失，最終ABO血型轉(zhuǎn)為供者血型。在受者完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐椭?，患者血型及抗體會發(fā)生變化，輸血前應根據(jù)患者病情變化及血型改變的情況，制訂合理的輸血策略，選擇相應的血液成分[9]。

ABO血型主要不合的移植(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體)，選擇紅細胞血液制品的血型與受者相同。為了減少同種抗體的輸入，以利于受者紅細胞血型轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐?，可以考慮輸注洗滌紅細胞，而血小板和血漿制品的血型與供者相同。

ABO血型次要不合的移植(供者體內(nèi)存在抗受者ABO血型抗原的抗體)，在移植后3周內(nèi)應監(jiān)測受者血型抗體效價并做抗人球蛋白試驗，如果DAT反應呈陽性，應給患者輸注O型洗滌紅細胞，如果抗人球蛋白試驗陰性，可以輸注與供者血型相同的紅細胞或普通O型紅細胞；血小板和血漿的血型與受者相同。

ABO血型主要不合及次要不合同時存在(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體，同時供者體內(nèi)也存在抗受者ABO血型抗原的抗體)，在受者血型完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐颓皯斪型紅細胞，AB型血小板、血漿。

2.5 紅細胞多凝集或全凝集紅細胞多凝集或全凝集可有基因變異，也可因血中紅細胞被細菌或細菌酶污染，引起紅細胞膜結構改變，暴露出T抗原，T抗原具有免疫原性。大多數(shù)成人血清中含抗T抗體，因此，交叉配血時，T活化紅細胞幾乎與所有供血者的血清發(fā)生凝集反應。鑒定交叉配血是否由紅細胞全凝集引起，可將患者紅細胞與臍帶血清或6個月以內(nèi)嬰兒血清作用，因6個月以內(nèi)嬰兒血清中不存在抗T抗體，不能與T抗原反應，故紅細胞不凝集。將患者紅細胞分別與10人份AB血清反應，部分凝集則稱為多凝集，如果全部凝集則是全凝集。

由疾病導致的全凝集現(xiàn)象是暫時的，一般病愈或控制感染后即自行消失，輸血時選用同型洗滌紅細胞制品，而避免輸全血或單獨輸血漿。

2.6 供血者DAT陽性正常人群約有1‰的供血者有DAT陽性，其紅細胞應避免輸入患者體內(nèi)。同種異體輸血有傳播疾病和發(fā)生輸血反應等風險，應盡量避免或減少輸注，提倡自身輸血和成分輸血。用以交叉配血的患者血樣必需是3天之內(nèi)的、最能反映患者輸血前的免疫狀態(tài)的標本。嚴把輸血前交叉配血關，規(guī)范操作規(guī)程并嚴格執(zhí)行，是減少輸血反應、保障輸血安全的重要手段。

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457.4.1+1

A

1674-1129(2013)01-0059-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.020

江西省衛(wèi)生廳科技計劃(編號20133048)

胡飄萍,女,1981年7月生,武漢大學碩士學位學歷,主要從事臨床輸血研究。