鄭 偉，張 新，賈 琳

（1.遼寧省腫瘤醫(yī)院 婦一科，遼寧 沈陽 110042；2.山東大學(xué)齊魯醫(yī)院 婦產(chǎn)科，山東 濟(jì)南 250012）

子宮內(nèi)膜癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病機(jī)制目前尚不十分清楚［1］。survivin基因是近年發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的凋亡抑制基因，在多種惡性腫瘤組織中表達(dá)。血管內(nèi)皮生長因子 （VEGF）是特異性最高、功能最強(qiáng)的促血管生長因子，在實(shí)體瘤的血管形成中起重要作用［2、3］。本研究的目的通過免疫組織化學(xué)方法檢測子宮內(nèi)膜癌survivin蛋白及VEGF的表達(dá)，探討其與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)活性的關(guān)系，以期為臨床評估患者預(yù)后及治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2008年10月－2011年10月在院診治的68例子宮內(nèi)膜癌患者，均行病理證實(shí)，年齡

1.2 檢測方法 將組織標(biāo)本連續(xù)切片、組化、染色。兔抗人Survivin抗體、VEGF抗體及DAB顯色試劑盒購自福建邁新生物技術(shù)公司，按說明書操作檢測。以PBS代替第一抗體作為陰性對照，以已知子宮內(nèi)膜癌陽性切片做陽性對照。

1.3 結(jié)果判定 Survivin以胞核中出現(xiàn)黃色顆粒視為陽性，VEGF陽性主要為細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)黃色著色。無顯色為0分，淡黃色為1分，黃色2分，棕黃色3分。另外以陽性細(xì)胞百分率計(jì)分，5%以下為0分，6%－25%為1分，26%－50%為2分，51%－75%為3分，＞75%為4分。兩種積分相加，1分為陰性，2－3分弱陽性，4－5分中等陽性，6－7分強(qiáng)陽性，中等陽性及強(qiáng)陽性計(jì)為陽性病例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，并采用χ2檢驗(yàn)處理，Survivin蛋白與VEGF之間的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 子宮內(nèi)膜癌及子宮內(nèi)膜標(biāo)本Survivin蛋白與VEGF的比較 子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本Survivin蛋白表達(dá)率為70.6%（48／68），顯著高于正常子宮內(nèi)膜標(biāo)本26.0%（13／50）（P＜0.01）；子宮內(nèi)膜癌及子宮內(nèi)膜標(biāo)本 VEGF 陽性率分別為72.1%（49／68）和22.0%（11／50），差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）.

2.2 子宮內(nèi)膜癌Survivin蛋白及VEGF與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 Survivin蛋白及VEGF與淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期及組織分化相關(guān)（P＜0.05），見表1。

表1 Survivin蛋白及VEGF與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 例（%）

2.3 子宮內(nèi)膜癌Survivin蛋白與VEGF水平的相關(guān)性分析 子宮內(nèi)膜癌Survivin蛋白與VEGF水平正相關(guān)（r＝0.582，P＜0.05）。

3 討論

子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制涉及多因素、多階段、多基因變異積累的復(fù)雜過程，具體機(jī)制尚不清楚［4、5］。本組結(jié)果顯示：子宮內(nèi)膜癌組織Survivin蛋白顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織，提示其與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生密切相關(guān)。Survivin是最強(qiáng)的凋亡抑制因子之一，在許多癌組織中高表達(dá)，可抑制半胱天冬酶（Caspase）和 P53等誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡［6、7］。Survivin基因位于17q25，編碼142個(gè)氨基酸，其抑制細(xì)胞凋亡作用主要通過以下途徑［8、9］：①通過抑制Caspase－3及Caspase－7活性而抑制凋亡作用；②促進(jìn)CDK4釋放P21抑制凋亡；③與紡錘體微管結(jié)合，抑制Caspase對紡錘體水解。

Survivin基因的表達(dá)可能與維持基底層細(xì)胞的未分化狀態(tài)以及功能層細(xì)胞的凋亡平衡調(diào)控有關(guān)。Survivin通過抑制內(nèi)膜腺細(xì)胞的凋亡機(jī)制、促進(jìn)其異常增殖并惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致內(nèi)膜癌的發(fā)生。研究表明在非典型增生組織中，Survivin陽性率高于正常子宮內(nèi)膜組織，但是低于子宮內(nèi)膜癌組織，提示Survivin高表達(dá)可能是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的早期事件［10］。表1結(jié)果提示：Survivin與淋巴轉(zhuǎn)移、組織分化及臨床分期密切相關(guān)，在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展中發(fā)揮重要作用。Survivin高表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的惡性程度和淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)，可能為其高表達(dá)賦予腫瘤細(xì)胞更多的生長優(yōu)勢和浸潤、轉(zhuǎn)移潛能［11］，同時(shí)Survivin高表達(dá)預(yù)示患者預(yù)后不良。

本組結(jié)果顯示：子宮內(nèi)膜癌組織VEGF陽性率顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織，且與腫瘤轉(zhuǎn)移、組織分化等相關(guān)。VEGF作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，結(jié)合血管內(nèi)皮細(xì)胞上的受體，通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分化及血管生成［12、13］。VEGF對內(nèi)皮細(xì)胞具有強(qiáng)烈的促分裂、增殖和遷移作用，也能增加小血管的通透性［14、15］。VEGF可改變內(nèi)皮細(xì)胞基因的活化形成，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生蛋白水解酶，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞移動(dòng)。VEGF可以促進(jìn)腫瘤血管及淋巴管生成，為腫瘤細(xì)胞的增殖提供了有利的微環(huán)境，加快了腫瘤的生長。癌細(xì)胞的過度增生引起血管生長相對不足，新生瘤細(xì)胞局部可反饋性刺激VEGF生成，為腫瘤轉(zhuǎn)移浸潤創(chuàng)造了條件。

Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示：子宮內(nèi)膜癌組織Survivin與VEGF顯著相關(guān)。腫瘤發(fā)生發(fā)展受細(xì)胞增殖及新血管生成等因素影響，在卵巢癌及乳腺癌的研究中，Survivin在抑制凋亡的同時(shí)可誘導(dǎo)血管生成已得到證實(shí)。而VEGF可直接促進(jìn)G2／M期Survivin表達(dá)，干擾內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，促進(jìn)增殖，促進(jìn)血管生成。因此，二者共同促進(jìn)了子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展。綜上所述，Survivin及VEGF與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，對判斷患者預(yù)后有一定的預(yù)測價(jià)值。

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