■殷永風(fēng) 葉元土 張寶彤 向朝林 李 賓

（1.蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，江蘇蘇州 215123；2.北京市營(yíng)養(yǎng)源研究所系統(tǒng)營(yíng)養(yǎng)工程技術(shù)研究中心，北京 100069）

飼料油脂是養(yǎng)殖魚類重要的能量來源，也是飼料重要的組成成分之一。魚油、豆油、菜籽油等油脂是常規(guī)飼料油脂重要來源。棉籽油是利用棉籽經(jīng)過壓榨、浸提而得到的油脂，也是一種重要的油脂來源。棉籽油中可能含有棉酚、環(huán)丙烯脂肪酸等抗?fàn)I養(yǎng)因子和有害物質(zhì)，棉籽油能否作為水產(chǎn)飼料油脂原料之一？雖然不同的飼料企業(yè)在進(jìn)行嘗試使用棉籽油，但所取得的效果基本都是負(fù)面的。目前還沒有研究報(bào)告來探討棉籽油在水產(chǎn)飼料中的使用效果。本文以斑點(diǎn)叉尾鮰為試驗(yàn)對(duì)象，研究棉籽油在水產(chǎn)飼料中的使用效果和可行性。

1 試驗(yàn)材料和方法

1.1 斑點(diǎn)叉尾鮰

斑點(diǎn)叉尾鮰平均體重（12.6±3.1）g，共270余尾，為江蘇姜堰市池塘養(yǎng)殖當(dāng)年魚種。試驗(yàn)魚經(jīng)過2周的養(yǎng)殖馴化后，隨機(jī)分為3組，每組3個(gè)平行網(wǎng)箱，共9個(gè)網(wǎng)箱，每個(gè)網(wǎng)箱放養(yǎng)斑點(diǎn)叉尾鮰30尾。

1.2 試驗(yàn)飼料

選用常規(guī)飼料原料設(shè)計(jì)斑點(diǎn)叉尾鮰試驗(yàn)飼料，配方及其營(yíng)養(yǎng)成分見表1。以豆油2.5%為對(duì)照，分別添加2%、4%棉籽油為2個(gè)試驗(yàn)組。

1.3 飼養(yǎng)與管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在室內(nèi)水泥池網(wǎng)箱中進(jìn)行。養(yǎng)殖水體為經(jīng)過沉淀、曝氣的溝渠水,試驗(yàn)水泥池每天換水1/3。正式養(yǎng)殖試驗(yàn)從5月26日至7月26日，共60 d。試驗(yàn)期間溶解氧保持在6.0 mg/l以上，pH值6.5～7.5，水溫及其試驗(yàn)期間的變化如圖1所示，養(yǎng)殖期間水溫大于20℃、且處于上升期，適合魚類快速生長(zhǎng)。每天投喂飼料3次，投喂量為體重的3%～5%。

表1 試驗(yàn)飼料配方及其營(yíng)養(yǎng)成分

圖1 試驗(yàn)期間水溫日變化曲線

1.4 樣品采集

采樣之前，停食24 h后，稱各網(wǎng)箱魚的總重。從每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)取魚8尾，稱重，量體長(zhǎng)，解剖取肌肉和肝胰臟，分離并稱內(nèi)臟團(tuán)、腎臟、肝胰臟、腸脂（包括體側(cè)脂肪）重量；另外，從每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)取魚3尾，用作測(cè)定全魚粗蛋白和粗脂肪。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS 13.0進(jìn)行Duncan's多重比較法分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性，顯著水平為0.05。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)速度與飼料系數(shù)

經(jīng)過60 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)，各組斑點(diǎn)叉尾鮰的特定生長(zhǎng)率和飼料系數(shù)結(jié)果見表2。

表2 斑點(diǎn)叉尾鮰的特定生長(zhǎng)率和飼料系數(shù)

以2.5%豆油為對(duì)照，添加2%和4%棉籽油后，特定生長(zhǎng)率分別下降15.75%、32.12%，差異顯著(P＜0.05)；飼料系數(shù)則分別增加28.94%、80.26%，差異顯著(P＜0.05)；蛋白質(zhì)沉積率分別下降12.64%、41.37%，其中4%棉籽油組與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05)；脂肪沉積率分別下降10.60%、64.56%，其中4%棉籽油組與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05)。

上述結(jié)果表明，在飼料中添加棉籽油使斑點(diǎn)叉尾鮰的生長(zhǎng)速度和對(duì)飼料的利用效率均顯著下降，且4%的棉籽油組蛋白質(zhì)和脂肪沉積率也顯著下降，說明棉籽油不適宜作為斑點(diǎn)叉尾鮰飼料油脂的來源。

2.2 形體指標(biāo)與內(nèi)臟指數(shù)

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，測(cè)定各試驗(yàn)組魚體體重/體長(zhǎng)、臟體比(內(nèi)臟總重占體重百分比)、肝體比、腎體比(肝、腎臟重占體重百分比)和腸脂比（腸系膜脂肪重占體重百分比）的值見表3。各試驗(yàn)組魚體臟體比、肝體比、腎體比和腸脂比之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異，但表現(xiàn)為臟體比、肝體比、腸脂比有增加的趨勢(shì)，而4%棉籽油組體重/體長(zhǎng)則顯著低于豆油組(P＜0.05)。

表3 斑點(diǎn)叉尾鮰的體重/體長(zhǎng)、臟體比、肝體比、腎體比和腸脂比

表3結(jié)果表明，添加棉籽油后，斑點(diǎn)叉尾鮰魚體變瘦，但腸道系膜脂肪、肝臟脂肪沉積量則增加。

2.3 斑點(diǎn)叉尾鮰的主要營(yíng)養(yǎng)成分

2.3.1 全魚、肌肉和肝胰臟的粗蛋白、粗脂肪、水分含量

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，采用常規(guī)方法測(cè)定各組斑點(diǎn)叉尾鮰全魚、肌肉和肝胰臟的粗蛋白、粗脂肪和水分含量，結(jié)果見表4。與豆油組魚體成分比較，在飼料中添加棉籽油后，斑點(diǎn)叉尾鮰全魚的水分含量增加，粗蛋白含量差異不大，而粗脂肪含量減少。肌肉中粗蛋白和水分含量幾乎沒有變化，而粗脂肪含量增加；肝胰臟中水分、粗脂肪含量增加，而粗蛋白含量下降。

表4 斑點(diǎn)叉尾鮰的全魚、肌肉和肝胰臟的粗蛋白、粗脂肪和水分含量(%)

上述結(jié)果表明，在飼料中添加棉籽油后，魚體中水分含量增加，粗脂肪含量減少；但是，肝胰臟中粗脂肪、水分含量均增加，結(jié)合表3中，肝體比也是增加的，因此在飼料中添加棉籽油后，使斑點(diǎn)叉尾鮰出現(xiàn)脂肪性肝病的可能性增大。

2.3.2 全魚、肌肉和腸脂的脂肪酸組成

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，采用氣相色譜儀、以歸一方法測(cè)定了各組斑點(diǎn)叉尾鮰全魚、肌肉、腸道系膜脂肪的脂肪酸組成，同時(shí)測(cè)定了飼料中脂肪酸組成，結(jié)果見表5。在表5的脂肪酸組成中，差異最大的是C16∶0以下，即16碳以下脂肪酸含量的變化，由于添加棉籽油后飼料中C16∶0以下脂肪酸含量明顯高于豆油組飼料，導(dǎo)致全魚、肌肉脂肪中C16∶0以下脂肪酸含量增加。將不同脂肪酸分類統(tǒng)計(jì)分析，飼料中添加棉籽油后，全魚、肌肉、腸道系膜脂肪中飽和脂肪酸(SFA)含量呈明顯增加趨勢(shì)，單不飽和脂肪酸(MUFA)含量呈下降趨勢(shì)，多不飽和脂肪酸(PUFA)也有下降的趨勢(shì)。魚體全魚、肌肉、腸道系膜脂肪中脂肪酸組成與飼料中脂肪酸組成顯示出較強(qiáng)的相關(guān)性。

表5 飼料、全魚、肌肉、腸道系膜中脂肪酸組成(%)

按照一般規(guī)律，養(yǎng)殖魚體脂肪的脂肪酸組成受飼料脂肪酸組成的影響很大，本試驗(yàn)結(jié)果符合這一規(guī)律性。在飼料中添加棉籽油后，導(dǎo)致魚體及其脂肪組織中飽和脂肪酸、尤其是低碳鏈脂肪酸含量明顯高于豆油組的結(jié)果，而不飽和脂肪酸含量則呈下降趨勢(shì)。飽和脂肪酸含量的增加、不飽和脂肪酸含量的減少，將導(dǎo)致油脂的凝固點(diǎn)下降，容易出現(xiàn)硬化現(xiàn)象，并導(dǎo)致細(xì)胞膜流動(dòng)性下降，這是值得關(guān)注的。

2.4 血清脂質(zhì)、總蛋白、葡萄糖含量

試驗(yàn)結(jié)束時(shí),采集各組斑點(diǎn)叉尾鮰血清,用生化蛋白分析儀測(cè)定了血清中總蛋白、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和葡萄糖含量,結(jié)果見表6。與豆油組結(jié)果比較，在飼料中添加棉籽油后,斑點(diǎn)叉尾鮰血清中總蛋白含量顯著增加，血脂中的總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量增加,血糖(葡萄糖)含量增加。結(jié)果顯示,飼料中添加棉籽油后血脂成分發(fā)生了改變，整體上是血脂、血糖含量均增加。血脂含量的增加導(dǎo)致脂肪肝損傷的發(fā)生概率增加。

表6 斑點(diǎn)叉尾鮰血脂、總蛋白、葡萄糖含量

2.5 溶菌酶（LSZ）活力

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，用試劑盒測(cè)定了各組斑點(diǎn)叉尾鮰體表黏液、血清中溶菌酶(LSZ)活力，結(jié)果見表7。與豆油組的結(jié)果比較，在飼料中添加棉籽油后，導(dǎo)致斑點(diǎn)叉尾鮰體表黏液、血清中溶菌酶活力顯著下降，顯示出魚體的非特異免疫力的顯著下降。

表7 斑點(diǎn)叉尾鮰血清和黏液溶菌酶活力（U/ml）

3 討論

棉籽、棉籽油中含有的抗?fàn)I養(yǎng)因子、有害物質(zhì)主要是游離棉酚、環(huán)丙烯脂肪酸等。本試驗(yàn)中沒有測(cè)定棉籽油中這些有害物質(zhì)的含量，而是直接將浸提的棉籽油加入飼料中進(jìn)行試驗(yàn)。

依據(jù)本試驗(yàn)的結(jié)果分析，在飼料中添加棉籽油后，導(dǎo)致養(yǎng)殖的斑點(diǎn)叉尾鮰生長(zhǎng)速度顯著下降，飼料系數(shù)顯著增高，而蛋白質(zhì)、脂肪沉積率均呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。因此，從對(duì)生產(chǎn)性能評(píng)價(jià)結(jié)果分析，棉籽油是不適宜作為斑點(diǎn)叉尾鮰飼料油脂來源的，至于其他魚類，從后面對(duì)魚體成分、肝胰臟影響等分析結(jié)果看，從普遍性原理分析，棉籽油也是不適宜作為水產(chǎn)動(dòng)物飼料中油脂原料直接使用的。

在飼料中添加棉籽油后，導(dǎo)致養(yǎng)殖的斑點(diǎn)叉尾鮰魚體變瘦，魚體水分含量增加，尤其是肝胰臟水分和脂肪含量均增加，肝體比也增加。因此，飼料棉籽油可能主要在肝胰臟、腸道系膜中沉積，有導(dǎo)致脂肪肝的潛在危害。從血脂成分、血糖的變化結(jié)果分析，飼料中添加棉籽油后，導(dǎo)致血脂主要成分含量增加，也有影響魚體脂質(zhì)代謝、尤其是肝胰臟脂質(zhì)代謝的潛在風(fēng)險(xiǎn)，即可能導(dǎo)致養(yǎng)殖魚類肝胰臟損傷作用。這可能是棉籽油對(duì)養(yǎng)殖魚類帶來的主要危害之一。

從脂肪酸結(jié)果分析，普遍的規(guī)律是魚體沉積脂肪的脂肪酸組成受到飼料脂肪酸組成的影響較大。本試驗(yàn)結(jié)果也符合上述規(guī)律。由于添加棉籽油后，飼料中飽和脂肪酸含量、尤其是低級(jí)碳鏈數(shù)（低于16碳）飽和脂肪酸含量很高，導(dǎo)致魚體、肌肉和腸道系膜中飽和脂肪酸含量呈明顯增加的趨勢(shì)，而不飽和脂肪酸含量呈現(xiàn)減少的趨勢(shì)，其結(jié)果將導(dǎo)致魚體沉積的脂肪熔點(diǎn)下降、細(xì)胞膜流動(dòng)性下降，魚體抵抗低溫的應(yīng)激能力顯著下降。養(yǎng)殖魚類肝胰臟、腸道系膜以及肌肉中沉積的脂肪如果熔點(diǎn)下降，在越冬期，水溫將在3℃左右，這將導(dǎo)致這些器官組織脂肪硬化，對(duì)于肝胰臟脂肪硬化的結(jié)果將嚴(yán)重影響到肝胰臟組織結(jié)構(gòu)和功能；腸道系膜脂肪的硬化也將嚴(yán)重影響到腸道的蠕動(dòng)，引起魚體攝食能力、消化吸收能力的顯著下降。這種情況與在新疆地區(qū)的鯉魚飼料中，曾經(jīng)使用過棉籽油導(dǎo)致鯉魚在越冬期、越冬后出現(xiàn)死亡率增加、肝硬化、腸道硬化的現(xiàn)象是吻合的。

4 結(jié)論

綜合上述結(jié)果，棉籽油不適宜在水產(chǎn)飼料中使用，不能作為水產(chǎn)飼料中的油脂來源，尤其是對(duì)于需要經(jīng)歷越冬期的養(yǎng)殖魚類而言，棉籽油是不能作為水產(chǎn)飼料油脂原料使用的。