葉稱梅，華春燕（廣東省英德市人民醫(yī)院供應(yīng)室，廣東 英德 513000）

生物監(jiān)測是一種可靠的監(jiān)測方法，是衡量滅菌質(zhì)量的金標(biāo)準(zhǔn)，但傳統(tǒng)的生物監(jiān)測手段需要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)48 h才能出測試結(jié)果，特別是在植入物零風(fēng)險管理應(yīng)用上顯得時效性很差。2010年12月購置了一臺3M公司生產(chǎn)的快速培養(yǎng)自動閱讀器，并立即投入使用。對所有滅菌物品除進(jìn)行1次/周常規(guī)傳統(tǒng)生物監(jiān)測外，對植入性手術(shù)器械，植入物，外租手術(shù)器械進(jìn)行每包每鍋次快速生物監(jiān)測，自2010年12月～2012年5月開展253例次植入物及外租器械快速生物監(jiān)測，全部合格，臨床沒有與植入物及滅菌后的無菌物品相關(guān)的感染報導(dǎo)?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：自2010年12月～2012年5月開展253例次植入物及外租器械快速生物監(jiān)測，應(yīng)用快速生物監(jiān)測的同時，每周同時在同一標(biāo)準(zhǔn)包中放入傳統(tǒng)的生物監(jiān)測指示劑進(jìn)行生物監(jiān)測1次，對2臺山東新華醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的XG1.D型脈動真空壓力蒸汽滅菌器進(jìn)行傳統(tǒng)生物監(jiān)測分別為130次及123次。監(jiān)測材料選用3M公司的3MTMAttestTM290快速生物培養(yǎng)監(jiān)測/自動閱讀器及配套使用的3MTMAttseTM1292快速生物指示劑（嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片）。滅菌器械是山東新華醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的XG1.D型脈動真空壓力蒸汽滅菌器2臺，設(shè)定蒸汽壓力0.21 MPa、滅菌溫度132℃、脈動真空3次、滅菌時間10 min，測試包采用標(biāo)準(zhǔn)測試包。

1.2 監(jiān)測方法

1.2.1 操作要求：具備醫(yī)院消毒員資格，持有高壓滅菌器操作上崗證，經(jīng)過3M快速生物監(jiān)測培養(yǎng)/自動閱讀器知識培訓(xùn)。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)測試包制作與器械包準(zhǔn)備：取16條已洗滌的棉布巾（40 cm×65 cm），長邊折三折，然后對折，最后將折好的棉布巾疊放在一起（折疊邊左右擺放），制成15 cm×23 cm×23 cm的標(biāo)準(zhǔn)測試包，將嗜熱脂肪芽孢菌片小試管及第五類化學(xué)指示卡置于標(biāo)準(zhǔn)包的中心。為了證實該鍋的可靠性，在快速生物監(jiān)測的同時，每周在同一標(biāo)準(zhǔn)包中放入傳統(tǒng)的生物監(jiān)測指示劑進(jìn)行生物監(jiān)測1次，嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片用小試管裝好，芽胞菌片含量為（5×105～5×106）cfu/片，兩種生物指示劑放于標(biāo)準(zhǔn)包的中央。測試包放在排氣口上方的滅菌筐內(nèi)。盡量將植入物或外來器械放于滅菌器上層，裝載時為便于蒸汽穿透，物品不得超過柜室容積的90%或＜5%。包與包之間需相隔2.5 cm，最上層滅菌包距柜室頂部至少7.5 cm。

1.2.3 快速生物監(jiān)測自動培養(yǎng)/閱讀器準(zhǔn)備：檢查快速生物監(jiān)測培養(yǎng)/自動閱讀器性能是否良好，設(shè)置參數(shù)，并提前預(yù)熱半小時。

1.2.4 培養(yǎng)操作：待滅菌周期結(jié)束后，取出標(biāo)準(zhǔn)包內(nèi)菌片試管。戴好護(hù)目眼鏡、手套，按壓關(guān)閉生物指示劑帽，在壓碎孔擠破含培養(yǎng)基的小試管，捏住指示劑帽端，在桌面上輕敲試管的底部，使培養(yǎng)基濕潤在試管底部的芽孢片，輕輕搖混勻，再將生物指示劑放進(jìn)合適的培養(yǎng)/閱讀孔，同時設(shè)同一批次未經(jīng)滅菌的嗜熱脂肪桿菌芽孢片試管為陽性對照管，插入對照培養(yǎng)/閱讀孔，關(guān)閉自動閱讀器孔蓋，等待綠色或紅色指示燈來顯示結(jié)果。放入培養(yǎng)/閱讀孔后不要移動地方，如果不小心取出生物指示劑，必須在10 s內(nèi)放回原位，否則會導(dǎo)致監(jiān)測結(jié)果丟失。傳統(tǒng)的生物監(jiān)測嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片，送檢驗科在無菌操作下從試管中取出并移種菌片溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液中，使培養(yǎng)基與菌片混合在一起，置于56℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48 h，同時接種陰性和陽性對照，觀察結(jié)果。

1.2.5 結(jié)果讀取：快速生物監(jiān)測經(jīng)3 h培養(yǎng)，自動培養(yǎng)/閱讀器顯示滅菌后試管為“綠色”陰性，對照管顯示“紅燈”為陽性。傳統(tǒng)的生物監(jiān)測在48 h后觀察結(jié)果，判斷培養(yǎng)管內(nèi)培養(yǎng)基不變色為無菌生長，培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色時則滅菌失敗，滅菌處理后菌片和陰性對照培養(yǎng)全部無菌生長，陽性對照有菌生長，即可判定為滅菌合格。

1.2.6 記錄：植入物放行實施可追溯管理，可提高醫(yī)院無菌保證水平和實施植入物零風(fēng)險[1]。根據(jù)WS/310.3-2009規(guī)范要求，我院消毒供應(yīng)室設(shè)計了快速生物監(jiān)測記錄本，內(nèi)容包括手術(shù)器械名稱，包內(nèi)器械總件數(shù)、植入物數(shù)量、生產(chǎn)廠家及外租器械廠家名、滅菌器爐號、爐次、滅菌溫度、壓力、時間、滅菌日期、失效日期、滅菌操作者及核對者姓名、快速生物監(jiān)測結(jié)果陰性標(biāo)簽、對照管陽性標(biāo)簽、第五類化學(xué)指示卡。監(jiān)測完成后由觀察者記錄生物監(jiān)測結(jié)果，張貼生物監(jiān)測標(biāo)簽及化學(xué)指示卡，觀察者及核對者簽名，實行雙人簽名負(fù)責(zé)制。傳統(tǒng)的生物監(jiān)測結(jié)果由檢驗科醫(yī)生監(jiān)測，發(fā)放檢驗結(jié)果報告。每批次生物監(jiān)測均歸檔留存，并保存B-D試驗結(jié)果、滅菌過程記錄、批量監(jiān)測、化學(xué)監(jiān)測，資料留存3年，一旦發(fā)生植入物術(shù)后感染可進(jìn)行無過錯舉證[2]。

2 結(jié)果

253例次植入物及外租器械快速生物監(jiān)測，全部合格，臨床沒有與植入物及滅菌后的無菌物品相關(guān)的感染報導(dǎo)。253管做對照的末經(jīng)滅菌的快速生物指示劑均為陽性。經(jīng)滅菌后的快速生物指示劑在培養(yǎng)3 h后即變?yōu)樽仙?53次監(jiān)測結(jié)果與傳統(tǒng)培養(yǎng)48 h監(jiān)測結(jié)果相一致。

3 小結(jié)

傳統(tǒng)的生物監(jiān)測是將生物指示劑經(jīng)過一個滅菌周期，在無菌操作下從試管中取出并移種菌片溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液中，使培養(yǎng)基與菌片混合在一起，置于56℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48 h，方可人工對比判斷結(jié)果?？焖偕锉O(jiān)測指示劑與傳統(tǒng)方法相比，具有操作簡單、方便，并不需無菌移種和無菌配制培養(yǎng)基，可避免假陽性結(jié)果，準(zhǔn)確性高，監(jiān)測效果理想，結(jié)果可靠，所需時間短，與傳統(tǒng)生物監(jiān)測方式相比，縮短了檢測等待報告時間45 h，能夠做到即時監(jiān)測。它的使用意義在于出現(xiàn)不合格產(chǎn)品可以在4 h內(nèi)召回，查找原因重新滅菌，確保滅菌物品使用安全，進(jìn)而達(dá)到減少和控制感染的發(fā)生，為外科植入性手術(shù)急診手術(shù)器械的安全使用提供更有利保障，值得推廣應(yīng)用。

[1] 李麗華,杜秋煥,王江濱,等.可追溯管理在消毒滅菌物品管理中的應(yīng)用[J].中華感染學(xué)雜志,2009,19(7)：802.

[2] 趙香玉,邸 欣,生晶輝,等.骨科植入物器械在消毒供應(yīng)室的安全管理[J].中華感染學(xué)雜志,2010,20(17)：2648.