梁煜 劉志輝 王敏

NS398對(duì)卵巢癌細(xì)胞系CAOV3免疫殺傷作用的體外研究

梁煜 劉志輝 王敏

目的觀察和探討COX-2選擇性抑制劑NS398對(duì)卵巢癌細(xì)胞系CAOV3增殖抑制作用及對(duì)CTL細(xì)胞體外免疫殺傷作用的影響。方法放射免疫法測(cè)定CAOV3細(xì)胞及經(jīng)NS398處理的CAOV3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的PGE2含量，流式細(xì)胞儀分析CTL細(xì)胞表型，MTT比色法檢測(cè)CTL細(xì)胞殺傷活性。結(jié)果NS398能抑制CAOV3細(xì)胞分泌PGE2；經(jīng)NS398處理的CAOV3刺激誘導(dǎo)產(chǎn)生CTL細(xì)胞對(duì)CAOV3細(xì)胞的殺傷活性顯著增加。結(jié)論NS398可能成為卵巢癌預(yù)防與治療的新靶點(diǎn)。

NS398;CTL;卵巢癌

卵巢癌起病隱匿，五年生存率在30%左右[1]。NS398是一種磺胺類藥劑的衍生物，是COX-2選擇性抑制劑[2]。特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)殺傷腫瘤作用是抗原特異性的[3]，本研究旨在探討NS398對(duì)卵巢癌細(xì)胞系CAOV3增殖抑制及對(duì)CTL細(xì)胞體外免疫殺傷作用的影響，為卵巢癌的預(yù)防和治療提供新的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1材料 卵巢漿液性癌細(xì)胞系CA0V3由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)室提供。NS398為美國(guó)Cayman公司產(chǎn)品。PGE2放免測(cè)定試劑盒由蘇州醫(yī)學(xué)院血液研究所提供。

1.2放射免疫法測(cè)定CAOV3細(xì)胞及經(jīng)NS398處理的CAOV3細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的PGE2含量。

1.3卵巢癌CAOV3細(xì)胞體外刺激外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)誘導(dǎo)特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)；流式細(xì)胞儀分析CTL細(xì)胞表型。

1.4CTL殺傷活性檢測(cè)：采用MTT比色法檢測(cè)CTL細(xì)胞殺傷活性。

2 結(jié)果

2.1PGE2放射免疫結(jié)果顯示，經(jīng)NS398處理后，CAOV3細(xì)胞培養(yǎng)液中PGE2含量減低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2在IL-2存在的條件下，PBMC經(jīng)NS398處理的CAOV3細(xì)胞兩次抗原刺激成功誘導(dǎo)產(chǎn)生CTL，表達(dá)CD3+CD8+陽性率分別為41%、64%，而未經(jīng)處理的PBMC CD3+CD8+陽性率僅為25%。

2.3MTT比色法檢測(cè)CTL殺傷活性結(jié)果顯示，CTL細(xì)胞對(duì)CAOV3細(xì)胞具有明顯的殺傷活性，實(shí)驗(yàn)組CTL細(xì)胞對(duì)CAOV3的殺傷率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

3 討論

環(huán)氧合酶是前列腺素合成過程中的重要限速酶，COX-2及其代謝產(chǎn)物與包括卵巢癌在內(nèi)機(jī)體多種惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。機(jī)體存在多種免疫監(jiān)視機(jī)制，發(fā)揮著重要的抗腫瘤作用，細(xì)胞免疫是抗腫瘤的主力，特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)能特異性殺傷腫瘤細(xì)胞。但腫瘤在人體免疫監(jiān)視下仍能發(fā)生、發(fā)展并且發(fā)生轉(zhuǎn)移，原因可能在于腫瘤具有免疫抑制和/或免疫逃逸能力。

本研究表明COX-2選擇性抑制劑NS398作用于卵巢癌細(xì)胞，能明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖，呈劑量和時(shí)聞依賴關(guān)系。并且能明顯抑制腫瘤細(xì)胞分泌PGE2。另外，經(jīng)NS398處理的CAOV3細(xì)胞刺激誘導(dǎo)產(chǎn)生CTL對(duì)CAOV3細(xì)胞的殺傷活性顯著增加。提示卵巢癌細(xì)胞分泌PGE2增加對(duì)免疫的影響可能與其影響APC提呈抗原有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)研究從一個(gè)新的角度探討NS398對(duì)免疫的調(diào)節(jié)作用。Stolina M等[6]研究的COX-2選擇性抑制劑可減少前列腺素生成，部分逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫抑制作用的結(jié)論亦與本研究相一致。本研究為NS398用于卵巢癌的預(yù)防及治療開辟了光明前景。

[1] 連立娟.林巧稚婦科腫瘤學(xué).第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996:449.

[2] Futaki N. NS398， a novel non-steroidal anti-inflammatory drugwithpotent analgesic and antipyretic effects， which causes minimal stoach lesions. Gen Pharmacy，1993 24：105-1 103.

[3] 陳慰峰.醫(yī)學(xué)免疫學(xué).第3版.人民衛(wèi)生出版社，2000:230.

110021 沈陽市維康醫(yī)院婦產(chǎn)科(梁煜)；沈陽市婦嬰醫(yī)院(劉志輝)；中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科(王敏)