比爾來西肯·賽都力，吾蘭·呼加汗

（伊犁職業(yè)技術學院，新疆 伊犁835000）

巴氏桿菌是動物體內(nèi)的常見條件致病性細菌之一，正常的家畜、家禽及野生動物體內(nèi)都可以分離到。當外界因素劇烈變化或機體抵抗力下降時，?？墒箘游镏虏。瑖乐乜芍聞游锼劳觯?］。牛巴氏桿菌病又稱牛出血性敗血癥，是以高熱、肺炎、急性胃腸炎及內(nèi)臟廣泛性出血為主要特征的一種急性、熱性傳染病。2010年5月，伊犁某縣養(yǎng)殖飼養(yǎng)的奶牛有2頭突然發(fā)病。其臨床癥狀為病初體溫升高（41．6℃），精神沉郁，呆立，低頭拱背，口吐白沫，臥地不起，飲食欲明顯減退或廢絕，呼吸加快，個別牛有痛苦性干咳，流涎，肌肉震顫，鼻鏡干燥，兩眼流淚，腹痛，下痢，糞便初為粥狀，后期呈液狀，間有黏液、黏膜碎片及血液，有惡臭，有個別牛鼻孔內(nèi)和尿中混有血液。隨病情發(fā)展在頸部、咽喉部及胸部的皮下出現(xiàn)水腫，同時伴發(fā)舌及周圍組織的高度腫脹，舌伸出齒外，呈暗紅色，可視黏膜發(fā)紺。

當病死奶牛病理剖檢可見黏膜、漿膜、舌、皮下組織肌肉中有出血點，脾臟不腫大，有小出血點，肝臟腫脹、質(zhì)脆，個別牛肝臟表面有壞死灶，腎稍腫，淋巴結(jié)顯著水腫，肺明顯水腫，有出血點，肺臟表面有肝變區(qū)，呈大理石樣花紋；胸膜粘連，胸腔內(nèi)有纖維素性滲出物，心冠脂肪、心內(nèi)外膜出血明顯，心包積水，頸部、咽喉部、四肢皮下有漿液性浸潤，切開流出深黃色、透明的液體，咽周圍組織呈黃色膠膝樣浸潤，咽淋巴結(jié)和前頸淋巴結(jié)高度急性腫脹，上呼吸道黏膜卡他性潮紅。通過流行病學調(diào)查、臨床癥狀、病理變化，初步診斷為奶牛巴氏桿菌病，試驗結(jié)果報告如下。

本實驗室從送檢的1頭奶牛肺，肝，心等臟器；做涂片檢查，結(jié)果：牛肝臟中分離到1株高致病性巴氏桿菌，診斷為奶牛巴氏桿菌病。對疑似巴氏桿菌病死亡牛的組織器官進行病理組織切片觀察，為診斷該病提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 病料來源 采自2010年5月伊犁某縣養(yǎng)殖戶內(nèi)疑似巴氏桿菌病牛1頭。送檢時已死亡9h。

1．2 病料處理 分別采取心、肝、脾、肺、腎等組織器官用10%福爾馬林固定。

1．3 主要試劑 無水乙醇、蘇木素、伊紅、甲醛等試劑，均購自北京天宇生物試劑公司。

1．4 儀器 YL3輪式切片機（上海儀表廠）；倒置顯微鏡（SANYO公司，型號 MCO－17AI）；Olympus普通光學顯微鏡（JAPAN）；數(shù)碼照相機（SONY）。

2 方法

2．1 細菌檢測 無菌采取心、肝、脾、肺、腎及腸內(nèi)容物涂片，分別用革蘭染色和堿性美藍染色后鏡檢；將病料無菌操作接種于血清肉湯培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基進行細菌分離鑒定；將分離病原菌按0．3mL／只劑量經(jīng)腹腔注射法接種10只小鼠進行動物試驗。

2．2 病理學觀察 對送檢病牛進行剖檢，觀察各組織器官的病理學變化，取心、肝、脾、肺、腎等組織，經(jīng)福爾馬林溶液固定后，進行常規(guī)石蠟包埋、切片以及H．E．染色，顯微鏡觀察并照相分析。

3 結(jié)果

3．1 細菌檢測結(jié)果 經(jīng)革蘭染色的病料涂片見有大量的兩端鈍圓、兩極濃染的紅色球桿菌，堿性美藍染色可見大量的呈明顯兩極著色的球桿菌；血清肉湯培養(yǎng)基變渾濁，有大量細菌生長，涂片革蘭染色鏡檢可見大量均勻的兩端濃染的球桿菌；麥康凱培養(yǎng)基無細菌菌落生長；血清肉湯培養(yǎng)的細菌接種的10只小鼠均在16～48h內(nèi)死亡。取小鼠病變臟器觸片染色鏡檢并同時進行細菌分離培養(yǎng)，其分離細菌的特征與病料中分離的一致。

3．2 剖檢結(jié)果 病牛消瘦，被毛無光澤，可視黏膜發(fā)白。眼觀主要病變?yōu)榱馨徒Y(jié)腫大、出血，表現(xiàn)為出血性淋巴結(jié)炎；心包、胸腔積液；心肌可見明顯的白色壞死灶，心包膜，心內(nèi)、外膜均有出血點和出血斑；脾臟皺縮，質(zhì)地柔軟，表面分布大量白色斑點（見中插彩版圖1）；肺臟膨大，表面有塌陷，呈壞疽性肺炎變化（見中插彩版圖2）；肝臟腫大，有塊狀壞死灶和白色小結(jié)節(jié)（見中插彩版圖3）。

3．3 病理組織學變化 心肌纖維腫脹，部分肌纖維崩解斷裂，心肌纖維間毛細血管擴張充血，肌漿中含有大量紅染顆粒，呈顆粒變性變化；部分肌纖維崩解斷裂，在斷裂部有多量的紅細胞，呈局灶性出血；肝臟呈中毒性營養(yǎng)不良的變化，肝小葉失去固有結(jié)構(gòu)，小葉中央靜脈淤血，部分肝細胞壞死；脾小體發(fā)生壞死，脾臟紅髓和白髓界限不清，有大量炎性細胞浸潤；脾小體發(fā)生壞死，細胞核溶解碎裂，并有大量炎性細胞，脾小梁被支解成島嶼狀；肺泡腔內(nèi)見有大量的巨噬細胞；肺泡內(nèi)有大量的嗜中性粒細胞，呈現(xiàn)化膿性肺炎的變化；支氣管內(nèi)有大量的嗜中性粒細胞滲出，呈化膿性支氣管炎；部分肺組織中細胞壞死，呈均質(zhì)紅染結(jié)構(gòu)，壞疽性肺炎；肺細支氣管和小血管周圍結(jié)締組織增生，呈現(xiàn)支氣管和小動脈周圍炎變化；部分肺泡內(nèi)含大量變性、壞死的嗜中性粒細胞；另有部分肺泡中含有大量纖維蛋白和少量的白細胞，呈現(xiàn)纖維素性肺炎變化（見中插彩版圖4）；腎臟中腎小管壞死（腎小管上皮細胞胞核溶解消失，壞死細胞碎片進入管腔，使整個腎小管呈均質(zhì)紅染的結(jié)構(gòu)，臨床檢驗出現(xiàn)蛋白尿、管型尿）；腎小管間毛細血管擴張充血，部分腎小管上皮細胞壞死。

4 討論

推測本病例的發(fā)生是外因與內(nèi)因相互作用的結(jié)果。首先在正常情況下，動物呼吸道內(nèi)存有巴氏桿菌，但并不引起動物發(fā)病，而當外界或機體內(nèi)環(huán)境改變時，機體的抵抗力下降，造成菌群失調(diào)，毒力增強，由常在菌變?yōu)橹虏【?。該病原菌首先在其最近的組織器官大量繁殖并引發(fā)病變，并開始出現(xiàn)較輕微的癥狀。在此之后，機體抵抗力進一步下降，細菌通過血液途徑或淋巴途徑進入全身各個器官，并引起多器官出血性炎癥，形成敗血癥。

一般認為，敗血癥時，脾臟較正常增大2～3倍，質(zhì)地變軟，被膜緊張，脾組織原有結(jié)構(gòu)模糊不清，顯微鏡觀察脾臟有大量白細胞浸潤和網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞增生，脾小體受壓而變小，即所謂的“敗血脾”［2－3］。

本試驗從臨床送檢的牛病料中分離獲得一株病原菌，經(jīng)涂片、染色、培養(yǎng)基上的變化試驗等系統(tǒng)鑒定，初步證明該菌株為多殺性巴氏桿菌

本病例大體解剖觀察到脾臟稍腫大，病理組織學觀察到脾淋巴組織減少，脾小體結(jié)構(gòu)松散；心肌的局灶性壞死，部分心肌纖維斷裂、肌間有大量的炎性細胞浸潤；該牛腎臟中可見明顯的腎小管管腔被壞死脫落的腎小管上皮細胞堵塞的現(xiàn)象，由此判斷牛生前的尿液中可能檢測的管型尿。另外，本病例最突出的組織學病變是肺臟的壞疽性肺炎變化，由于臨床上?？人院秃粑щy的主要原因，加上敗血癥導致心力衰竭并使該牛死亡的最后原因。

［1］ 張福春．牛巴氏桿菌病的防治措施［J］．養(yǎng)殖技術顧問，2011（01）：129－130．

［2］ Jubb K V F，Kennedy P C，Palmer N．Pathology of Domestic Animals［M］．4th edition．California：Acadmic Press，1992：55－88．

［3］ 汪開毓，熊焰，耿毅．亞成體大熊貓細菌性敗血癥的病理學觀察［J］．中國獸醫(yī)科技，2000，30（1）：28－29．