張 燕

（新疆維吾爾自治區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心，烏魯木齊 830002）

東莨菪堿建立干眼動(dòng)物模型研究綜述

張 燕

（新疆維吾爾自治區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心，烏魯木齊 830002）

干眼綜合癥是當(dāng)今社會(huì)高發(fā)的眼部疾病之一，在對人類的干眼綜合癥病人研究中發(fā)現(xiàn)，干眼綜合癥病人出現(xiàn)了各種發(fā)病類型，其造成的眼部不適感影響到人們的正常用眼。

研究學(xué)者將干眼綜合癥定義為由眼部眼表（包括角膜、結(jié)膜、瞼板腺）病變或淚液引起的淚腺、淚膜炎癥及眼部神經(jīng)異常，主要表現(xiàn)為眼部異常不適、結(jié)膜不同程度的充血、淚液滲透壓增高、視力下降及眼表損傷的各種表達(dá)。干眼癥可分為蒸發(fā)型及水液缺乏型兩種不同病因引起的干眼型。其中水液缺乏干眼型的主要特征以淚腺功能紊亂為主，而蒸發(fā)干眼型的主要病癥則是淚液正常分泌但是眼表水分不足，這些干眼型病癥都是由于瞼板腺功能缺失或眼表炎癥、眼表功能紊亂及眼瞼活動(dòng)失調(diào)等。

目前，全球人口均數(shù)日漸趨于老齡化和環(huán)境的污染，加之各種不良的用眼習(xí)慣和庸醫(yī)的非常規(guī)治療是環(huán)境的干眼綜合癥的主要病因，而且發(fā)病越來越低齡化。醫(yī)學(xué)工作者對干眼基礎(chǔ)研究必須建立在真正能模擬人類發(fā)病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型上，由于缺乏完整性的干眼綜合癥動(dòng)物模型，所以干眼綜合癥的病因到現(xiàn)在沒有完全揭示。

藥物藥效加上干燥的環(huán)境是雙管齊下的建立干眼綜合癥動(dòng)物模型的手段。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處于較長時(shí)間的干燥環(huán)境中，全身尤其是眼部受到最大程度的水分蒸發(fā)，如同現(xiàn)代人長時(shí)間處于電腦屏幕前和單一的辦公環(huán)境中一樣，直接導(dǎo)致眼表結(jié)膜的損傷。

1998年，科學(xué)家Stern以相連的神經(jīng)控制為主線，提出淚膜、角結(jié)膜上皮、淚腺及眼瞼組成一個(gè)整體的淚液分泌單位，以此為理論可以解釋眼表的疾病引起淚液分泌異常。Stephen C科學(xué)研究團(tuán)隊(duì)利用藥物東莨菪堿的藥理結(jié)合營造干燥環(huán)境，以抑制小鼠淚液的產(chǎn)生及制造小鼠眼部對干燥環(huán)境的應(yīng)激，構(gòu)建小鼠的角膜炎模型，該模型成功的模仿人干眼角膜炎的病理特征，小鼠出現(xiàn)淚液干涸和角膜滲透壓增高、淚腺和結(jié)膜的細(xì)胞出現(xiàn)炎性浸潤、眼角膜經(jīng)熒光染色后著色變深、結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度降低、結(jié)膜及眼表上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)及層次錯(cuò)疊，導(dǎo)致表層細(xì)胞過度分化直至消亡，淚膜的細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變，使淚膜喪失其固有的穩(wěn)定性。

Paiva采用此方法研究干眼綜合癥小鼠模型也認(rèn)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的角膜上皮細(xì)胞損傷，繼而調(diào)亡，這可能是干眼綜合癥的病患角膜熒光染色增深的主要原因。

學(xué)者Cintia S同樣采用的是藥物東莨菪堿干預(yù)合并干燥應(yīng)激的方式，正常的BALB/C小鼠經(jīng)藥物注射并干燥應(yīng)激5 d后，通過摘取其脾臟細(xì)胞，采用皮下移植的方式注射到BALB/C系裸鼠皮下，受試裸鼠出現(xiàn)結(jié)膜杯狀細(xì)胞數(shù)量下降，結(jié)膜及淚腺同樣也出現(xiàn)細(xì)胞浸潤。藥物東莨菪堿在藥理學(xué)中來說，確實(shí)有抑制腺體、切斷膽堿受體的功能，在此藥理干預(yù)下，動(dòng)物眼部較容易出現(xiàn)炎性效果，且與之前的阿托品類藥物滴眼建立干眼模型相比，藥物東莨菪堿合并環(huán)境干燥應(yīng)激所建立的干眼綜合癥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型所表現(xiàn)的眼表細(xì)胞炎癥和淚腺功能紊亂及損傷，較好的模擬了干眼綜合癥病人的病變，眼部出現(xiàn)的急性毒性反應(yīng)較小，藥物效果也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于滴眼藥物效果。但是因?yàn)樗幬锸瞧は掠盟?，引起?dòng)物自身的急性應(yīng)激和其他副作用，同時(shí)也干擾了實(shí)驗(yàn)研究的整體和準(zhǔn)確性。

Niederkom實(shí)驗(yàn)室則改變了Cintia S實(shí)驗(yàn)流程，同樣是使用藥物東莨菪堿干預(yù)合并干燥應(yīng)激的方式，將正常的BALB/C小鼠經(jīng)藥物注射并干燥應(yīng)激5 d后，通過摘取其脾臟細(xì)胞，采用皮下移植的方式注射到BALB/C系裸鼠皮下，但在皮下移植脾細(xì)胞前將受試小鼠的T細(xì)胞剔除，降低了應(yīng)激小鼠脾臟細(xì)胞在移植后可能出現(xiàn)的致病風(fēng)險(xiǎn)，這次試驗(yàn)的結(jié)果與前人不同，在經(jīng)受皮下移植脾細(xì)胞后的裸鼠眼表沒有產(chǎn)生細(xì)胞的炎性病變。這證明了藥物誘導(dǎo)加環(huán)境干燥應(yīng)激建立干眼癥小鼠模型中T細(xì)胞是主要的誘導(dǎo)病變細(xì)胞。眼部炎癥導(dǎo)致眼部正常的組織細(xì)胞呈現(xiàn)免疫應(yīng)激反應(yīng)，炎癥細(xì)胞因子促使各組織比如眼表或者淚腺的細(xì)胞發(fā)生浸潤，阻斷或是妨礙淚腺神經(jīng)傳導(dǎo)功能，誘發(fā)眼部產(chǎn)生干眼綜合癥等病變。

近期研究人員Fabiani和肖啟國等使用藥物東莨菪堿干預(yù)合并干燥應(yīng)激的方式建立干眼綜合癥小鼠模型時(shí)發(fā)現(xiàn)，在小鼠的模型建立過程中，實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ托∈蟮臏I液分泌情況及結(jié)膜細(xì)胞浸潤狀態(tài)都出現(xiàn)了很小的但是值得關(guān)注的反跳表達(dá)，這也許與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)體的代償機(jī)制有關(guān)，但是隨著實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行，藥效和環(huán)境的影響造成動(dòng)物機(jī)體、神經(jīng)或組織細(xì)胞的損傷加大，這種代償?shù)墓δ芤簿椭饾u的消失殆盡。

藥物東莨菪堿干預(yù)合并干燥環(huán)境應(yīng)激的方法可以成功的建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物干眼綜合癥模型，其對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的組織器官造成的損傷及病理學(xué)上的改變，與人干眼綜合癥病人較為一致，是應(yīng)用較廣且簡便的干眼綜合癥動(dòng)物模型建立方法，但是干眼綜合癥病癥的多樣性及發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性，不是在一種簡單相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型上就能研究透徹的，必須長期觀察摸索，采用復(fù)合方法建立干眼綜合癥的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，才能逐漸對癥攻克干眼綜合癥。