張 燕* 方建華 劉玉振

（河南省紅十字血液中心檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450002）

血小板細(xì)菌檢測的必要性

張 燕* 方建華 劉玉振

（河南省紅十字血液中心檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450002）

血液制品；細(xì)菌檢測；單采血小板

血液制品的安全性一直是我們最為關(guān)注的問題，上個世紀(jì)相關(guān)學(xué)者一直致力于血液傳染病的研究，而血液的細(xì)菌污染同樣不可忽視，特別是血小板，它的保存溫度（22℃）為細(xì)菌生長創(chuàng)造了有利條件。因此，我們要嚴(yán)格預(yù)防和控制血液制品的細(xì)菌污染，單采血小板的細(xì)菌檢測勢在必行。

1 國內(nèi)外對細(xì)菌檢測的研究

1.1 早在2001年，Matthew J就美國在1998～2000年的血小板細(xì)菌污染問題做了研究，其中單采血小板1804725U，濃縮血小板1033671U，共發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染29例，其中6例死亡[1]。在2000年英國的嚴(yán)重輸血危險(xiǎn)性檢測系統(tǒng)報(bào)告表明，28例輸血相關(guān)死亡病例中，有3例是細(xì)菌污染引起的[2]。在2002年，英國的James對醫(yī)院輸血科機(jī)采血小板做常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)，2678份血小板中有16份陽性，陽性率為0.6%。法國的血液監(jiān)視系統(tǒng)顯示，在1996～1997年，33例死亡病例中有5例是細(xì)菌污染引起的[3]。因此，美國紅十字會從2004年開始對單采血小板進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，其陽性率高達(dá)血液傳染病的10倍。

1.2 國內(nèi)對于細(xì)菌檢測的研究遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后與西方國家，2004年衛(wèi)生部在全國細(xì)菌大會專門討論了血液制品的細(xì)菌安全問題。同時，上海血液中心的高峰和成都血液中心的洪纓分別闡述了血液細(xì)菌污染問題的重要性和必要的措施[4-5]。2006年劉仁強(qiáng)等對3073例輸注血小板的細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行了分析，結(jié)果表明單采血小板的細(xì)菌陽性率為0.47%[6]。

2 常用檢測方法的介紹

2.1 細(xì)菌培養(yǎng)法

細(xì)菌培養(yǎng)法為細(xì)菌檢測的金標(biāo)準(zhǔn)，對于血液中的細(xì)菌培養(yǎng)同樣適用。宜昌市中心血站的高均翠對單采血小板進(jìn)行了細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，分別采用了改良馬丁/硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基和BacT/ALERT 3D 120全自動微生物檢測系統(tǒng)培養(yǎng)。1877份單采血小板均在采集后24h內(nèi)取樣，充分混勻后擠壓到轉(zhuǎn)移帶10～15mL，熱合封閉。最終得出結(jié)論，硫乙醇酸鹽/改良馬丁法的陽性檢出率為0.1%，BacT/ALERT 3D 120系統(tǒng)陽性檢出率為0.6%，且BacT/ALERT 3D 120系統(tǒng)陽性結(jié)果檢出的時間早于硫乙醇酸鹽/改良馬丁法[7]。東莞市中心血站的秦艷蘭等對2390份單采血小板采用全自動微生物培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)其假陽性率高達(dá)83%，通常必須通過轉(zhuǎn)種培養(yǎng)才能確定[8]。由此可見，普通的細(xì)菌培養(yǎng)法時間長和檢出率低成為其不能再血站系統(tǒng)推廣的阻力。

2.2 核酸檢測法

隨著核酸檢測技術(shù)的不斷推廣，越來越多的血站建立了核酸檢測實(shí)驗(yàn)室，這對于細(xì)菌檢測的核酸化提供了有利條件。2007年上海血液中心的馬敏等[9]就采用熒光定量PCR方法對金黃色葡糖球菌和大腸埃希氏桿菌的基因組DNA針對16s rRNA基因保守序列進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該方法對金黃色葡萄球菌的最低檢出量為0.3CFUs/PCR，對大腸埃希氏桿菌的最低檢出量為0.1 CFUs/PCR。

3 討 論

血小板制品細(xì)菌污染的情況要引起相關(guān)部門的重視，細(xì)菌的有效檢測也是減少血液制品輸注過程中產(chǎn)生一系列輸血反應(yīng)及醫(yī)療糾紛的關(guān)鍵。國外的一些血站已經(jīng)將細(xì)菌檢測作為常規(guī)項(xiàng)目開展，世界各地對于細(xì)菌污染問題的報(bào)道逐漸增多[10-12]，國內(nèi)一些血液中心關(guān)于血小板細(xì)菌污染的調(diào)查研究表明國內(nèi)同樣存在這種問題，這就提示我們血小板制品的細(xì)菌污染問題需要重視起來。隨著檢測技術(shù)的不斷提高，采用熒光定量PCR可以將血液中的低濃度的需氧菌和厭氧菌、死菌和活菌檢測出來，增加血液制品的安全系數(shù)。

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[4] 高峰.必須重視血液細(xì)菌污染的預(yù)防和控制[J].中國輸血雜志.2004,17(4):221-222.

[5] 洪纓,孫啟鳳.血小板輸血中細(xì)菌污染及預(yù)防[J].中國輸血雜志. 2004,17(4):293-295.

[6] 劉仁強(qiáng),劉赴平,葉柱江,等.3073例輸注血小板細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果[J].中國熱帶醫(yī)學(xué),2006,6(5):868.

[7] 高均翠.全自動微生物檢測系統(tǒng)在單采血小板無菌試驗(yàn)中的應(yīng)用[J].中國輸血雜志,2011,24(2):147-148..

[8] 秦艷蘭,劉景春,劉赴平,等.全自動微生物培養(yǎng)系統(tǒng)在單采血小板細(xì)菌培養(yǎng)中假陽性結(jié)果的質(zhì)量控制[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào),2009,30(4S):246-248.

[9] 馬敏,劉曉穎,徐忠,等.應(yīng)用熒光定量PCR方法檢測血小板制品細(xì)菌污染[J].中國輸血雜志,2007,20(5):368-371.

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