摘要：采用氯仿為溶劑超聲輔助提取梭毒隱翅蟲(chóng)（Paederus fuscipes Curtis）的脂溶性成分， 并采用氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)其進(jìn)行了分析鑒定。結(jié)果共檢出92種脂溶性成分，并鑒定出其中的48種， 可鑒定成分相對(duì)百分含量之和達(dá)到83.41%，其中相對(duì)百分含量較高的有（Z）—13—二十二酰胺（12.79%）、二十四烷（9.13%）、二十八烷（8.76%）、油酸乙酯（8.06%）、（Z）—9—十八烯酰胺（5.57%）。

關(guān)鍵詞：梭毒隱翅蟲(chóng)（Paederus fuscipes Curtis）；脂溶性成分；氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用

中圖分類(lèi)號(hào)：O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439—8114（2012）19—4366—03

梭毒隱翅蟲(chóng)（Paederus fuscipes Curtis）隸屬于毒隱翅蟲(chóng)屬（Paederus），該屬已知種類(lèi)超過(guò)250種[1]， 產(chǎn)自世界各地，已報(bào)道的毒隱翅蟲(chóng)有21種[2]。毒隱翅蟲(chóng)體內(nèi)含有強(qiáng)烈接觸毒物，呈強(qiáng)酸性[3]，觸及皮膚可導(dǎo)致皮炎，出現(xiàn)癢紅腫痛、水皰，可阻止細(xì)胞有絲分裂，抑制鼠類(lèi)的癌腫瘤，已成為一種試驗(yàn)性抗菌素[4]。隱翅蟲(chóng)含毒素雖危害人體皮膚，但在醫(yī)學(xué)上又發(fā)現(xiàn)隱翅蟲(chóng)毒素可以毒攻毒，既能迅速破壞組織，又能迅速完整地使其復(fù)原，從而治療人體皮膚多種疾病。在《中藥大辭典》中藥名為花蟻蟲(chóng)，能解毒、殺蟲(chóng)、止癢、治神經(jīng)性皮炎、癬瘡。

毒隱翅蟲(chóng)的毒液化學(xué)成分復(fù)雜，除以上3種毒素外，還含有醛類(lèi)、醌類(lèi)、萜類(lèi)等物質(zhì)[4，5]。為了更好地了解貴州毒隱翅蟲(chóng)中毒液所含的化學(xué)成分，采用氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)貴州產(chǎn)的梭毒隱翅蟲(chóng)的脂溶性成分進(jìn)行了分離、鑒定并測(cè)定其相對(duì)含量，為貴州毒隱翅蟲(chóng)的利用和預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

梭毒隱翅蟲(chóng)（Paederus fuscipes Curtis）于2009年8月購(gòu)自貴州羅甸；氯仿為分析純。

1.2 儀器

KQ—500DE數(shù)控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；Agilent 6890—5973氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)Agilent公司）；AL204型電子天平（梅特勒—托利多公司）。

1.3 脂溶性成分提取

梭毒隱翅蟲(chóng)干燥后粉碎，過(guò)60目篩。取毒隱翅蟲(chóng)粉末約1 g置于250 mL具塞錐形瓶中，加入100 mL氯仿溶液，超聲輔助提取30 min，提取結(jié)束后靜置，用氯仿補(bǔ)足減失的重量，混勻。將氯仿提取物過(guò)濾，取濾液1 mL采用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾置于專(zhuān)用樣品瓶中，待GC/MS測(cè)定。另取濾液10 mL置于干凈的表面皿中，揮干氯仿至恒重，減除表面皿重量得氯仿提取物中脂溶性成分含量為0.6 mg/mL， 由此計(jì)算毒隱翅蟲(chóng)干燥蟲(chóng)體中脂溶性成分含量為60 mg/g。

1.4 GC—MS分析

色譜條件：HP—5MS（5%苯取代甲基硅酮）色譜柱（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）；程序升溫：初始柱溫為70 ℃，以8 ℃/min升至180 ℃，再以1 ℃/min升至200 ℃，以2 ℃/min升至250 ℃保持5 min；汽化室溫度260 ℃；載氣為高純He，流速1 mL/min；進(jìn)樣量1 μL；分流比20∶1。

質(zhì)譜條件：離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；電離方式為EI，電子能量70 eV；溶劑延遲4 min；質(zhì)量掃描范圍30～500 amu。

2 結(jié)果與分析

用峰面積歸一化法計(jì)算各組分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，對(duì)初始閾值≥13.60，初始峰寬≥0.08的化合物峰進(jìn)行積分并鑒定，用美國(guó)Wiley、NIST05兩種數(shù)據(jù)庫(kù)的質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算機(jī)檢索比對(duì)，并進(jìn)行人工圖譜解析得出化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果共有92個(gè)化合物得到積分，其中48個(gè)成分得到鑒定，其相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和占總數(shù)的83.41%，揮發(fā)油的總離子流圖見(jiàn)圖1，鑒定結(jié)果見(jiàn)表1。未鑒定成分中未見(jiàn)含量較高成分。

從圖1可以看出，梭毒隱翅蟲(chóng)脂溶性成分中含有大量的各式化合物，可檢出的成分達(dá)92個(gè)，在動(dòng)物體內(nèi)存在如此種類(lèi)眾多的脂溶性成分比較少見(jiàn)。從表1中可以看出，梭毒隱翅蟲(chóng)脂溶性成分中有48種化合物得以鑒定，其結(jié)構(gòu)大致可以分為4類(lèi)：①脂肪烴類(lèi)，包括烷、烯、炔，特別是直鏈烷烴較多，且成系列；②酰胺類(lèi)，含有多種脂肪酰胺類(lèi)化合物，說(shuō)明氮元素含量高；③酯；④醛與酮。這4類(lèi)占可鑒定成分中的絕大多數(shù)，脂肪烴類(lèi)物質(zhì)有13種，其中二十四烷含量高達(dá)9.13%；酰胺類(lèi)物質(zhì)有6種，包括含量最高的（Z）—13—二十二酰胺（12.79%）以及（Z）—9—十八烯酰胺（5.57%）；酯類(lèi)物質(zhì)8種；醛與酮10種。

酰胺類(lèi)化合物是具有多方面生物活性的一類(lèi)物質(zhì)，大量文獻(xiàn)表明脂肪酰胺具有中樞抑制作用，脂肪酰胺類(lèi)物質(zhì)作為內(nèi)源性生物活性脂質(zhì)參與生物體的多種功能的調(diào)節(jié)[6—9]。此外，脂肪酰胺不僅保持了原有胺類(lèi)或生物胺的活性，而且減少了其作用位點(diǎn)，提高了藥物的安全性，由此表明脂肪酰胺類(lèi)化合物作為藥物開(kāi)發(fā)具有美好的前景。毒隱翅蟲(chóng)中含有大量的脂肪酰胺類(lèi)化合物，為將毒隱翅蟲(chóng)開(kāi)發(fā)成藥物提供了一定參考。同時(shí)，從毒隱翅蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)斑蝥素（Cantharidin），斑蝥素是一類(lèi)具有強(qiáng)烈抗癌效果的物質(zhì)，主要來(lái)源于芫青科昆蟲(chóng)，毒隱翅蟲(chóng)中含有斑蝥素也為毒隱翅蟲(chóng)具有一定的抗癌效果提供了理論支持。

3 小結(jié)與討論

通過(guò)對(duì)梭毒隱翅蟲(chóng)脂溶性有效成分的分析鑒定及含量測(cè)定，對(duì)綜合開(kāi)發(fā)利用該藥用資源提供了科學(xué)的依據(jù)。GC—MS聯(lián)用技術(shù)廣泛用于動(dòng)、植物揮發(fā)油、精油及低極性化合物的分析，用該方法分析梭毒隱翅蟲(chóng)的脂溶性成分，非常全面地獲得了相關(guān)信息，是分析梭毒隱翅蟲(chóng)的脂溶性成分的有效手段。

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