[摘要] 目的 探討T細胞亞群檢測對傳染性單核細胞增多癥(IM)的臨床意義。 方法 采用流式細胞術檢測IM患兒急性期、恢復期(更昔洛韋治療后2周)、隨訪期(治療后4周)以及正常對照組外周血淋巴細胞亞群,并對結果進行比較。 結果 IM患兒急性期以及恢復期較對照組外周血中CD4+T細胞百分比、CD4+/CD8+比值均明顯下降(P < 0.05),CD8+T細胞百分比則明顯升高(P < 0.05)?;謴推冢ǜ袈屙f治療后2周)CD4+T細胞百分比、CD4+/CD8+比值較治療前升高(P < 0.05),而CD8+T細胞百分比則較治療前降低(P < 0.05),差異均有統(tǒng)計學意義。隨訪組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P > 0.05)。 結論 外周血T細胞亞群的檢測對評估IM患兒的細胞免疫功能狀況、輔助診斷和指導治療具有臨床意義。
[關鍵詞] EB病毒;傳染性單核細胞增多癥;T淋巴細胞亞群;免疫功能
[中圖分類號] R725.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701(2012)30-0066-02
Clinical significance of T lymphocytes in infectious mononucleosis
CAI Haifang1 LAN Juhong1 LIU Sheng1 CHEN Jun2 XUE Xiangyang2
1.Department of Pediatrics, Lishui Central Hospital, Lishui 323000; 2.Department of Immunology and Microbiology, Wenzhou Medical College, Wenzhou 325035, China
[Abstract] Objective To study the clinical significance of T lymphocytes in children with infectious mononucleosis (IM). Methods Used flow cytometric analysis to detect IM peripheral blood lymphocyte subtype of 42 patients and 39 cases in normal control group,and then compared with each other. Results Compared with control group, CD8+ T cells increased significantly (P < 0.05), CD4+ cells reduced significantly, and CD4+/CD8+ cells ratio decreased obviously in acute stage and convalescence stage group (P < 0.05). Compared with acute stage group, CD8+ T cells decreased significantly (P < 0.05), CD4+ T cells and CD4+/CD8+ cells ratio increased obviously (P < 0.05) in convalescence stage group. The results of follow-up and control group had no obvious differences (P > 0.05). Conclusion The variation of T lymphocytes can bring obvious clinical significance to IM patients for evaluation of cellular immune function condition,auxiliary diagnosis and guide therapy.
[Key words] Epstein-Barr virus; Infectious mononucleosis; T lymphocytes subtypes; Immune function
傳染性單核細胞增多癥(IM)是一種由EBV感染所致的急性感染性疾病,其主要臨床表現(xiàn)為不規(guī)則發(fā)熱、淋巴結炎、咽峽炎并且伴有肝脾腫大及血液中大量異常淋巴細胞的出現(xiàn)等,以兒童較常見[1]。臨床研究表明,IM患者外周血中淋巴細胞亞群在感染EBV后通常會發(fā)生異常[2],從而導致細胞及體液免疫功能缺陷、低丙種球蛋白血癥等免疫功能的變化。為了解IM患者T淋巴細胞亞群的變化情況,我們采用流式細胞術(FCM)檢測IM患兒及正常對照者外周血T淋巴細胞亞群,并對結果進行分析,現(xiàn)報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
42例患兒均為我院兒科2009年6月~2011年6月住院治療病例,以《實用兒科學》為診斷標準[3]。其中男24例,女18例,年齡3~12歲,平均7.8歲,采用更昔洛韋(50 mg/支,國藥準字H20057692,海悅藥業(yè))治療;正常對照組39例,來自本院保健科健康體檢兒童,在性別、年齡上與患兒組差異無統(tǒng)計學意義,其中男18例,女21例,平均8.2歲。上述兒童家屬均知情同意。
1.2 試劑與儀器
所用儀器為美國BD公司FACSCalibur流式細胞分析儀,所用試劑由美國BD公司提供,包括CD8-PE/CD4-FITC等單克隆抗體。
1.3 檢測方法
抽取患兒及正常對照者空腹靜脈血1 mL,采用EDTA抗凝,取流式細胞儀專用試管,加入抗凝血50 μL,再分別加相應單抗20 μL,放置室溫避光孵育15~20 min,加溶血素500 μL,避光放置10 min后,2 h內(nèi)上機檢測。
1.4 統(tǒng)計學方法
采用SPSS 18.0,實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(x±s)表示,應用單因素方差分析,P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結果
CD4+T細胞百分比、CD4+/CD8+比值在急性期、恢復期較對照組明顯降低,而CD8+T細胞百分比則明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P < 0.05)。隨訪期與對照組間差異無統(tǒng)計學意義(P > 0.05)。見表1。
3 討論
IM是由EBV感染所致的疾病,該病毒具有潛伏感染的特點,而B淋巴細胞是其感染后的靶細胞及潛伏的部位。當病毒在B淋巴細胞中增殖時,B細胞表面可表達EBVCA等多種抗原,經(jīng)抗原提呈細胞提呈作用后可以激活CD8+T淋巴細胞,引發(fā)細胞毒效應,從而殺傷被感染的B淋巴細胞。血中大量的異型淋巴細胞就是這種具有殺傷能力的細胞[6],所以患者外周血中CD8+T淋巴細胞往往會升高。同時研究表明CD4+T細胞可以抑制受EBV感染B細胞增殖,而在這個過程中CD4+T細胞會被大量消耗,導致患者外周血中CD4+T細胞的絕對數(shù)量明顯降低,CD4+/CD8+比值倒置[7]。
表達CD4分子的T細胞主要是輔助性T細胞(Th),它可以通過釋放細胞因子輔助B細胞及細胞毒T細胞的活化,增強機體的免疫功能;而表達CD8分子的T細胞是細胞毒T細胞(Tc)和抑制T細胞(Ts),其中Ts通過釋放抑制因子抑制B細胞及效應T細胞活化[4],從而降低機體的免疫功能,所以機體免疫功能并不取決于淋巴細胞的多少,而是決定于CD4+/CD8+[5]。有研究報道,部分IM患兒恢復期CD4+和CD8+T細胞并未恢復正常,其比值仍處于倒置,機體處于免疫紊亂狀態(tài)[2]。而EBV的潛伏感染特點,使其在免疫功能低下時具有轉化為惡性腫瘤細胞的可能性[8]。故EBV感染所致細胞免疫功能持續(xù)紊亂,是IM繼發(fā)腫瘤的高危因素[9,10]。
本研究檢測了IM患兒治療前后外周血CD4+、CD8+T細胞百分比,并與正常對照組進行比較,結果表明IM患兒急性期(治療前)CD4+T細胞百分比和CD4+/CD8+比值明顯降低,CD8+T細胞百分比明顯升高,提示存在明顯免疫紊亂。臨床工作中除積極抗病毒治療外,可加用免疫調(diào)節(jié)藥物,促進疾病恢復。實驗結果還表明外周血中CD4+T細胞百分比、CD4+/CD8+比值在使用抗病毒藥物更昔洛韋后明顯升高,CD8+T細胞百分比則顯著降低,且患兒臨床癥狀也明顯緩解;4周后各項指標與正常對照組之間已經(jīng)無明顯差異,提示使用更昔洛韋的治療可能有較為顯著的療效。但是,由于IM是自限性的疾病,此次實驗沒有設立未使用抗病毒藥物治療的對照組進行對照研究,所以更昔洛韋的療效還有待進一步實驗研究。
總之,IM患者外周血中T細胞亞群在不同的時期有較明顯變化,檢測T細胞亞群可用來評估患兒的免疫功能狀況、判斷病情的嚴重程度等。同時由于T淋巴細胞亞群的變化,會導致機體免疫功能低下等情況,可能引起EBV感染繼發(fā)的腫瘤,所以治療時除抗病毒外還應糾正免疫功能紊亂,促進機體的免疫功能恢復。
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(收稿日期:2012-04-01)