邢文娟

（天津市寶坻區(qū)寶坻中醫(yī)醫(yī)院，天津 301800）

生化分析儀不同標本用量與精密度的關系

邢文娟

（天津市寶坻區(qū)寶坻中醫(yī)醫(yī)院，天津 301800）

目的 評價生化分析儀不同標本用量與精密度的關系。方法隨機收集7份不同乳酸脫氫酶（LDH）濃度新鮮血清標本，用日立7600－020全自動生化分析儀，對標本分別按常規(guī)測定參數(shù)和相應參數(shù)按比例增加后兩種方式進行LDH測定，每次每個標本重復測定20次，計算出均值（X）、標準差（S）和變異系數(shù)（CV%）。結果各標本LDH測定均值在參數(shù)調(diào)整后均比調(diào)整前略有升高;CV%值在參數(shù)調(diào)整后均比調(diào)整前減低。結論適當按比例加大標本和試劑用量，可減低測量不精密度。

生化分析儀;參數(shù);乳酸脫氫酶;變異系數(shù)

在實際工作中，發(fā)現(xiàn)自動生化分析儀上測量不精密度常因為所取標本量偏小而較大的現(xiàn)象。為探討標本用量對測定結果精密度的影響，我們以乳酸脫氫酶（LDH）為例，按比例適當加大標本和試劑用量，測試其參數(shù)調(diào)整前后的酶活性濃度，揭示標本量大小與精密度的關系，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗儀器:日立（Hitachi）7600－020全自動生化分析儀。上海復星長征公司生產(chǎn)試劑，批號:D100533。質(zhì)控物質(zhì):Beckman公司，質(zhì)控血清批號:M603192（低值）、M603193 （高值）。

1.1.2 實驗樣本:隨機收集7份不同LDH濃度的本院門診及住院病人新鮮血清標本（其濃度范圍盡可能覆蓋該項目的可報告范圍）。

1.2 方法

按照操作規(guī)程，實驗前對儀器進行常規(guī)維護與保養(yǎng)，并按常規(guī)方法對儀器用c.f.a.s進行校準，然后測定質(zhì)控物，室內(nèi)質(zhì)控結果在控時才進行樣本測定。

1.2.1 將LDH測定參數(shù)設為:樣本量4 uL，試劑Ⅰ160 uL，試劑Ⅱ40uL。以此參數(shù)對每份標本重復測定20次，計算出均值（X）、標準差（S）和變異系數(shù)（CV%）。

1.2.2 將LDH測定參數(shù)調(diào)整為:樣本量6 uL，試劑Ⅰ240 uL，試劑Ⅱ60uL。以此新參數(shù)對每份標本重復測定20次，計算出均值（X）、標準差（S）和變異系數(shù)（CV%）。

為了減少測量不精密度對結果的影響，參數(shù)調(diào)整前后的兩次測定均在一個批次實驗中完成。

2 結果

所有檢測數(shù)據(jù)均未出現(xiàn)離群點。參數(shù)調(diào)整前后的實驗結果見表1，從表中可以發(fā)現(xiàn)，參數(shù)調(diào)整后的測定基本上不影響原有的測定結果，但各樣本的CV%值均比調(diào)整前明顯降低。

表1 測定參數(shù)調(diào)整前后LDH測定結果（X，CV%）

3 討論

精密度是表示測定結果中隨機誤差大小程度的指標，也是指同一樣本在一定條件下多次重復測定得到的一系列單次測定值之間的接近程度。精密度評價實驗是評價獨立實驗室內(nèi)的單個儀器所用的方法以及儀器精度的實驗。全自動生化分析儀雖然穩(wěn)定性好，但在測量過程中也難免受各種因素的干擾，王時南發(fā)現(xiàn)，在生化分析儀上用終點發(fā)測定時，適當縮小R/S，在一定程度上可提高測定結果的精密度［1］。我們在工作中發(fā)現(xiàn)，有些測定項目由于標本用量少而影響精密度的問題，針對此問題設計了本實驗，探討適當修改儀器參數(shù)（標本量和試劑量）能否改進測量的精密度。

自動生物化學分析儀的參數(shù)就是儀器工作的指令，操作者通過設置正確的參數(shù)控制儀器完成一系列復雜而有序的操作程序。指揮儀器工作的參數(shù)很多，有些參數(shù)是在生產(chǎn)制造中設置好的，如機械操作、計算機軟件等，只需選擇就可進行工作。操作者需進行的參數(shù)設置是指進行某個測試項目時的具體操作指令，主要包括樣品量、試劑量、測定方法、校正方法、反應時間、測定波長和控制因素等。樣品與試劑量的確定一般按照試劑說明書上的比例，并結合儀器的特性進行設置［2］。只有參數(shù)設置合理，結果才能真實可靠［3］。本實驗在原有測定參數(shù)的基礎上，根據(jù)儀器的特性，在保證稀釋倍數(shù)不變的情況下，在樣品和試劑的最小加樣量范圍內(nèi)適當按比例增加樣本量和試劑量，結果證明，按照調(diào)整后的參數(shù)測定基本上不影響原有的測定結果，而各樣本CV%值均有不同程度減低，說明適當增加樣本量可改進測定的精密度，減少實驗誤差。

因為同一試驗應用不同廠家的試劑，如果不分別作最佳條件測試，其結果會差異很大。對同一患者來說，不同廠家的試劑使用同一參數(shù)，甚至同一廠家不同批號試劑對酶等實驗都可能得到明顯差異的結果［4］。因此在本實驗中，我們注意到此問題，應用的是同一廠家同一批號的試劑，這樣就避免了批間誤差，減少了其他因素對本實驗的干擾，從而保證了測定結果的準確性。

從本實驗可以看出，在稀釋倍數(shù)不變的基礎上，適當增加標本和試劑用量，可有效改進測定的精密度。

［1］王時南.4種分析參數(shù)測定血清總蛋白精密度的評價［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2007，16（1）:100－101.

［2］周新，涂植光.臨床生物化學和生物化學檢驗［M］.3版.人民衛(wèi)生出版社.2004:510.

［3］石寅皓.全自動生化分析儀限額參數(shù)的設置［J］.臨床檢驗雜志，1998，16（2）:95.

［4］朱勇.七種酶的不同批號試劑對血清標本測定結果的比較［J］.陜西醫(yī)學檢驗雜志，1998，13（3）:5.

R392－33

B學科分類代碼31099

1001－8131（2012）04－0287－01

2012－03－27