樊勝彬 馮利彬 梁華玲 趙俊紅 蓋麗

·藥物研究與分析·

石家莊周邊縣市克雷伯菌屬產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率及耐藥性分析

樊勝彬 馮利彬 梁華玲 趙俊紅 蓋麗

克雷伯菌屬;超廣譜β-內(nèi)酰胺酶;耐藥性

克雷伯菌屬是醫(yī)院內(nèi)感染和社區(qū)感染的重要病原菌。近年來，克雷伯菌屬檢出率在腸桿菌科位列第二［1－4］，對多種抗生素的耐藥性也逐步上升，其中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的產(chǎn)生是其耐藥機制之一。ESBLs陽性細菌可以水解滅活第三代頭孢菌素和單環(huán)酰胺類抗生素，給臨床抗感染治療帶來很大挑戰(zhàn)。為了了解本地區(qū)克雷伯菌屬的耐藥情況，筆者聯(lián)合石家莊市周邊8縣市二甲醫(yī)院對臨床標(biāo)本中分離鑒定的912株克雷伯菌屬進行ESBL檢測，同時對常用22種抗生素進行藥敏試驗，了解耐藥模式，為臨床醫(yī)生初始用藥提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 912株克雷伯菌屬來自2010年6月至2011

年6月石家莊市周邊8縣市二甲醫(yī)院的臨床標(biāo)本，剔除同一患者的重復(fù)菌株，鑒定方法按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版進行，藥敏采用紙片擴散法，結(jié)果判定根據(jù)NCCLS判斷標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)控菌株大腸埃希氏菌 ATCC25922;肺炎克雷伯氏菌ATCC700603均購自衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.2 抗菌藥物敏感試驗

1.2.1 藥敏紙片:ESBLs檢測所用的頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸、頭孢他啶/克拉維酸藥物紙片為英國OXOID公司產(chǎn)品，其他藥物紙片和MH培養(yǎng)基為杭州天和微生物試劑有限公司產(chǎn)品。

1.2.2 ESBLs表型確證實驗:根據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)推薦的雙紙片法方法進行。ESBLs用頭孢他啶(每片30 μg)和頭孢他啶加克拉維酸(30 μg和10 μg);頭孢噻肟(每片30 μg)和頭孢噻肟加克拉維酸(30 μg和10 μg)分別測量2種紙片單獨及加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑。加克拉維酸和不加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑≥5 mm可確認為ESBLs陽性菌株。以質(zhì)控菌株肺炎克雷伯菌(ATCC700603)為ESBLs陽性對照。

2 結(jié)果

2.1 912株克雷伯菌屬中共確證411株ESBLs陽性菌，陽性率45.1%。

2.2 501株ESBLs陰性菌和411株ESBLs陽性菌的藥物敏感性試驗 (1)ESBLs陽性雷伯菌屬存在嚴(yán)重的多重耐藥和交叉耐藥現(xiàn)象。對三代頭孢和復(fù)方新諾明耐藥率超過70%，對環(huán)丙沙星、左氧氟沙星和慶大霉毒耐藥率超過60%。碳青霉烯類藥物耐藥率最低可作為治療ESBLs陽性雷伯菌屬中、重度感染的首選。(2)β-內(nèi)酰胺類/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)方藥物中頭孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的較為敏感，可作為臨床醫(yī)生對急診感染患者的初始用藥。(3)阿米卡星、頭孢吡肟、頭孢他啶、米諾環(huán)素對ESBLs陰性雷伯菌屬耐藥率低于10%，可用于該菌的抗感染治療。(4)阿米卡星、頭孢西丁、阿莫西林/克拉維酸可用于敏感的ESBLs陽性雷伯菌屬一般治療。見表1。

3 討論

近年來，克雷伯菌屬多重耐藥菌株越來越常見，已成為醫(yī)院感染的主要病原菌［5］。本研究結(jié)果顯示石家莊地區(qū)產(chǎn)ESBLs克雷伯菌屬從28.6%上升至45.1%。高于全國衛(wèi)生部細菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)(Mohnarin)報道的［2］，2006至2007年36.9%; 2008年40.6%;2009年37.8%;2010年30.1%～32%，但低于時東彥等［6］2008年報道本地三甲醫(yī)院的54.2%，說明本地區(qū)克雷伯菌屬ESBLs產(chǎn)酶率上升迅速，并高于華北地區(qū)的平均水平，同時三甲醫(yī)院的產(chǎn)酶率高于二甲醫(yī)院。很大程度上與本地區(qū)、本級別醫(yī)院抗感染藥物的應(yīng)用差異有關(guān)。

碳青霉烯類抗生素作為治療ESBLs陽性菌的最有效藥物，其耐藥菌株的出現(xiàn)可能與細菌同時具有其他酶類有關(guān)，因為克雷伯菌屬的耐藥性變異總和最近幾年超級細菌的產(chǎn)生有關(guān)，所以克雷伯菌屬的這種耐藥給臨床帶來了巨大壓力，應(yīng)引起足夠重視。

由于超廣譜β-內(nèi)酰胺酶可以由質(zhì)粒介導(dǎo)在細菌間轉(zhuǎn)移形成耐藥的擴散，這可造成院內(nèi)交叉感染和耐藥菌擴散，醫(yī)院應(yīng)采取綜合性管理措施，制定有效的應(yīng)對策略，從而控制和降低細菌的多重耐藥性、預(yù)防ESBLs陽性菌細菌的產(chǎn)生和傳播。

1 曹春紅，趙建宏，靳同林，等.石家莊地區(qū)超光譜β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)酶菌及其藥敏情況.藥物流行病學(xué)雜志，2002，11:11-12.

2 張秀珍，胡云建，艾小曼，等.Mohnarin 2006-2007年度報告:華北地區(qū)細菌耐藥監(jiān)測.中國抗生素雜志，2008，33:616-621.

3 艾效曼，張秀珍.Mohnarin 2008年度報告:華北地區(qū)細菌耐藥監(jiān)測.中國抗生素雜志，2010，35:490-496.

4 艾效曼，陶鳳蓉，許洪濤，等.Mohnarin 2009年度報告:華北地區(qū)細菌耐藥監(jiān)測.中國臨床藥理學(xué)雜志，2011，27:524-532.

5 張偉麗，孔海深，楊青，等.Mohnarin 2010年度報告:華北地區(qū)細菌耐藥監(jiān)測.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21:4909-4914.

6 時東彥，趙建宏.2008年河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院臨床分離菌分布及耐藥譜型監(jiān)測.中國感染與化療雜志，2011，11:57-60.

R 446.51

A

1002－7386(2012)17－2686－02

10.3969/j.issn.1002－7386.2012.17.078

052160 河北省藁城市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院檢驗科(樊勝彬);河北省藁城市人民醫(yī)院檢驗科(馮利彬);河北省井陘縣人民醫(yī)院檢驗科(梁華玲);河北省新樂市人民醫(yī)院檢驗科(趙俊紅);河北省行唐縣人民醫(yī)院檢驗科(蓋麗)

表1 912株克雷伯菌屬對22種抗菌藥耐藥情況

抗生素紙片 含量(μg/片) 501株ESBLs陰性菌耐藥株/耐藥率(%) 411株ESBLs陽性菌耐藥株/耐藥率(%)氨芐西林10 311/62.1 411/100哌拉西林 100 158/31.5 382/92.9頭孢唑林 30 172/34.3 366/97.1頭孢呋辛 30 111/22.2 369/89.8頭孢曲松 30 75/15 347/84.4頭孢噻肟 30 67/13.4 327/80頭孢他啶 30 46/9.2 295/71.8頭孢吡肟 30 35/7.0 135/32.6頭孢西丁 30 52/10.4 104/25.3氨曲南 35 60/12.0 305/74.2環(huán)丙沙星 5 72/14.4 253/61.6左氧氟沙星 5 71/14.2 261/63.5慶大霉素 10 115/23.0 281/68.4阿米卡星 30 43/8.6 99/24.1呋喃妥因 300 67/13.4 234/56.9米諾環(huán)素 30 48/9.6 163/39.7阿莫西林/克拉維酸 20/10 56/11.2 108/26.3頭孢哌酮/舒巴坦 75/75 0/0 52/12.7哌拉西林/他唑巴坦 100/10 22/4.4 63/15.3復(fù)方新諾明 23.75/1.25 107/21.4 317/77.1亞胺培南 10 4/0.8 10/2.4美羅培南10 4/0.8 9/2.2

2012－06－01)