劉士君 李建華

1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院病理科，遼寧沈陽 110003；2.中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科暨中國醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理教研室，遼寧沈陽 110001

結(jié)腸癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，20世紀(jì)90年代以來，發(fā)病率呈明顯上升趨勢[1-2]。影響結(jié)腸癌預(yù)后的因素很多，血管生成在腫瘤生長、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。本研究采用免疫組織化學(xué)SP法，檢測85例結(jié)腸癌標(biāo)本中堿性成纖維細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）和血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表達(dá)情況，以探討bFGF和VEGF表達(dá)的相關(guān)性及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般材料

收集遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院2007年10月～2011年10月間85例外科手術(shù)切除結(jié)腸癌標(biāo)本，所有患者術(shù)前均未接受放療或化療，所有研究對象均按HE病理切片診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為結(jié)腸癌，年齡32～81歲，平均51.6歲，其中，男59例，女26例；伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移52例，不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33例；組織學(xué)分型：高分化32例，中分化15例，低分化38例；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期40例，Ⅲ～Ⅳ期45例。

1.2 方法

標(biāo)本經(jīng)4%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，分別進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)SP法染色，兔抗人的bFGF和VEGF抗體購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司，并設(shè)立陽性和空白對照。

1.3 結(jié)果判定

bFGF和VEGF表達(dá)均定位于細(xì)胞漿，胞漿染有明顯的棕黃色為陽性，胞漿無著色為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Spearman檢驗(yàn)進(jìn)行兩變量間的相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 bFGF和VEGF在結(jié)腸癌的表達(dá)情況

bFGF和VEGF在男性結(jié)腸癌的表達(dá)陽性率分別為64.4%、62.7%，女性結(jié)腸癌的陽性表達(dá)率分別為69.2%、65.4%，包漿均有明顯的棕黃色染色（圖1、2），不同性別間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。bFGF和VEGF在高、中、低分化結(jié)腸癌的陽性表達(dá)率依次為59.3%和56.2%、66.7%和60.0%、71.1%和71.0%，各組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。bFGF和VEGF在TNMⅠ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期陽性表達(dá)率分別為37.5%、50.0%和91.1%、75.6%，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

圖1 低分化結(jié)腸癌標(biāo)本中bFGF的陽性表達(dá)（×200）

圖2 中分化結(jié)腸癌標(biāo)本中VEGF的陽性表達(dá)（×400）

表1 bFGF和VEGF在85例結(jié)腸癌標(biāo)本的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系[n（%）]

2.2 bFGF和VEGF表達(dá)的相關(guān)性

bFGF和VEGF表達(dá)的相關(guān)性見表2。用Spearman檢驗(yàn)進(jìn)行兩變量間的相關(guān)性分析表明，bFGF和VEGF結(jié)腸癌的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.268，P<0.05）。

表2 bFGF和VEGF的表達(dá)情況（例）

3 討論

惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制涉及腫瘤細(xì)胞遺傳物質(zhì)、表面結(jié)構(gòu)、侵襲力、黏附力、血管新生、淋巴管新生等諸多因素[3]。目前許多研究資料發(fā)現(xiàn)，新生血管的形成在腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，惡性腫瘤細(xì)胞憑借豐富的新生血管網(wǎng)獲取無限生長所需要的營養(yǎng)和氧氣，因此，腫瘤的血管生成以及以血管為靶向的藥物研究成為腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一[4]。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)越來越多的因子與腫瘤血管生成有關(guān)[5]。

bFGF是廣泛存在于體內(nèi)多種組織的一類多肽生長因子，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、血管形成、創(chuàng)傷修復(fù)過程中起重要調(diào)節(jié)作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)，bFGF在肝癌、肺癌、膠質(zhì)瘤、黑色素瘤中都有較高表達(dá)[6]。本實(shí)驗(yàn)研究表明，bFGF在大腸癌中有異常表達(dá)，與性別、組織分化程度無關(guān)，與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)。

VEGF屬于血小板源生長因子超家族，為分子量46 000的高度糖基化堿性蛋白，可通過蛋白激酶C（PKC）或ras信號傳導(dǎo)通路激活絲裂原活化蛋白激酶（MAKP）系統(tǒng)，刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并產(chǎn)生纖維蛋白溶解酶原激活劑和膠原酶等[7]，增加微血管通透性[8]，促進(jìn)血漿纖維蛋白滲出，為血管中多種細(xì)胞的遷徙提供纖維網(wǎng)絡(luò)，從而促進(jìn)血管形成和腫瘤細(xì)胞脫落進(jìn)入血管或向鄰近纖維結(jié)締組織擴(kuò)散。VEGF在正常情況下表達(dá)水平較低，在一些病理情況下出現(xiàn)過表達(dá)。本研究表明，VEGF在大腸癌中的異常表達(dá)與性別、組織分化程度無關(guān)，與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，bFGF和VEGF在結(jié)腸癌的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.268，P<0.05），二者共同參與了結(jié)腸癌浸潤和轉(zhuǎn)移的過程，相互的協(xié)同作用可以使結(jié)腸癌更具侵襲性。因此，聯(lián)合檢測bFGF和VEGF在大腸癌中的表達(dá)，可以作為評估結(jié)腸癌預(yù)后的客觀指標(biāo)，對指導(dǎo)臨床診斷和治療具有一定的意義，可能作為腫瘤靶向治療的新靶點(diǎn)，通過某種技術(shù)抑制bFGF和VEGF高表達(dá)，可實(shí)現(xiàn)緩解病情甚至治療結(jié)腸癌的目的，減少復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。

[1]李穎超，張觀宇，許立莉.CD105和VEGF在大腸癌中的表達(dá)及意義[J].中國誤診學(xué)雜志，2010，10（36）：8878.

[2]張娟，魏君，王士杰，等.Twist和E-cadherin在大腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].中國腫瘤臨床，2011，38（3）：143-147.

[3]謝明，楊翅，梁紅，等.大腸癌中pAkt、VEGF和MVD的檢測及其臨床意義[J].診斷病理學(xué)雜志，2009，16（5）：337-339.

[4]蔣金玲，劉衛(wèi)仁，于穎彥，等.腫瘤學(xué)管形成的模型建立與顯微圖像定量分析研究[J].中華病理學(xué)雜志，2011，40（7）：475-479.

[5]于建憲，崔琳，張七一，等.組織芯片檢測大腸癌中NOS、HIF-1α的及與血管生成的關(guān)系[J].診斷病理學(xué)雜志，2007，14（1）：44-49.

[6]Okada-Ban M，Thiery JP，Jouanneau J.Fibroblast growth factor-2[J].Int J Biochem，2000，32（3）：263-267.

[7]胡艷萍，呂彧，崔莉，等.血管內(nèi)皮生長因子及其受體在胃腸間質(zhì)瘤中的表達(dá)[J].診斷病理學(xué)雜志，2007，14（5）：381-382.

[8]鄭剛，劉建生，智仁厚.結(jié)締組織生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、缺氧誘導(dǎo)因子-1α在胰腺癌中的表達(dá)及臨床意義[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，8（13）：31-33.