李燦宇 申愛榮 張自森 吳 敏

1)鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450052 2)鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院腫瘤科 鄭州 450052

檢測血清可溶性E－鈣粘連蛋白在卵巢癌手術(shù)前后的表達(dá)及其意義

李燦宇1)申愛榮1)張自森2)吳 敏2)

1)鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450052 2)鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院腫瘤科 鄭州 450052

目的 檢測卵巢癌患者手術(shù)治療前后血清可溶性E－鈣粘連蛋白(E－cad)的表達(dá)，探討其臨床意義。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法檢測32例卵巢癌患者手術(shù)前后及30例健康人血清E－cad的水平。分析卵巢癌術(shù)前血清E－cad的水平與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 卵巢癌患者術(shù)前血清E－cad水平顯著高于健康人，手術(shù)1周后血清E－cad水平較術(shù)前顯著下降。術(shù)前血清E－cad水平與卵巢癌臨床分期顯著相關(guān)，與病理類型、病理分級(jí)、腹水、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無顯著相關(guān)。結(jié)論 卵巢癌術(shù)前血清E－cad水平與臨床分期有關(guān)，可作為一種卵巢癌預(yù)后預(yù)測因子。

血清;可溶性E－鈣粘連蛋白;卵巢癌;手術(shù)

上皮型鈣粘連蛋白(E－鈣粘連蛋白，E－cadherin)是上皮細(xì)胞中重要的細(xì)胞黏附與信號(hào)傳導(dǎo)分子，參與了多種腫瘤的發(fā)生。E－鈣粘連蛋白的表達(dá)與卵巢癌的浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。血清可溶性E－鈣粘連蛋白(soluble E－cadherin，sEC)高表達(dá)與多種惡性腫瘤預(yù)后相關(guān)。本研究檢測了32例卵巢癌患者手術(shù)前后血清sEC水平，旨在探討血清sEC在卵巢癌手術(shù)前后的表達(dá)變化及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2008－01—2011－06經(jīng)手術(shù)治療的32例卵巢癌患者，均經(jīng)病理確診。年齡34～72歲，中位年齡52歲;收集健康女性體檢者30例作為對(duì)照，年齡24～62歲，中位年齡50歲。健康體檢者血細(xì)胞計(jì)數(shù)、血脂、肝腎功能均正常范圍。

32例卵巢癌患者，采用國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)2000年分期標(biāo)準(zhǔn):I期7例，Ⅱ期6例，Ⅲ期16例，Ⅳ期3例;病理分級(jí):高分化8例，中分化10例，低分化14例;病理類型:漿液性囊腺癌24例，黏液性囊腺癌8例;有腹水12例，無腹水20例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移10例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移22例。所有研究對(duì)象均為初治病例，術(shù)前均未接受過任何藥物治療或放療。

1.2 血清樣本收集與處理患者手術(shù)前與手術(shù)后第7～10天的外周血采集后立即放入4℃冰箱靜置20 min。4℃4 000 r/min離心15 min分離血清。將血清轉(zhuǎn)移到新的離心管中，放入－80℃冰箱保存。檢測前取出血清樣品，冰上融化后，4℃ 12 000 r/min離心10 min，除去血清中的不溶物。

1.3 血清sEC的檢測sEC的血清水平采用ELISA方法檢測。ELISA定量試劑盒購自美國R＆D公司，操作步驟按照其操作手冊(cè)進(jìn)行［1］。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 17.0軟件包分析，手術(shù)前后sEC蛋白表達(dá)水平差異比較采用樣本均數(shù)t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清sEC在術(shù)前卵巢癌及健康人中的表達(dá)比較ELISA檢測32例卵巢癌患者術(shù)前血清sEC的平均濃度為2 445 ng/ mL，30例健康人血清sEC的平均濃度為2 066 ng/mL，顯著低于卵巢癌患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 健康人及卵巢癌患者術(shù)前血清sEC的表達(dá)水平 (ng/mL)

2.2 血清sEC在卵巢癌患者手術(shù)前后的表達(dá)變化檢測卵巢癌患者手術(shù)后7～10 d血清sEC表達(dá)水平，平均濃度為2 013ng/ mL，較術(shù)前水平明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表2 血清sEC在卵巢癌患者手術(shù)前后的表達(dá) (ng/mL)

2.3 卵巢癌患者術(shù)前血清sEC水平與臨床病理特征的關(guān)系比較分析不同臨床病理特征的卵巢癌患者術(shù)前血清sEC水平，結(jié)果顯示其表達(dá)與卵巢癌臨床分期顯著相關(guān)，分期較晚患者的血清sEC濃度較早期患者明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而在不同病理類型、病理分級(jí)間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。腹水、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對(duì)sEC的血清濃度無顯著性影響，見表3。

表3 血清sEC水平與臨床病理特征的關(guān)系 (ng/mL)

3 討論

E型鈣依賴粘連蛋白是維持上皮細(xì)胞的極性及細(xì)胞間連接的糖蛋白，在腫瘤的早期發(fā)生、浸潤和轉(zhuǎn)移中均起著重要作用［2～5］，很多研究也表明 E－cadherin參與了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展，促進(jìn)了轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。E型鈣依賴黏附蛋白在近跨膜區(qū)域有一酶切位點(diǎn)，可經(jīng)胰酶作用形成一分子量約80 kD的可溶性片段。該片段被認(rèn)為是完整E型鈣依賴黏附蛋白分子的降解形式，能在健康人的體液中檢測到，多在腫瘤患者中表現(xiàn)為高水平。與組織中完整E型鈣依賴黏附蛋白不同，血清中sEC高表達(dá)則和卵巢癌侵襲和轉(zhuǎn)移性顯著相關(guān)，治療前sEC的血清濃度是卵巢癌的獨(dú)立預(yù)后因素，并能早期預(yù)測卵巢癌術(shù)后復(fù)發(fā)［6］。

樊冬梅等［7］研究發(fā)現(xiàn)，E－cadherin在卵巢癌組的表達(dá)陽性率顯著低于良性腫瘤和正常卵巢組織。E－cadherin在卵巢癌原發(fā)灶的表達(dá)分別和卵巢癌的分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，在卵巢癌原發(fā)灶的表達(dá)均低于轉(zhuǎn)移灶。與組織中E－cadherin的表達(dá)缺失相反，本研究中血清sEC在卵巢癌中的表達(dá)則顯著升高。與組織中E－cadherin表達(dá)不同的是，血清sEC的表達(dá)變化在出現(xiàn)腹水或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)并不顯著，與卵巢癌的分化也無相關(guān)，其原因可能與研究群體不同或sEC生成、分布的調(diào)節(jié)機(jī)制有關(guān)?，F(xiàn)有研究表明E－cadherin表達(dá)變化可能與以下機(jī)制有關(guān)，如E－cadherin基因突變、基因啟動(dòng)子的甲基化、基因啟動(dòng)子上單個(gè)核苷酸的多態(tài)性以及腫瘤部位的蛋白酶活性升高等［8－9］。

血清sEC的表達(dá)濃度與卵巢癌的FIGO分期呈正相關(guān)，高分期的卵巢癌患者血清sEC的表達(dá)濃度顯著升高。胡燕等［10］的研究發(fā)現(xiàn)，卵巢上皮性癌復(fù)發(fā)及未控患者術(shù)前血清sEC水平明顯高于無復(fù)發(fā)，這可能提示，術(shù)前sEC的顯著升高可能是卵巢癌的預(yù)后不良的獨(dú)立預(yù)測因子。本研究結(jié)果表明卵巢癌術(shù)前血清sEC水平與卵巢癌臨床分期密切相關(guān)，可作為一種卵巢癌預(yù)后預(yù)測因子。值得進(jìn)一步大樣本臨床研究。

［1］張自森，吳敏，巴楠，等.晚期胃癌血清可溶性E－鈣粘連蛋白的表達(dá)及其意義［J］.臨床腫瘤學(xué)雜志，2011，16(9):820－822.

［2］邢蘭瑛，韓志紅，劉敏，等.S100A4和E－cadherin在上皮性卵巢腫瘤中的表達(dá)及意義［J］.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，29 (10):948－951.

［3］Shim，HS，Yoon，BS，Cho，NH et al.Prognostic significance of paired epithelial cell adhesion molecule and E－cadherin in ovarian serous carcinoma［J］.Human Pathology，2009，40(5): 693－698.

［4］Faleiro Rodrigues C，Macedo Pinto I，Pereira D，et al.Prognostic value of E－cadherin immunoexpression in patients with primary ovarian carcinomas［J］.Annals of oncology，2004，15 (10):1 535－1 542.

［5］姜琳，胡軍.E－cadherin－catenins粘附復(fù)合體與卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后之間關(guān)系的研究進(jìn)展［J］.大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，33(1):78－81.

［6］董艷，郭敏，王茁，等.卵巢癌患者手術(shù)治療前后血清E－cad，SICAM－I，L－Selectin和VEGF檢測的臨床意義［J］.放射免疫學(xué)雜志，2008，21(3):268－270.

［8］樊冬梅，史惠蓉，陳志敏，等.TGF－β1和E－cadherin在卵巢癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶組織中的表達(dá)與意義［J］.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30(6):1 355－1 358.

［8］Yuecheng Y，Hongmei L，Xiaoyan X，et al.Clinical evaluation of E－cadherin expression and its regulation mechanism in epithelial ovarian cancer［J］.Clin Exp Metastasis，2006，23(1): 65－74.

［9］Lee JO，Kwun HJ，Jung JK，et al.Hepatitis B virus X protein represses E－cadherin expression via activation 0f DNA methyltransferase1［J］.Oncogene，2005，24(44):6 617－6 625.

［10］胡燕，朱燕英，張文輝，等.卵巢上皮性腫瘤患者術(shù)前檢測血清sE－CAD的臨床意義及其與CA125的相關(guān)性研究－附77例報(bào)告［J］.新醫(yī)學(xué)，2010，41(2):101－103.

Expression and its clinical significance of serum soluble E－cadherin before and after operation in ovarian cancer
patients

LI Canyu，Shen Airong，Zhang Zisen，Wu Min.The Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450052，China

ObjectiveTo detect expression of serum soluble E－cadherin(sEC)before and after operation in ovarian cancer patients，and to dicuss its clinical significance.MethodsThe levels of sEC in 32 ovarian cancer patients were tested by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)before and after operation as well as in 30 healthy controls.Its correlation with clinical and pathological factors was analyzed.ResultsThe levels of sEC in ovarian cancer patients before operation were significantly higher than in controls，which declined significantly one week after operation.The of sEC levels before operation showed significant correlation with clinical stages，which showed no significant correlation with factors such as pathological type，pathological grade，ascites and lymph node metastasis.Conclusion The levels of sEC in ovarian cancer patients before operation is closely related with clinical stages，which may be a predictive factor for prognosis of ovarian cancer.

Serum;Soluble E－cadherin;Ovarian cancer

R737.31

A

1007－8991(2012)05－0006－02

(收稿 2012－03－30)