張騫

潰瘍性結(jié)腸炎是臨床上的一種常見病癥，往往伴隨有腹痛、便秘，粘連血便等，在病理機(jī)理上屬于非特異性的，痢疾中也可能發(fā)生，在治療的過程中容易反復(fù)發(fā)作，本次研究針對(duì)這一病癥從中藥白術(shù)黃芩湯及有效部位組方中提取藥液進(jìn)行試驗(yàn)，觀察其對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的使用效果，試驗(yàn)對(duì)象為小鼠，通過建模、灌模的方式進(jìn)行觀察，研究其臨床應(yīng)用效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究選取SPE級(jí)NIH雄性小鼠，小鼠在4～5周左右的生長(zhǎng)時(shí)間，屬于人工飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)小鼠。

1.2 器材和材料 藥物材料:研究中使用的白術(shù)、黃芩選自中藥藥店，白術(shù)黃芩湯按照1∶8的比例對(duì)比蒸餾水進(jìn)行配置，組方與白術(shù)黃芩配伍甘草，白術(shù)黃芩配比甘草為10∶7∶3的比例進(jìn)行，通過水煎法進(jìn)行蒸煮，之后冷卻沉淀4 h左右，使用紗布進(jìn)行3次過濾，最后按1∶6及1∶4的比例完成實(shí)驗(yàn)用藥的濃度比例調(diào)配。實(shí)驗(yàn)過程中的三硝基苯磺酸(TNBS)，十六烷基三甲基溴化胺和鄰聯(lián)二茴香胺選自Sigma公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，本次研究中所用的藥物經(jīng)過實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，證實(shí)其藥用效果符合臨床需要，為合格產(chǎn)品。

器材:研究過程中使用到的儀器器材主要有紫外可見光分光光度計(jì)、D型水浴鍋、電子分析天平、電熱恒溫真空干燥箱。

1.3 方法 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的過程中需要首先制作小鼠模型，其次就是藥物的配伍，使用的藥物主要為蒸餾水、柏樹黃芩湯、有效組方等，其中有效組房為3次提取之后的結(jié)晶物。在實(shí)驗(yàn)的過程中主要有3個(gè)方面的內(nèi)容，第一步為實(shí)驗(yàn)所需的小鼠建模，抽取40只小鼠，將40只小鼠分為4組，每組10只:正常組、模型組、白術(shù)黃芩湯組、有效成分組。在配伍的過程中，正常組的小鼠為正常健康小鼠，其數(shù)據(jù)指標(biāo)可以作為正常參考，而其他3小的小鼠通過動(dòng)物造模的方法使其形成潰瘍性結(jié)腸炎。小鼠禁食24 h之后使用1%戊巴比妥鈉(45 mg/kg)進(jìn)行腹腔注射麻醉，正常組和模型組的小鼠在實(shí)驗(yàn)的過程中為其注入蒸餾水;白術(shù)黃芪組的小鼠灌入實(shí)驗(yàn)中制作的水煎劑藥液，通過灌腸的方法將藥液灌入小鼠的胃部;有效成分組的小鼠在實(shí)驗(yàn)的過程中灌入其提取物0.4/kg，通過肝門插入，灌入小鼠的腸胃道，灌入次數(shù)為1次/d，7 d為1個(gè)觀察療程。

2.1 檢測(cè) 本次研究中，對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究標(biāo)準(zhǔn)主要依據(jù)MPO活性檢測(cè)，在個(gè)小組小鼠灌藥完成后，抽取100 mg小鼠的結(jié)腸組織，在切碎之后置入2 ml十六烷基三甲基溴化胺(HTAB)緩沖液中，用力搖勻之后，凍溶3次，4000 r/min離心15 min，取上清液0.1 ml，加入50 mmol/L的PBS2.9 ml中于460 nm處測(cè)吸光率A值，3 min后再次測(cè)定，取其兩次差值。差值等比3之后為其MPO活性值。

3 結(jié)果

在實(shí)驗(yàn)完成之后，4組小鼠的活性差別較大，其中正常組和模型組的小鼠在治療之后的活性升高，特別是模型組小鼠的MOP活性升高顯著，P＜0.01，而白術(shù)黃芩組和有效成分小組的小鼠在實(shí)驗(yàn)完成后的MOP活性明顯降低，從臨床應(yīng)用的效果來看，使用白術(shù)黃芩組和有效成分組的藥物效果明顯，特別是有效成分組的小鼠的藥物實(shí)驗(yàn)結(jié)果最為明顯，具體的實(shí)驗(yàn)研究中的結(jié)果對(duì)比比較見表1。

表1 4組小鼠見的MOP活性對(duì)比結(jié)果(±s)

表1 4組小鼠見的MOP活性對(duì)比結(jié)果(±s)

注:＊＊與正常組相比，模型組MOP活性明顯升高，P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，##與模型組相比，MOP活性明顯降低，P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

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4 討論

潰瘍性結(jié)腸炎在臨床上治療的主要目的就是使其MOP活性降低，進(jìn)而達(dá)到患者的藥物效果，恢復(fù)正常指數(shù)，在臨床當(dāng)中，這種病癥的藥物治療非常困難，主要有兩個(gè)方面的因素，一個(gè)是其MOP活性降低，另一個(gè)就是病癥的反復(fù)發(fā)作［1］。針對(duì)這一病癥，重要柏樹黃芩湯從起藥物機(jī)理來看具有泄瀉、通便、治療脾虛的效果，從中醫(yī)角度來看，這種病癥也就是結(jié)腸受阻，患者的脾胃受傷，導(dǎo)致其谷反而滯，白術(shù)黃芩可以進(jìn)行治療［2］。

從實(shí)驗(yàn)當(dāng)中我們可以看出，對(duì)比正常組和建模組、白術(shù)黃芩湯、有效成分組的效果不一，建模組小鼠的MOP活性增長(zhǎng)速度較快，超過了正常標(biāo)準(zhǔn)的4倍左右，在臨床效果上來看是沒有任何作用的，而其他兩種方法當(dāng)中，對(duì)小鼠的病癥都起到了一定的作用，有效成分組的小鼠在治療1周之后，其MOP活性已經(jīng)恢復(fù)到與正常標(biāo)準(zhǔn)相差不大的指標(biāo)［3］。

從臨床應(yīng)用效果看，白術(shù)黃芩湯及有效部位組方都可以治療患者的病癥［4］，實(shí)驗(yàn)研究也表明這種藥物治療的效果還是非常顯著的，在臨床上可以進(jìn)行研究推廣，配伍適合患者使用的比例和藥物，達(dá)到治療的目的。

［1］李茹柳.白術(shù)黃芪湯及其單藥提取成分組方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用 .2007，21(3):223-228.

［2］孫洪鳳.中藥氧灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2010，1(625):146-147.

［3］陳江.潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)病機(jī)演變特點(diǎn)探析.遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，7(3):197.

［4］石忠峰.白術(shù)黃芪湯及其有效成分組方對(duì)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的療效觀察.中藥新藥與臨床藥理，2007，18(2):87-89.