白吉明， 李建華， 錢(qián) 浩， 劉 雷， 趙志國(guó)

(河北省承德市中心醫(yī)院腫瘤科， 河北 承德 067000)

原發(fā)性肝癌(primary hepatic cancer PHC)是一種惡性程度高、預(yù)后差的惡性腫瘤［1］。本課題針對(duì)血清標(biāo)志物AFP、AFU、GPC3單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行研究，旨在為PHC的早期診斷找出更好的血清指標(biāo)。

1 資料和方法

1.1 資料:所有資料均來(lái)自承德市中心醫(yī)院2009年8月至2011年7月住院患者。其中經(jīng)手術(shù)或病理診斷為原發(fā)性肝癌患者55例，年齡30－81歲。肝硬化患者30例，年齡25－71歲。兩組間年齡、性別等一般資料，經(jīng)檢驗(yàn)均具有可比性。

1.2 方 法

1.2.1 檢測(cè):空腹采集外周血2mL，分離血清，－20℃保存。上機(jī)，待檢測(cè)，操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明。

1.2.2 Cut－off值確定:AFP≥400μg/L 為陽(yáng)性［2］。應(yīng)用SPSS17.0繪制受試者工作曲線，以曲線下面積最大確定AFP、GPC3最佳臨界值，AFU≥80U/L為陽(yáng)性;GPC3≥300ng/L為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以±s表示，均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料及率的比較采用X2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 PHC組血清指標(biāo) AFP、AFU、GPC3與肝硬化組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 兩組血清AFP、AFU、GPC3水平檢測(cè)結(jié)果

2.2 各標(biāo)志物陽(yáng)性率:以曲線下面積最大確定GPC3、AFU截值，GPC3的ROC曲線最大面積:0.755，95%可信區(qū)間:0.578－0.786;AFU的ROC曲線下最大面積:0.717，95%可信區(qū)間:0.614－0.820。GPC3≥300 ng/L為陽(yáng)性(見(jiàn)圖2)，AFU≥80U/L為陽(yáng)性(見(jiàn)圖1)。

圖1

圖2

2.3 血清AFP、GPC3、AFU檢測(cè)結(jié)果:GPC3敏感度最高，AFP次之，AFU最低;特異度:AFP最高，AFU最低;準(zhǔn)確度:GPC3最高，AFU最低。敏感度及準(zhǔn)確度GPC3最高，特異度AFP雖高于GPC3，但兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，故若單獨(dú)診斷GPC3效果最好，見(jiàn)表2。

2.4 各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè):AFP聯(lián)合GPC3敏感度最高，AFP聯(lián)合 CA19－9敏感度最低，特異度 AFP聯(lián)合GPC3高于其他各項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)，雖低于AFP的特異度，但二者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)敏感度可達(dá)78.1%，但特異度僅為66.7%，準(zhǔn)確度雖有所升高，但特異度下降明顯;與AFP聯(lián)合GPC3比較，其敏感度及特異性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表2。綜合分析:AFP聯(lián)合GPC3對(duì)于原發(fā)性肝癌的診斷效果優(yōu)于其他各項(xiàng)單獨(dú)或者聯(lián)合檢測(cè)，可應(yīng)用于臨床檢測(cè)，值得推廣。

表2 肝癌組AFP、AFU、GPC3單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)PHC結(jié)果

3 討論

原發(fā)性肝癌是一種惡性程度高，預(yù)后差的惡心腫瘤，是我國(guó)常見(jiàn)的肝臟腫瘤，早期診斷可明顯提高其遠(yuǎn)期生存率［3］。甲胎蛋白是人胎兒血清中發(fā)現(xiàn)的一種專(zhuān)一性的甲種球蛋白。每個(gè)分子里含有兩條復(fù)合糖鏈，不同的組織合成的AFP糖鏈各不相同，其部分蛋白具有癌胚性，長(zhǎng)期以來(lái)，AFP作為肝癌診斷的最佳標(biāo)志物，對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷和治療起了重要的作用，但仍存在假陽(yáng)性和假陰性。研究顯示:AFP以25μg/L為陽(yáng)性界值，診斷 PHC的敏感度為75%－90%不等［4］。但是仍有10%－20%的PHC患者血清AFP偏低或是陰性，不容易被發(fā)現(xiàn)。而在另外一些良性肝病患者中，血清AFP反而增高，故不能僅憑AFP值的高低來(lái)確定肝臟腫瘤的良惡性，本研究顯示:AFP大于400μg/L時(shí)，診斷特異度達(dá)100%，但敏感度僅為29.1%，與國(guó)內(nèi)研究基本符合，這大大限制了原發(fā)性肝癌的檢出率，因此需要我們?nèi)ふ腋唷⒏玫闹笜?biāo)為臨床工作服務(wù)。

AFU是一種溶酶體酸性水解酶，廣泛存在于肝、腦、胰、腎纖維細(xì)胞等溶酶體內(nèi)，以肝、腎等組織中活性最高。當(dāng)肝細(xì)胞癌變時(shí)，酶合成增加并釋放入血，使血清中AFU升高。發(fā)生肝癌時(shí)，AFU活性增高的機(jī)制尚不清楚，可能與肝癌細(xì)胞的酶蛋白合成增加及降解減慢有關(guān)［5］?；蚺c腫瘤細(xì)胞壞死、破裂、酶釋放過(guò)多有關(guān)。本組資料顯示，肝癌患者血清中的AFU水平顯著高于肝硬化組 (P＜0.001)，且對(duì)于 AFP陰性的 PHC有較高的診斷率，可彌補(bǔ)部分患者AFP低濃度或不表達(dá)的缺陷，降低漏診率，故AFU可作為診斷肝癌的敏感指標(biāo)之一。

GPC3是一種硫酸肝素類(lèi)蛋白多糖，是一種癌胚蛋白，通過(guò)磷脂酰糖基錨定于細(xì)胞膜表面，屬于分泌蛋白，其在細(xì)胞增殖與分化的發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。通過(guò)結(jié)合胞外基質(zhì)，生長(zhǎng)因子和蛋白酶等對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)分化，以及腫瘤形成和轉(zhuǎn)移起重要作用。在人體內(nèi)的分布有明顯的組織特異性，研究顯示其血清濃度與AFP的濃度及腫瘤大小無(wú)相關(guān)性，在AFP陰性的PHC的診斷中有重要作用。本研究顯示其與AFP聯(lián)合檢測(cè)可顯著提高診斷的敏感度及準(zhǔn)確度，故可將其與AFP聯(lián)合檢測(cè)應(yīng)用于PHC的診斷。

［1］湯釗猷.現(xiàn)代腫瘤學(xué)［M］.第2版.上海:復(fù)旦大學(xué)出版社，2009.553.

［2］Stefaniuk P，Cianciara J，Wiercinska－Drapalo A.Present and future possibilities for early diagnosis of hepatocellular carcinoma［J］.World Gastroenterol，2010，16:418－424.

［3］Gupta S，Bent S，Kohlwes J.Test characteristics of alphafetoprotein for detecting hepatocellular carcinoma in patients with hepatitis C.A systematic review and critical analysis［J］.Ann Intern Med ，2003，139:46－50.

［4］楊秉輝，夏景林.原發(fā)性肝癌的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)［J］.中華肝臟病雜志，2001，9(6):324.

［5］陳文彬，潘祥林.診斷學(xué).巖藻糖苷酶［M］.第6版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2004.405.