謝平 白央 尼瑪潘多 翟隨民

西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，西藏 拉薩 850000

藏藥材山礬葉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

謝平 白央 尼瑪潘多 翟隨民

西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，西藏 拉薩 850000

目的:對(duì)具有清熱，消炎。用于肺熱病，腎熱癥，瘟熱癥，傳染性熱病，擴(kuò)散傷熱病，腰肌勞損，口腔炎的藏藥材山礬葉進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。方法:采用基源考證、藥材顯微鑒別和薄層色譜鑒別方法。結(jié)果:山礬葉完整葉片呈橢圓形或倒卯狀橢圓，長(zhǎng)4～10cm，寬2～5cm，先端急尖或漸尖，基部楔形或?qū)捫ㄐ?，葉緣有細(xì)銳鋸齒，中脈上面凹下，下面凸起，幼時(shí)葉兩面均被柔毛，老葉光滑，或僅下面中脈兩側(cè)有柔毛，葉柄長(zhǎng)1～2㎝，幼時(shí)被柔毛。兩側(cè)向內(nèi)稍卷曲;中脈明顯，向背凸起，側(cè)脈對(duì)稱，細(xì)弱，邊緣有細(xì)銳齒。建立山礬葉薄層色譜鑒別方法。結(jié)論:所確定的鑒別方法可作為山礬葉的鑒別依據(jù)。

山礬葉;歷史考證;顯微鑒別;薄層鑒別

山礬葉(藏語(yǔ)名稱:徐砍)為山礬科植物白檀Sympiocos paniculata(Thunb．)Miq．、蕓香科植物喬木茵芋Skimmia arborescens Anders．a(chǎn)p．Gamble或黑果菌芋Skimmia melanoearpa Rehd．et Wils．的干燥葉及葉帶嫩枝。夏季采集，晾干。該藥材是藏藥制劑中常用藥材，具有清熱、消炎的效果。山礬科植物白檀為落葉灌木或小喬木;嫩枝有灰白色柔毛，老枝無(wú)毛。葉膜質(zhì)或薄紙質(zhì)，闊倒卵形、橢圓狀倒卵形或卵形，長(zhǎng)3～11厘米，寬2～4厘米，先端急尖或漸尖，基部闊楔形或近圓形，邊緣有細(xì)尖鋸齒，葉面無(wú)毛或有柔毛，葉背通常有柔毛或僅脈上有長(zhǎng)柔毛;中脈在葉面凹下，側(cè)脈每邊4～8條;葉柄長(zhǎng)3～5毫米。圓錐花序長(zhǎng)5－8厘米，被長(zhǎng)柔毛;花萼長(zhǎng)2～3毫米，萼筒褐色，無(wú)毛或有疏柔毛，裂片淡黃色，半圓形或闊卵形，稍長(zhǎng)于萼筒;花冠白色，長(zhǎng)4～5毫米，5深裂幾達(dá)基部;雄蕊10～60枚;子房2室，頂端的花盤5裂。核果熟時(shí)藍(lán)色，卵形或近球形，稍偏斜，長(zhǎng)5～8毫米，頂端宿萼裂片直立，花期4～6月;果期7～8月。產(chǎn)察隅、波密、林芝、錯(cuò)那、樟木、吉隆。生于山坡、河谷、路邊的灌木林或密林中，海拔760～2500米。分布于全國(guó)各地;朝鮮、日本、印度也有。蕓香科植物喬木茵芋為高8米，胸徑達(dá)20厘米。小枝髓部小但明顯，二年生枝的皮層頗薄，干后不皺縮。葉較薄。干后薄紙質(zhì)，橢圓形或長(zhǎng)圓形，或?yàn)榈孤褷顧E圓形，長(zhǎng)5～10厘米，寬2～6厘米，兩面無(wú)毛，中脈在葉面微凸起或中脈兩側(cè)的葉肉部分干后凹陷，側(cè)脈每邊7～10條，稀較少;葉柄長(zhǎng)1～2厘米。花序長(zhǎng)2～5厘米，花序軸被微柔毛或無(wú)毛;苞片闊卵形，長(zhǎng)1～1.5毫米;萼片比苞片稍大，邊緣均被毛;花瓣5片，倒卵形或卵狀長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)4～5毫米，水平展開或斜向上張開;雄花的雄蕊的比花瓣長(zhǎng)，花絲線狀，退化雌蕊長(zhǎng)3～4毫米，棒狀，頂部3～4深裂;雌花的不育雄蕊比花瓣短，子房近圓球形，花柱長(zhǎng)約I毫米，柱頭頭狀。果圓球形，徑6～8毫米，很少更大，藍(lán)黑色，通常有種子1～3粒?；ㄆ?～6月。果期7～9月。產(chǎn)于察隅。分布于廣東、廣西，貴州三省區(qū)的南部。生于海拔800米以上的山區(qū)。緬甸及印度東北部、錫金，不丹、尼泊爾也有分布。黑果菌芋與茵芋外表相似，但葉片一般較小，長(zhǎng)3～7厘米，寬1.5～2.5厘米，很少長(zhǎng)達(dá)ll厘米，頂部漸尖或短尖，葉面沿中脈密被短柔毛;葉柄長(zhǎng)5～10毫米?；ǖS白色，單性或有時(shí)兩性或雜性異株，花密集，組成長(zhǎng)很少達(dá)4厘米的圓錐花序，幾無(wú)柄?；ㄐ蜉S被微柔毛;苞片長(zhǎng)約1毫米;萼片闊卵形，長(zhǎng)1～1.5毫米，邊緣被毛;花瓣5片，各瓣略不等大，雄花的花瓣常反折，倒披針形或長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)3～4毫米;雄蕊與花瓣等長(zhǎng)或稍長(zhǎng)，兩性花的雄蕊比花瓣短，雌花的不育雄蕊比子房長(zhǎng);花柱圓柱狀，子房近圓球形;雄花的退化雌蕊短棒狀，長(zhǎng)不及2毫米。果藍(lán)黑色。近圓球形，徑約8毫米，通常5室，很少4室，有分核3～4個(gè)，果頂端中央有5或4個(gè)圓形、顏色灰白的小瘤狀疤痕(花柱脫落后的遺跡)?；?、果期同前。產(chǎn)于四川峨眉山以西(天全、瀘定、峨邊、石綿等地)、西藏(易貢等地)。生于高海拔山地密或疏林下。

目前，未見該藥材鑒別的相關(guān)報(bào)道。因此，通過(guò)研究建立該藥材的鑒別，可為藥材的開發(fā)利用和臨床應(yīng)用提供相關(guān)科學(xué)依據(jù)。

1 歷史考證

山礬葉始載于《四部醫(yī)典》?！鄂r明注釋》云:“徐砍分上下兩品:其葉肉厚而能作黃色染料者為上品;葉細(xì)而柔和，質(zhì)薄者為下品?！薄端{(lán)琉璃》云:“落葉灌木，葉青黃色而薄為上品;葉青褐色為下品?！薄陡事侗静菝麋R》云:“莖青褐色，大小約有桃樹之大，枝與分枝較多;葉黃綠色，葉片心形，先端漸尖，邊緣有細(xì)鋸齒，網(wǎng)狀葉脈，葉柄長(zhǎng)，互生;花白色，小，具五個(gè)花瓣，腋生;果實(shí)藍(lán)色，細(xì)長(zhǎng)，成熟時(shí)成綠黃色;花具芳香氣味?！睋?jù)考證藏醫(yī)用的徐砍原植物為山礬科的白檀葉，其樹葉為黃綠色，背面脈上被毛，葉薄，有不明顯的光澤，一般生于熱帶地區(qū)。

2 性狀

山礬葉多皺縮、破碎，草綠色至淡黃色。完整葉片呈橢圓形或倒卯狀橢圓，長(zhǎng)4～10cm，寬2～5cm，先端急尖或漸尖，基部楔形或?qū)捫ㄐ?，葉緣有細(xì)銳鋸齒，中脈上面凹下，下面凸起，幼時(shí)葉兩面均被柔毛，老葉光滑，或僅下面中脈兩側(cè)有柔毛，葉柄長(zhǎng)1～2㎝，幼時(shí)被柔毛。兩側(cè)向內(nèi)稍卷曲;中脈明顯，向背凸起，側(cè)脈對(duì)稱，細(xì)弱，邊緣有細(xì)銳齒。嫩枝表面黃綠色或灰黃色，有縱皺紋。質(zhì)硬而脆，折斷面黃白色。氣微，味微苦。

3 鑒別

3.1 材料與方法

3.1.1 試驗(yàn)材料

山礬葉藥材來(lái)源:西藏自治區(qū)藏藥廠、西藏自治區(qū)雄巴拉曲藏藥廠、西藏自治區(qū)藏醫(yī)學(xué)院藏藥廠、西藏自治區(qū)藏醫(yī)學(xué)院藏藥研究所。以上四個(gè)單位提供的山礬葉藥材，經(jīng)本所格桑索朗副主任藥師鑒定，均為正品。

3.1.2 儀器與主要試劑

3.1.2.1 儀器系統(tǒng)顯微鏡(型號(hào):BX51日本奧林巴斯);電子天平(型號(hào):AE200瑞士梅特勒);電熱恒溫干燥箱(型號(hào):GZX–DH.500–BS–Ⅱ上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠);三用紫外分析儀(型號(hào):ZF－2上海市安亭電子儀器廠);數(shù)控超聲波清洗器(型號(hào):KQ－500D昆山市超聲波儀器廠);純水、超純水系統(tǒng)(型號(hào):Milli－Q Direct－16法國(guó)密理博公司)。

3.1.2.2 主要試劑三氯甲烷(AR)、甲苯(AR)、丙酮(AR)、甲酸(AR)、乙酸乙酯(AR)、苯(AR)、硫酸(AR)、無(wú)水乙醇(AR)、環(huán)己烷(AR)、乙醇(AR)、香草醛等。試驗(yàn)用水均為純化水，符合《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》(GB/T6682－2008)及《中國(guó)藥典》2010年版二部純化水的要求。

3.2 表面觀上表皮細(xì)胞垂周壁平直。外面的平周壁稍呈角質(zhì)化;下表皮細(xì)胞形略大，垂周壁平滑，直或微彎曲。上、下表皮均有非腺毛著生，尤以主脈處為多;非腺毛為單細(xì)胞，圓錐形，頂部鈍圓，壁具疣狀突起，幼小者壁光滑，長(zhǎng)50～70㎝，基部寬20～40μm。氣孔多數(shù)呈平軸式，少數(shù)為不定式，下表皮較多。見圖1。

3.3 橫切面顯微鑒別上、下表皮細(xì)胞各1列，近長(zhǎng)方形，表皮外側(cè)的平周壁稍呈角質(zhì)化;葉肉組織為等面型，柵欄組織于中脈處中斷，上方的柵欄組織多為2列細(xì)胞，下方的多為1列細(xì)胞，且較短，內(nèi)含少數(shù)草酸鈣方晶。中脈下方突出，上、下表皮細(xì)胞內(nèi)側(cè)均有數(shù)列厚角細(xì)胞;維管束呈半月形，雙韌型。見圖2。

3.4 粉末顯微鑒別粉末為黃綠色;葉片橫斷面碎片，可見上、下表皮內(nèi)側(cè)的柵欄組織。表皮細(xì)胞碎片，單細(xì)腺毛及非腺毛脫落后的殘留基部，并可見非腺毛的頂面觀。葉片邊緣粬齒由多數(shù)角質(zhì)化的細(xì)胞組成。乳汁多數(shù)，分枝或不分枝有節(jié)，有淡黃色的內(nèi)含物。見圖3。

3.5 薄層色譜鑒別取山礬葉細(xì)粉1g，加乙醇10ml，超生處理30分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液;另取山礬葉對(duì)照藥材，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲苯－丙酮(4:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)處檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。見圖4。

4 小結(jié)

通過(guò)實(shí)驗(yàn)表明，山礬葉表面觀上表皮細(xì)胞垂周壁平直。外面的平周壁稍呈角質(zhì)化;下表皮細(xì)胞形略大，垂周壁平滑，直或微彎曲。上、下表皮均有非腺毛著生，尤以主脈處為多;橫切面顯微觀察上、下表皮細(xì)胞各1列，近長(zhǎng)方形，表皮外側(cè)的平周壁稍呈角質(zhì)化;葉肉組織為等面型，內(nèi)含少數(shù)草酸鈣方晶;粉末顯微鑒別為黃綠色，葉片橫斷面碎片，可見上、下表皮內(nèi)側(cè)的柵欄組織，表皮細(xì)胞碎片，單細(xì)腺毛及非腺毛脫落后的殘留基部，并可見非腺毛的頂面觀。葉片邊緣粬齒由多數(shù)角質(zhì)化的細(xì)胞組成。乳汁多數(shù)，有淡黃色的內(nèi)含物。薄層色譜斑點(diǎn)分離清晰，無(wú)拖尾現(xiàn)象，專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好。

5 討論

薄層色譜點(diǎn)樣量的選擇在試驗(yàn)過(guò)程中，分別選取1μl、2μl、5μl、10μl及20μl進(jìn)行點(diǎn)樣量選篩，試驗(yàn)表明，山礬葉藥材薄層點(diǎn)樣量為10μl時(shí)，能明顯檢出有效斑點(diǎn)。

薄層色譜展開劑的選擇試驗(yàn)過(guò)程中，分別以以三氯甲烷－甲苯－丙酮－甲酸(4:2:1:0.05)、三氯甲烷－乙酸乙酯－甲酸(3:4:2)、苯－乙酸乙酯(1∶1)、環(huán)己烷、二氯甲烷、環(huán)己烷－乙酸乙酯(9.5:0.5)、苯－乙酸乙酯(9.5:0.5)、甲苯－丙酮(9:1)等為展開劑，其中，三氯甲烷－甲苯－丙酮(4:2:1)為展開劑，展開效果最佳，紫外熒光燈(365nm)處檢視，靈敏度較好，展開得到的薄層色譜圖分離度較好，其Rf值分別為:0.29、0.43、0.54、0.61、0.66、0.96。

薄層色譜顯色劑的選擇試驗(yàn)過(guò)程中，以30%硫酸乙醇溶液為顯色劑，置105℃加熱至斑點(diǎn)清晰，靈敏度較好。

山礬葉主要化學(xué)成分為生物堿等［5］。本項(xiàng)研究建立的鑒別方法簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好，可用于山礬葉藥材的質(zhì)量控制，能夠?yàn)樵撍幉牡倪M(jìn)一步的開發(fā)利用和臨床應(yīng)用提供相關(guān)科學(xué)依據(jù)。

［1］ 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì)．中華本草(藏藥卷)［M］．上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002:12．

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)［M］．北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:1．

［3］ 青海省藥品檢驗(yàn)所、青海省藏醫(yī)藥研究所．中國(guó)藏藥(第二卷)［M］．上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1996:10．

［4］ 王寶琴．中成藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究［M］．中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，1994．

［5］ 王曙．常用藏藥理化鑒別與含量測(cè)定［M］．四川科學(xué)技術(shù)出版社，2002:06．

［6］ 宇妥·元丹貢布著．四部醫(yī)典［M］．陜西師范大學(xué)出版社．

［7］ 帝瑪爾·丹增彭措著．晶珠本草［M］．西藏藥王山藏文木刻版．

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1007－8517(2012)15－0009－02

2012.06.19)