周浩 成硯萍 崔艷 吳蓓靜 孫虔

(江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司 江蘇連云港 222006)

2008年2月21日EMEA/CHMP/SWP頒布了金屬殘留量限度的指導(dǎo)文件,并于2008年9月1日在歐盟實(shí)施,文件認(rèn)為,在原輔料合成中用到的金屬催化劑或金屬試劑可能在原料藥中殘留并帶入制劑中,這些殘留金屬通常無治療作用,基于安全性需要進(jìn)行嚴(yán)格控制。EMA把金屬催化劑按風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別分類管理[1],鈀作為第1類金屬1A亞組,有顯著安全擔(dān)憂,規(guī)定注射用原料藥中不得過1μg·g-1。本公司生產(chǎn)的法羅培南鈉在合成工藝中使用鈀/炭催化劑,如用ChP重金屬檢查法[2],測定的是總重金屬,無法單控鈀殘留量,需采用專屬性更強(qiáng)的原子吸收分光光度法[3]。為此,對鈀殘留測定方法進(jìn)行研究并制定標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)為其它種類原輔料中的鈀殘留測定提供技術(shù)參照。

1 儀器與試藥

島津AA-6800型原子吸收分光光度計(jì),ASC-6100型自動(dòng)進(jìn)樣器。

鈀標(biāo)準(zhǔn)液(上海市計(jì)量測試技術(shù)研究院,0.100g·L-1,批號(hào):1004)

法羅培南鈉原料藥(正大天晴,批號(hào)090701、090702、090703)

2 原子吸收分光光度法

2.1 光譜參數(shù)和原子化條件

鈀空心陰極燈,檢測波長:247.6nm;背景校正:D2燈;狹縫寬度:0.5nm;石墨爐原子化器;熱解石墨管;高純氬氣,采用石墨爐升溫程序。

2.2 專用溶劑

配制1%鹽酸并含0.2%EDTA的溶液,即得。

2.3 供試品溶液

取樣品50mg,精密稱定,置10mL量瓶中,溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得(含法羅培南鈉5mg·mL-1)。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)品溶液

精密量取鈀標(biāo)準(zhǔn)液(0.100g·L-1)1.0mL,置200mL量瓶中,稀釋至刻度,搖勻,作為對照品儲(chǔ)備溶液(500ng·mL-1)。

精密量取標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備溶液適量,再稀釋制成規(guī)定濃度的溶液,作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.5 專屬性

(1)選擇鈀空心陰極燈,檢測波長:247.6nm,本身就是鈀吸收的專屬特性。

(2)取過量樣品,用專用溶劑反復(fù)清洗烘干后制備陰性對照溶液,結(jié)果陰性對照溶液基本無吸收,表明法羅培南鈉本身無干擾。

表1 樣品測定結(jié)果

2.6 檢測限

取標(biāo)準(zhǔn)品溶液(10ng·mL-1),逐級(jí)稀釋,分別測定,當(dāng)吸光度為專用溶劑吸光度(0.0054)的2～3倍時(shí)的溶液濃度,作為鈀的檢測限,結(jié)果檢測限為1.25ng·mL-1。

2.7 線性關(guān)系

取鈀標(biāo)準(zhǔn)品溶液(濃度C分別為2、10、20、30、40、50ng·mL-1),分別測定吸光度(A),結(jié)果鈀進(jìn)樣濃度2～50ng·mL-1內(nèi)線性良好,線性方程A=0.0043C+0.0014r=0.9991。

2.8 系統(tǒng)精密度

取鈀標(biāo)準(zhǔn)品溶液(20ng·mL-1)連續(xù)測定6次,結(jié)果RSD=0.8%,表明本法系統(tǒng)精密度良好。

2.9 方法重復(fù)性

取樣品(批號(hào):090701),制備5份供試品溶液,分別測定,結(jié)果鈀平均殘留量0.56μg·g-1,RSD=1.2%,表明本法重復(fù)性良好。

2.10 回收率

分別精密稱取樣品(批號(hào):090701)6份各約25mg,分別加入標(biāo)準(zhǔn)品溶液(50ng·mL-1)0.25mL,置10mL量瓶中,溶解并稀釋至刻度,分別測定,結(jié)果平均回收率=100.7%(n=6),RSD=1.40%,明回收率良好。

2.11 樣品測定

對本公司生產(chǎn)的共3批樣品進(jìn)行了測定,同時(shí)參照ChP測定總重金屬,結(jié)果見表1。

3 討論

(1)目前ChP中還沒有鈀殘留的單獨(dú)控制方法,本法經(jīng)開發(fā),有利于提高藥品安全性,也可以為其它原料藥提供方法參照。

(2)注射用原料藥要求鈀殘留不得過1μg·g-1,總重金屬限度為10μg·g-1,僅僅測定總重金屬,不能保證樣品的安全性。

[1]EMEA/CHMP/SWP/4446/2000 (final).Guideline on the specification limits for residues of metal catalysts ormetal reagents.Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP)[J].London,2008.

[2]ChP(中國藥 典)(二部)[S].2010.Appendix(附錄)IV D:24.

[3]石克,謝靜,羅立駿,等.原子吸收分光光度法測定制何首烏中的鐵黑[J].藥物分析雜志,2011,31(3):583～585.