張務(wù)香 何仁亮

（1 安仁縣婦幼保健院，湖南 安仁423600；2 中山市黃圃人民醫(yī)院，廣東 中山 528429）

為探討解脲脲原體在健康已婚女性泌尿生殖道中的流行病學(xué)情況以及對(duì)不同藥物的敏感性，我們通過(guò)利用熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)以及支原體培養(yǎng)十藥敏試驗(yàn)對(duì)2589例健康已婚女性宮頸分泌物進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)將檢測(cè)的結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2009年5月至2010年5月常規(guī)婦科檢查的2589例健康已婚女性子宮頸管分泌物作為標(biāo)本，患者年齡18～65歲，平均年齡33.2歲。其中18～25歲422例，26～35歲571例，36～45歲1197例，其中絕經(jīng)19人，46～55歲321例其中絕經(jīng)37例，56～65歲217例，其中絕經(jīng)204例。

1.2 標(biāo)本采集和方法

用無(wú)菌生理鹽水脫脂棉拭子插入女性宮頸管內(nèi)2～4cm處旋轉(zhuǎn)l～2周，停留約l0s后置于無(wú)菌干試管中送檢。

1.3 標(biāo)本檢驗(yàn)及方法

對(duì)所取標(biāo)本先用熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）進(jìn)行Uu初篩，初篩結(jié)果陽(yáng)性者進(jìn)行Uu培養(yǎng)和藥敏實(shí)驗(yàn)。

1.3.1 熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）

儀器：美國(guó)PE7700自動(dòng)熒光PCR儀。試劑：HBV-FQ-PCR試劑盒由中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心生產(chǎn)；ELISA試劑盒由珠海麗珠集團(tuán)麗珠試劑廠生產(chǎn)。操作：將標(biāo)本洗滌液化12000r/min離心5min，去上清液，采用常規(guī)堿裂解法提取Uu-DNA，各反應(yīng)管放入PE7700自動(dòng)熒光儀，按下列條件擴(kuò)增73℃2min預(yù)變性，然后按下列條件擴(kuò)增:93℃45s～55℃120s，共做40個(gè)循環(huán)，反應(yīng)結(jié)束以后，電腦自動(dòng)計(jì)算出定量結(jié)果。

1.3.2 解脲脲原體培養(yǎng)和藥敏實(shí)驗(yàn)。

1.3.2.1 將所取標(biāo)本30min內(nèi)接種于選擇性培養(yǎng)基中。并將棉拭子插入2mL培養(yǎng)液中充分振洗并在瓶壁擠干拭子，取出棄之，混合均勻。在支原體培養(yǎng)試劑條的培養(yǎng)孔及藥敏孔中各加入上述溶液100μL，然后各孔再加入1滴無(wú)菌礦物油覆蓋，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.3.2.2 試劑

采用其昌達(dá)生物高科技（上海）有限公司出品的Uu和Mh培養(yǎng)鑒定、藥敏試劑盒，藥物種類(lèi)分別為強(qiáng)力霉素（Dox）、紅霉索（Ery）、羅紅霉素（Rox）、阿奇霉素（Azi）、交沙霉索（Jos）、克拉霉素（Cla）、甲砜霉素（Thi）、環(huán)丙沙星（Cip）、可樂(lè)必妥（Cra）、加替沙星（Cat）等十種。

1.4 結(jié)果判斷

培養(yǎng)24h后判讀Uu結(jié)果。以培養(yǎng)基變成酒紅色為陽(yáng)性，同時(shí)觀察藥敏孔的顏色，如變?yōu)榫萍t色為耐藥，變?yōu)榈t色為中度敏感，淡黃色（不變色）為敏感，分別計(jì)算不同藥敏種類(lèi)。

2 結(jié) 果

2589例健康已婚女性子宮頸管分泌物檢測(cè)標(biāo)本中，Uu陽(yáng)性例數(shù)為1530例，陽(yáng)性率為59.096%，Uu陽(yáng)性的年齡分布見(jiàn)表1；1530例Uu陽(yáng)性的藥敏結(jié)果。見(jiàn)表2。

表1 1530例Uu陽(yáng)性的年齡分布和絕經(jīng)情況

3 討 論

3.1 既往的研究認(rèn)為解脲支原體是引起一系列婦產(chǎn)科疾病的潛在致病因素[1]，在機(jī)體抵抗力低下或黏膜受損的情況下可成為致病菌，不僅可以引起非淋菌性宮頸炎，還與女性不孕癥、早產(chǎn)、自然流產(chǎn)等密切相關(guān)[2]。但是今年來(lái)解脲脲原體已趨向于被認(rèn)為不致病[3]。

3.2 本研究提示在不同的年齡階段，Uu感染的情況有所不同。在18～25歲年齡段，約為67.06%；在26～35歲年齡段，約為60.77%；在36～45歲年齡段，約為64.82%，其中絕經(jīng)者發(fā)生率5.26%（1/19）；在46～55歲年齡段，約占34.89%，其中絕經(jīng)者發(fā)生率8.1%（3/37）；56～65歲年齡段，約占8.29%，其中絕經(jīng)者感染率5.88%（12/204）。與劉朝暉等[4]的研究結(jié)果相似。

3.3 在檢出的Uu菌株的藥敏試驗(yàn)中，大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素阿奇霉素顯示出極強(qiáng)的抗菌活性，敏感率達(dá)91.9% 耐藥率只有1.7% ；四環(huán)素類(lèi)抗生素中，強(qiáng)力霉素敏感性高達(dá)94.2%，耐藥率也只有2.5%；這和徐明等[5]、吳翠云等[6]的報(bào)道相似。見(jiàn)表1。

綜上所述，在健康已婚女性的宮頸分泌物中可以正常存在Uu的感染，在18～45歲期間，Uu檢出的比率明顯高于46～65歲，但在絕經(jīng)后感染率明顯降低，具體的原因暫時(shí)不是很清楚，可能與性活躍期，雌激素水平較高，性生活頻率較多，而46歲以后，雌激素水平開(kāi)始下降、性生活頻率減少有一定的關(guān)系。所以，對(duì)于已婚女性宮頸分泌物檢出Uu并不一定意味致病性。張帝開(kāi)等[7]認(rèn)為隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷進(jìn)步，試劑盒越來(lái)越敏感，Uu的陽(yáng)性檢出率也隨之增高，結(jié)果的評(píng)價(jià)必須結(jié)合其他臨床資料，了解Uu正常攜帶狀態(tài)，有助于我們?cè)u(píng)價(jià)條件致病狀態(tài)時(shí)的作用。臨床中如果從宮頸分離出Uu，評(píng)價(jià)一定要慎重，對(duì)于Uu的進(jìn)一步定量和分型有助于判斷感染狀態(tài)和攜帶狀態(tài)。藥敏試驗(yàn)提示所檢出的Uu對(duì)強(qiáng)力霉素、阿奇霉素的敏感性較高。提示對(duì)于考慮因Uu感染所致婦科疾病，在選擇抗菌素時(shí)，可以根據(jù)具體的情況選擇強(qiáng)力霉素、阿奇霉素進(jìn)行治療。

表2 1530例Uu 對(duì)1O種抗菌藥物的敏感度類(lèi)

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