李曉霞 李亞蕊* 朱 鐳

（山西醫(yī)科大學(xué)，山西 太原 030001）

皮膚黏膜淋巴結(jié)綜合征（MCLS）于1967 年由日本川崎富首次報道[1]，又名川崎?。↘D），是一種以全身性非特異性小血管炎為主要病理改變的自身免疫性血管炎綜合征，其對心血管系統(tǒng)的損害最為嚴(yán)重，可形成冠狀動脈擴張和冠狀動脈瘤，部分病兒導(dǎo)致冠狀動脈局部出血、心肌梗塞甚至猝死，現(xiàn)已取代風(fēng)濕熱，成為兒童后d性心臟病中最常見的病因[2]，但病因及發(fā)病機制仍未揭示，目前認(rèn)為KD的發(fā)病機制為患者的急性免疫調(diào)節(jié)功能紊亂，認(rèn)為與T細(xì)胞的異常活化有關(guān)。白介素-21（IL-21）主要由活化的CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生[3,4]，可促進T、B淋巴細(xì)胞增殖。因此推測IL-21可能在KD的發(fā)病中起一定的作用。本研究通過檢測KD患者血清IL-21水平，探討與其他臨床指標(biāo)之間的關(guān)系，為了解KD的發(fā)病機制提供新的理論基礎(chǔ)，進一步了解KD的發(fā)病機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年9月至2011年6月入住山西省兒童醫(yī)院院的KD患兒70例，診斷均符合日本KD研究班推薦的KD診斷標(biāo)準(zhǔn)（2002年2月修訂，第5版）[5]。其中男39例，女31例，年齡6月～10歲（其中≤5歲為64例），急性期35例，分別于病程的第5～10d，采血前未使用任何影響免疫功能的藥物，行心臟彩超檢查，其中發(fā)生冠狀動脈擴張14例；亞急性期35例，分別于采集病程的第11～20d，均使用IVIG+阿司匹林治療，其中發(fā)生冠狀動脈擴張10例。標(biāo)本收集完后檢測IL-21的水平；對照組為在我院門診體檢的健康兒童20例，年齡6個月至6歲，其中男11例，女9例。各組在年齡、性別構(gòu)成上均無統(tǒng)計學(xué)差異。

1.2 檢測方法

采清晨空腹靜脈血4mL，3000r/min離心后取上清，置PC管中于-75℃保存，待全部收集完后同批檢測。血清IL-21水平測定采用雙抗體夾心ELISA法，試劑盒由蘇州市卡爾文公司（抗體購于美國R&D）提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明書的程序進行操作，檢測靈敏度可達16ng/L，酶標(biāo)（sunrise-basictecan）450nm處測OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線求得樣本IL-21含量。并收集檢測出標(biāo)本的ESR及IgA，心臟彩超等其他臨床資料。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 KD患者及正常對照組血清IL-21水平

KD急性期及亞急性期患者血IL-21水平均顯著高于正常對照組（P＜0.05）；急性期與亞急性期患者血清IL-21水平無明顯差異（P＞0.05），見表1。

表1 KD不同時期的各試驗指標(biāo)水平（±s）

表1 KD不同時期的各試驗指標(biāo)水平（±s）

group n il-21(ng/l)ESR(mm/h)IgA(mg/l)D(mm)normal 20 81.58±11.87 6.25±0.58 0.31±0.02 1.5±0.26 Acute KD 35 172.72±15.53 60.38±21.03 0.52±0.26 2.91±0.17 Subacute KD 35 170.64±16.23 39.26±19.39 0.83±0.18 2.76±0.05

2.2 KD不同階段冠狀動脈損傷組與冠狀動脈正常組IL-21水平比較

KD急性期冠狀動脈損傷組IL-21水平明顯高于冠狀動脈正常組（P＜0.05）；亞急性期冠狀動脈損傷組與冠狀動脈正常組無明顯差異（P＞0.05表2）。

表2 冠狀動脈損傷組與非損傷組不同階段的試驗指標(biāo)（±s）

表2 冠狀動脈損傷組與非損傷組不同階段的試驗指標(biāo)（±s）

acute KD subacute KD CAL NCAL CAL NCAL n 14 21 10 25 IL-21（ng/L）179.07±1.80 168.49±12.53 180.01±16.71 166.47±15.07 ESR（mm/h）76.42±19.30 54.86±19.69 50.49±10.37 32.83±9.35 IgA（mg/L）0.56±0.15 0.47±0.0.08 0.87±0.19 0.79±0.14 D（mm）3.02±0.37 2.72±1.05 2.81±0.81 2.59±0.64

2.3 KD患兒血清IL-21水平與ESR，IgA

冠狀動脈擴張程度相關(guān)性急性期KD患者IL-21水平明顯升高，且經(jīng)過Pearson相關(guān)系數(shù)分析發(fā)現(xiàn)與ESR，IgA，冠狀動脈直徑擴張度呈正相關(guān)（r=0.621，P＜0.05；r=0.502，P＜0.05；r=0.583，P＜0.05）。

3 討 論

KD是一種病因未明的急性發(fā)熱性疾病，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為本病與感染介導(dǎo)的免疫系統(tǒng)高度活化密切相關(guān)[6,7]，目前對細(xì)胞因子在KD發(fā)病中作用的研究甚多，普遍認(rèn)為KD急性期細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-1、-2、-6、-8，腫瘤壞死因子a等升高，有冠狀動脈損害時更為明顯，急性期后有所下降，本研究中我們發(fā)現(xiàn)KD患者血清IL-21水平顯著高于正常人水平，特別是急性期及冠狀動脈損傷組更為明顯，且與ESR，IgA，冠狀動脈擴張程度呈明顯正相關(guān)，推測在免疫紊亂的KD患者體內(nèi)，大量CD4+ T淋巴細(xì)胞浸潤血管內(nèi)皮，隨著IL-21水平的升高，致使B淋巴細(xì)胞反應(yīng)性增高，多克隆B淋巴細(xì)胞激活使體內(nèi)產(chǎn)生大量器官特異性及非特異性自身抗體更加劇了自身免疫反應(yīng)及心血管器官損傷[8]，故認(rèn)為參與了KD冠狀動脈損害的發(fā)生。

目前關(guān)于其發(fā)病機制的研究越來越集中在免疫介導(dǎo)的超抗原假說，大量臨床、流行病資料提示，KD可能是感染引起的急性自身免疫性血管炎綜合征[9,10]，實驗中發(fā)現(xiàn)IL-21水平明顯增高，激活CD4+T細(xì)胞，使T細(xì)胞亞群失衡，NK細(xì)胞功能異?；罨琓s功能減弱，cD4+百分率及cD4+／cD8+顯著升高，cD3+及cD8+百分率顯著下降，淋巴因子分泌增多，促進B細(xì)胞分泌多種Ig，引起免疫功能紊亂，且引起單核一巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞進一步增殖和活化，進而釋放多種細(xì)胞因子和炎性反應(yīng)介質(zhì)，如IL-2，IL-4，IL_8，IFN-γ，TNFa等，同時IL-21可以上調(diào)T-bet基因合成進而增強Th1細(xì)胞免疫反應(yīng)，B淋巴細(xì)胞被激活體內(nèi)產(chǎn)生以上各種自身抗體并與抗原結(jié)合沉積于腺體內(nèi)進一步激活淋巴細(xì)胞并浸潤腺體，使其功能受損，造成本病的發(fā)生和發(fā)展。本研究為我們今后對KD的診治提供了新的方向，通過調(diào)控IL-21的水平有望在緩解川崎病心血管損傷，特別是在急性期起到一定的作用。今后，如何在正常免疫系統(tǒng)中維持這種平衡將是一個很大的挑戰(zhàn)，如何在疾病最適當(dāng)?shù)臅r期將其用于治療也是個難題，有待于進一步研究。

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