王剛林，陳海燕

(重慶醫(yī)療器械質量檢驗中心·重慶市醫(yī)療器械質量與安全控制工程技術研究中心，重慶 401147)

體外診斷試劑(盒)的臨床應用越來越廣泛，所檢測出的結果已成為臨床醫(yī)生診斷疾病的輔助依據(jù)，有時甚至成為確診疾病的重要依據(jù)。目前，體外診斷試劑大多歸口于醫(yī)療器械管理，由于沒有統(tǒng)一的國家標準或行業(yè)標準，沒有統(tǒng)一的國家標準物質，質量監(jiān)督管理部門難以對其產(chǎn)品進行質量監(jiān)控。筆者從檢測原理角度分析認為，采用紫外分光光度法[1]測定的臨床生化類體外診斷試劑可以按產(chǎn)品執(zhí)行統(tǒng)一的質量標準。為了考察分析的正確性，筆者選取常用的總蛋白試劑盒進行驗證，報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

BASIC半自動生化分析儀(法國Secomam公司);KHB Biohit可調移液器(芬蘭百得實驗室儀器＜中國＞有限公司);HSG-ⅡC-4型恒溫水浴鍋(江蘇金壇中大儀器廠)?？偟鞍自噭┖?四川邁克科技有限責任公司，批號為1011071;中生北控生物科技股份有限公司，批號為110411;上海榮盛生物科技有限公司，批號為20110825;重慶百克生物科技有限公司，批號為20110601);70.0 g/L總蛋白標準液(四川邁克科技有限責任公司，批號為1011071;中生北控生物科技股份有限公司，批號為110411;上海榮盛生物科技有限公司，批號為20110825;重慶百克生物科技有限公司，批號為20110601);質控血清(中生北控生物科技股份有限公司，批號為022541)。

1.2 試驗方法

總蛋白試劑盒(雙縮脲法)由硫酸銅、碘化鉀、氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉4種成分組成，臨床主要用于測定人血清中總蛋白的濃度。在堿性溶液中，肽鍵與銅離子結合，生成藍紫色化合物，在540 nm波長處的吸光度與肽鍵的數(shù)量呈正比關系，可以據(jù)此計算蛋白質含量[2]。采用半自動生化分析儀，以質控血清(或血清)測定不同廠家生產(chǎn)的總蛋白試劑盒。

2 結果

2.1 質控血清測定

采用中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)的質控血清(質控血清總蛋白X±2 SD范圍為52.6～61.6 g/L)，分別取上述4個廠家生產(chǎn)的總蛋白試劑盒，按其相應的使用說明書進行試驗，平行測定5次，取平均值。由表1可見，4個廠家的產(chǎn)品測定均值均在質控血清值范圍內。

表1 驗證試驗結果

2.2 線性關系考察

取上述4個廠家的總蛋白試劑盒，分別用與試劑盒配套的標準品按其使用說明書進行試驗。取6支試管，其中1支為空白管，另5支為樣品管，按說明書要求分別加入不同量的總蛋白標準液、生理鹽水和雙縮脲試劑，混勻，置37℃反應10 min。在540 nm波長處以空白管調零，分別測定各管的吸光度，計算出相應的 r值。結果見表1。

2.3 精密度試驗

取4個廠家生產(chǎn)的總蛋白試劑盒，分別按其相應的使用說明書中操作方法進行操作，同時測定同一份血清標本，測定20次，計算批內精密度。結果見表1。

2.4 標準品準確度試驗

以中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)的總蛋白標準液(70.0 g/L)作為標準品，以上述另外3個廠家生產(chǎn)的總蛋白標準液作為樣品，分別按標準品使用說明書進行操作，平行測定5次，取平均值。結果見表1。

3 討論

本試驗結果表明，采用同一質控血清測定不同廠家的總蛋白試劑盒，測定值均在質控血清值范圍內，且結果比較集中、偏差不大，線性關系良好，樣品的批內精密度均小于1%。以中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)的總蛋白標準液為標準品測定的準確度結果較好，能滿足體外診斷試劑不準確性的要求。

對4個廠家同一產(chǎn)品的試驗結果表明，采用半自動生化分析儀測定不同廠家的總蛋白試劑盒，方法可行。同時，本試驗也為該類產(chǎn)品制訂統(tǒng)一的國家質量檢測標準提供了依據(jù)。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學工業(yè)出版社，2005:附錄ⅣA.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社，2006:337.