袁志臣

臨床ABO血型正反定型不一致原因分析及對(duì)策

袁志臣

目的分析日常工作中常見ABO定型困難原因及可采用的辦法。方法根據(jù)ABO正反定型原則，從紅細(xì)胞表面及血清中相應(yīng)的抗體兩方面分析。結(jié)果ABO血型正反定型不符原因一般有四種情況;血清中抗體減弱或意外抗體、紅細(xì)胞上減弱或缺失或未知的抗原反應(yīng)。結(jié)論正確解決血型正反定型不一致情況，確保臨床輸血安全。

ABO血型;血型亞型;分析;對(duì)策

自今紅細(xì)胞系已發(fā)現(xiàn)26個(gè)血型系統(tǒng)，血型抗原有400多種以上。臨床輸血血型鑒定包括正反定型，日常工作中長(zhǎng)遇到血型正反定型不一致現(xiàn)象，給鑒定血型帶來(lái)了麻煩，現(xiàn)根據(jù)情況發(fā)表個(gè)人的解決辦法，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院臨床受血者血液標(biāo)本1687例。

1.2 方法 留取受血者抗凝血液標(biāo)本，用條形碼標(biāo)識(shí)防止血液標(biāo)本搞錯(cuò)，室溫保存。試劑由上海醫(yī)藥公司和長(zhǎng)春博德公司提供，均在有效期內(nèi)使用。

2 結(jié)果

見表1。

表1 1687例血型鑒定情況

3 原因分析及對(duì)策

3.1 減弱或缺少的抗原反應(yīng) ①A或B抗原的亞型;抗原數(shù)目的減少，正常1個(gè)RBC上有1百萬(wàn)個(gè)A抗原分子，A2有25萬(wàn)個(gè)，A3僅有3萬(wàn)多個(gè)，但亞型RBC上H抗原數(shù)增多。疑為A或B亞型，在試驗(yàn)中可加做RBC與抗AB、抗H反應(yīng)試驗(yàn)，因?yàn)閬喰头磻?yīng)特點(diǎn)是與抗AB、抗H反應(yīng)比同型更強(qiáng)，對(duì)策;正定型用不同廠家，不同來(lái)源、效價(jià)高的定型試劑，通過(guò)加大抗血清反應(yīng)量、延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間、選擇最合適的反應(yīng)溫度以及吸收放散試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證RBC上有無(wú)相應(yīng)的抗原［1］。②疾病狀態(tài);腸癌、急性白血病可導(dǎo)致抗原減弱。如A型急性白血病患者在疾病活動(dòng)期更變?yōu)锳3亞型，在疾病緩解期又恢復(fù)到原來(lái)A型的反應(yīng)。③過(guò)量的血型特異性可溶性物質(zhì)在患卵巢腫瘤、胃癌、胰腺癌、腸梗阻的情況時(shí)，能觀察到多的血型特異性可溶性物質(zhì)，患者血清中的ABH物質(zhì)可能極高，可以抑制抗A或抗B試劑的作用，對(duì)策;用生理鹽水洗RBC三遍即可。

3.2 未知的抗原反應(yīng) ①獲得性A或B抗原;曾有獲得性A報(bào)告，Tn活化的紅細(xì)胞，能證明具有獲得性A抗原，是因?yàn)門n抗原的免疫性多糖為N-乙酰基半乳糖和A抗原相同的抗原。獲得性B抗原在腸道阻塞或其他下腸道疾患的患者，腸壁的通透性增加使大腸桿菌(血清型O86)的細(xì)菌性多糖透過(guò)腸壁進(jìn)入患者血液，使A型人RBC吸附B樣多糖而與抗B抗體發(fā)生反應(yīng)，這種患者在其腸道阻塞或感染受控制后，會(huì)恢復(fù)原有血型。②改變的抗原;RBC被大多數(shù)正常人類血清所凝集的反應(yīng)稱多凝集反應(yīng)，包括T抗原活化、Tn抗原活化、Cad多凝集。T活化一般為暫時(shí)性的，通常由細(xì)菌、病毒、酵母菌引起。Tn抗原活化并不多見，是永久性改變，與血液學(xué)方面異常有關(guān);如溶血性貧血、白細(xì)胞減少、血小板減少癥。T抗原、Tn抗原活化的細(xì)胞有以下5個(gè)特點(diǎn):a)紅細(xì)胞膜的唾液酶含量減少。b)與所有正常成人血清發(fā)生混合視野型凝集反應(yīng)。c)不為臍帶血血清凝集。d)不為自身血清凝集、由于缺乏唾液酸因此不為凝集胺凝集。e)M、N表面抗原減少。對(duì)策:T抗原活化在室溫反應(yīng)較強(qiáng)，在37℃反應(yīng)較弱，一般來(lái)講，T活化紅細(xì)胞用抗A、抗B試劑作用ABO定型，并無(wú)困難，試驗(yàn)可在37℃下進(jìn)行。Tn抗原活化用1%的木瓜酶處理Tn活化的紅細(xì)胞，以破壞Tn接收器部位，可準(zhǔn)確測(cè)出ABO血型。Cad多凝集紅細(xì)胞上帶大量Sda抗原不為酶的處理所破壞，可利用其與特殊植物凝集素反應(yīng)而排除。③抗體附著的紅細(xì)胞;有抗體稠密的附著的紅細(xì)胞，可顯示直抗試驗(yàn)陽(yáng)性，可在紅細(xì)胞分型法中產(chǎn)生混合視野或減弱的凝集反應(yīng)，這種情況通常出現(xiàn)自身免疫性溶血性貧血患者，服用抗高血壓藥物，輸血反應(yīng)及新生兒溶血病的患者。對(duì)策;利用放散方法移去附著的抗體，然后與抗A抗B反應(yīng)，即可得到正確結(jié)果。④紅細(xì)胞的混合性反應(yīng);在ABO細(xì)胞分型法中混合視野凝集，通常是指示輸了不同血型的血液，如輸O型血至A型人或A型血至O型人。若新近輸血、骨髓移植的收髓者可排除，應(yīng)考慮的其他原因有;鉗合現(xiàn)象、A3亞型、白血病、Tn多凝集反應(yīng)。

［1］ 曹瓊，周華友.改良吸收放散試驗(yàn)證明異種弱血型抗原．中華現(xiàn)臨床醫(yī)學(xué)雜志，2006，13(4);96．

466000河南省周口市?？撇♂t(yī)院檢驗(yàn)科

3.3 減弱的或缺少的抗體反應(yīng) ①年齡;新生兒及老年人可顯示種屬抗體的減弱或缺少，對(duì)新生兒一般不做反定型。②丙球蛋白過(guò)低血癥;丙球蛋白過(guò)低血癥的情況包括免疫抑制藥物的應(yīng)用，白血病、免疫缺乏癥患者及骨髓移植后。③丙球蛋白缺乏血癥;丙球蛋白缺乏血癥可分為先天性和后天性，如常Bruton氏丙球蛋白缺乏血癥以及物理性(放射線)的作用，都可促成丙球蛋白缺乏血癥的發(fā)生。④鉗合現(xiàn)象(不常見);真正的鉗合現(xiàn)象很少發(fā)現(xiàn)，大半見于雙胞胎的人體，有兩種種群的紅細(xì)胞終生存在體內(nèi)。對(duì)策:對(duì)減弱的抗體可采取增加反應(yīng)的血清量、延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間、改變反應(yīng)溫度(4℃反應(yīng))來(lái)解決。

3.4 未知的抗體反應(yīng) ①緡錢狀形成;能產(chǎn)生緡錢狀的情況有;血清蛋白濃度異常、球蛋白濃度升高、原發(fā)性巨球蛋白血癥、纖維蛋白濃度升高、血漿擴(kuò)張劑(如右旋糖酐)存在、何杰金氏淋巴瘤，新生兒臍帶內(nèi)華通氏膠也可引起緡錢狀形成。對(duì)策;鏡檢，發(fā)現(xiàn)緡錢狀凝集，滴加生理鹽水消除。②冷型自身抗體;抗I是血清分型法最常見的自身抗體，抗I通常凝集所有獻(xiàn)血者紅細(xì)胞，包括患者自己的紅細(xì)胞及分型用的紅細(xì)胞。對(duì)策;抗I與同型或O型臍帶血紅細(xì)胞不凝集，可加以區(qū)分。③未知的種屬凝集素包括;A2、A2B、AX、Ael型人血清內(nèi)產(chǎn)生的抗A1抗體、B3、BX、Bel型人血清中產(chǎn)生的抗B抗體。對(duì)策;熟悉ABO亞型血清學(xué)反應(yīng)特點(diǎn)。④未知的同種抗體;抗M、抗 N、抗P1、抗 Lea抗 Leb與部分分型紅細(xì)胞反應(yīng)。對(duì)策;在反定型試驗(yàn)中一定要做O細(xì)胞，O細(xì)胞凝集可有助于一些鹽水抗體的發(fā)現(xiàn)。

3.5 ABO正反定型不一致的解決步驟 正反定型中出現(xiàn)任何意外結(jié)果，如在重復(fù)試驗(yàn)中，甚至使用了新鮮標(biāo)本后，仍出現(xiàn)同樣的結(jié)果，有以下步驟可參考;①意外陰性;血清或血漿用以下方法重復(fù)，加做自身對(duì)照、增加血清反應(yīng)比例、延長(zhǎng)孵育時(shí)間、改變反應(yīng)溫度，鏡檢。紅細(xì)胞;洗滌紅細(xì)胞、延長(zhǎng)孵育時(shí)間、改變反應(yīng)溫度、用不同來(lái)源的抗體檢測(cè)、鏡檢。對(duì)可能的亞型或因?yàn)榛颊吣挲g、疾病或用藥造成的抗原減弱，可做吸收放散試驗(yàn)。②意外陽(yáng)性;血清或血漿做不規(guī)則抗體篩選，做自身對(duì)照。若出現(xiàn)所有紅細(xì)胞包括自身細(xì)胞陽(yáng)性，則考慮自身抗體。若A1細(xì)胞陽(yáng)性，A2細(xì)胞和篩選細(xì)胞陰性，自身對(duì)照陰性，則考慮含抗A1的A或AB亞型。若出現(xiàn)部分細(xì)胞陽(yáng)性，自身細(xì)胞陰性，則考慮血清中意外抗體，用譜細(xì)胞檢查抗體類型。紅細(xì)胞;用溫鹽水洗滌，結(jié)果相符，則考慮由冷抗體或緡錢狀凝集造成。若仍不相符，用不同來(lái)源診斷試劑、查看患者診斷、輸血史、考慮獲得性B、細(xì)胞多凝集等因素。若直抗陽(yáng)性，則紅細(xì)胞放散為直抗陰性再定型。