亢 瑋，王文義，王友國(guó)

(魯南制藥集團(tuán)股份有限公司，山東臨沂276006)

阿昔莫司(acipimox)抑制游離脂肪酸自脂肪組織釋放，降低血中極低密度(VLDL)和低密度(LDL)脂蛋白濃度，降低甘油三酯和總膽固醇水平。可用于高甘油三酯血癥(IV型高脂蛋白血癥);高膽固醇血癥(Ⅱa型高脂蛋白血癥);高甘油三酯和高膽固醇血癥(Ⅱb型，Ⅲ型及Ⅴ型高脂蛋白血癥)。在阿昔莫司分散片的質(zhì)量研究過(guò)程中，本實(shí)驗(yàn)采用反相高效液相色譜法，建立其含量測(cè)定方法。本法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，可用于阿昔莫司分散片的含量測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀;VWD檢測(cè)器。

1.2 試藥 阿昔莫司對(duì)照品(純度為100.0%);阿昔莫司分散片(規(guī)格:0.25 g 批號(hào):090601，090602，090603)(魯南貝特制藥有限公司);乙腈為色譜純，硫酸氫四丁基銨溶液為分析純。

2 色譜條件與色譜圖

色譜柱:Agilent C18(150 mm ×4.6 mm)，流動(dòng)相:0.005 mol·L－1的硫酸氫四丁基銨溶液(用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至6.0)－乙腈(90∶10)，檢測(cè)波長(zhǎng)為 269 nm，流速為 1.0 mL·min－1。進(jìn)樣量為20 μL。在上述條件下，按阿昔莫司峰計(jì)算理論板數(shù)不低于2 000。樣品溶液色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 樣品溶液色譜圖

3 方法學(xué)驗(yàn)證

3.1 輔料干擾實(shí)驗(yàn) 取處方量輔料適量，按“3.6”項(xiàng)下操作。另取阿昔莫司對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并定量配制成10 μg· mL－1的溶液，進(jìn)樣測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明輔料不干擾阿昔莫司的測(cè)定。

3.2 線性范圍 取阿昔莫司對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相溶解并稀釋成每1 mL含0.1 mg的溶液作為貯備液。精密量取貯備液0.1，0.5，1.0，2.0，5.0 mL 置10 mL 容量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度，搖勻。在上述色譜條件下，進(jìn)樣20 μL記錄色譜圖。以阿昔莫司濃度C(μg· mL－1)為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程:A=－22.808+81.063C，r=0.999 9。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，阿昔莫司在1～50 μg· mL－1濃度范圍內(nèi)，峰面積與濃度線性關(guān)系良好。

3.3 精密度實(shí)驗(yàn) 取“3.6”項(xiàng)下的對(duì)照溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，以峰面積計(jì)算，RSD為0.3%。

3.4 回收率實(shí)驗(yàn) 按處方量取高(120%)、中(100%)、低(80%)3種濃度的阿昔莫司對(duì)照品，每個(gè)濃度分別稱3份均加入處方量輔料，制成溶液，按“3.6”項(xiàng)下操作，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

3.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 按含量測(cè)定方法，取“3.6”項(xiàng)下的樣品，分別在 0，1，2，4，6，8 h 進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積，RSD 為0.5%，說(shuō)明樣品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.6 含量測(cè)定 取本品10片，精密稱定，研細(xì)，混合均勻;精密稱取適量(約相當(dāng)于阿昔莫司10 mg)置于100 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液1 mL置于10 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，作為供試品溶液。另取阿昔莫司對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1 mL含10 μg的溶液，作為對(duì)照溶液。分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20 μL注入高效液相色譜儀，記錄峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算供試品中阿昔莫司的含量，3批樣品(090601，090602，090603)標(biāo)示量的百分含量分別為99.8%，99.7%，99.5%。

表1 阿昔莫司分散片回收率實(shí)驗(yàn)

4 討論

有關(guān)文獻(xiàn)［1］中流動(dòng)相采用甲醇－水－冰醋酸(60∶40∶1)為流動(dòng)相，本方法同時(shí)結(jié)合阿昔莫司分散片局頒標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法，最終采用0.005 mol·L－1的硫酸氫四丁基銨溶液(用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至6.0)－乙腈(90∶10)為流動(dòng)相，阿昔莫司的理論板數(shù)為7 231，保留時(shí)間為3.2 min左右.

［1］公方美，劉加中，孫聚香.HPLC法測(cè)定阿昔莫司原料的含量［J］.齊魯藥事，2004，23(7):27－28.