盧桂香

乙型肝炎在我國有很高的發(fā)病率，乙型肝炎血清標志物的檢查是診斷該病的主要手段。傳統(tǒng)的檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），近年來時間分辨免疫熒光法（TRFIA）和電化學發(fā)光法（ECLIA）的應用也越來越多[1]。筆者采用3種方法對乙型肝炎血清標志物進行檢測，比較3種方法的檢測靈敏度及精神度，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

90例病例均為我院2011年1月～2011年12月采用采用電化學發(fā)光法（ECLIA）證實的乙型肝炎病毒（HBV）感染患者，所有患者均符合乙型肝炎的診斷標準，其中男性患者61例，女性患者29例；年齡18～55歲。同時選取45例體檢健康者的血清。

1.2 儀器試劑

ELISA檢測使用安圖生物公司PHOMO酶標儀，試劑盒由珠海麗珠生物公司提供；TRFIA檢測使用上海新波生物技術(shù)公司生產(chǎn)的ANYTEST時間分辨免疫熒光分析儀，試劑盒由上海新波生物提供；ECLIA檢測使用德國LIAISON電化學發(fā)光免疫分析儀及配套的試劑。

1.3 結(jié)果判定

根據(jù)試劑盒中的說明書中給出的Cut-off值對檢測結(jié)果進行判斷?；颊哐航?jīng)夾心法檢測，檢測結(jié)果＞Cut-off值為陽性，經(jīng)競爭法檢測，檢測結(jié)果＜Cut-off值為陽。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS17.0軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計與分析，檢測結(jié)果的一致性使用Kappa檢驗，抽樣誤差的影響通過μ檢驗進行排除。檢測結(jié)果一致性的程度分為6個區(qū)段：極強，Kappa系數(shù)0.81-1.0；高度，Kappa系數(shù)0.61～0.8；中度，Kappa系數(shù)0.41～0.6；弱，Kappa系數(shù)0.21～0.4；微弱，0～0.2；極差，Kappa系數(shù)＜0。

2 結(jié)果

2.1 ELISA與ECLIA方法檢測結(jié)果比較

所有患者的血清中的乙型肝炎標志物采用ELISA與ECLIA方法檢測的結(jié)果比較見表1。

2.2 TRFIA與ECLIA方法檢測結(jié)果比較

所有患者的血清中的乙型肝炎標志物采用TRFIA與ECLIA方法檢測的結(jié)果比較見表2。

表1 ELISA與ECLIA方法檢測乙型肝炎標志物的結(jié)果比較

3 討論

目前，全球的乙型肝炎病毒攜帶者據(jù)報道有將近3億人，而我國的乙型肝炎病毒攜帶者大約有1.3億[2]，是世界上的乙肝高發(fā)國。乙型肝炎血清標志物是乙肝患者的臨床診斷標準，其檢測方法是臨床技術(shù)人員一直以來高度重視的方面。其最早的檢測方法為免疫擴散試驗、對流免疫電泳試驗等，目前比較常用的檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗、電化學發(fā)光法、時間分辨免疫熒光法、聚合酶鏈反應(PCR)檢測以及更高級的免疫PCR檢測方法等[3]。其中電化學發(fā)光法是目前臨床上敏感性及特異性均最好的檢測方法。本組研究中，以電化學發(fā)光法作為參考方法，而酶聯(lián)免疫吸附試驗及時間分辨免疫熒光法的檢測與之進行比較。

從本組研究結(jié)果可以得出，目前使用最多的酶聯(lián)免疫吸附試驗與電化學發(fā)光法在HBeAG的檢測上具有極強的一致性，而其余四項的檢測為高度一致性。說明酶聯(lián)免疫吸附試驗一直具有很好的特異性。但其敏感性仍有略微的不足[4]。本組研究顯示，時間分辨免疫熒光法和電化學發(fā)光法在HBsAg、HBeAg、抗HBe、抗HBc的檢測上具有極強的一致性，而在抗HBs的檢測上具有高度一致性。但在檢測健康者血清時反應出時間分辨免疫熒光法的特異并不是十分理想。但目前時間分辨免疫熒光法的試劑已經(jīng)國產(chǎn)化，從而大大的降低了試驗的成本，在一定情況下可以替代進口的試劑[5]。

綜上所述，目前實驗室中所使用的血清乙型肝炎標志物的檢測方法具有較高的一致性，可以用于實驗室之間的相互確認試驗。

[1]陳佑明,黃敬,熊符,等.時間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測HBsAg的對比分析[J].標記免疫分析與臨床,2006,13(1):50-51.

[2]毛一雷，杜順達.進一步完善原發(fā)性肝癌的術(shù)前評估體系[J].中華外科雜志，2010，48（20）：1530-1533.

[3]奚錦芳.86名臨床檢驗人員HBV血清標志物結(jié)果分析[J].當代醫(yī)學,2010,16(15):88-89.

[4]劉伶.乙型肝炎病毒(HBV)熒光定量檢測與免疫學標志物檢測的比較與分析[J].當代醫(yī)學,2009,15(16):61-62.

[5]趙秀英,陳俊梅,辛永梅,等.不同方法檢測乙型肝炎病毒血清標志物的差異[J].肝臟,2008,13(4):303-305.