阮志鵬，何梅欽，侯炳昌，余雪媛，何金火

（1.莆田學院醫(yī)學院藥學系，福建 莆田 351100 E－mail：rzp611＠yahoo.com.cn；2.莆田學院醫(yī)學院臨床醫(yī)學系，福建 莆田 351100；3.福建莆田第一中學化學教研組，福建 莆田 351100）

艷山姜又名玉桃，為姜科山姜屬植物，具有溫胃散寒、燥濕健脾、行氣止痛、截瘧等功效［1］。姜科植物中有很多為常用的中藥材或草藥，例如姜科山姜屬植物的高良姜不僅具有抗消化道潰瘍、解除胃腸痙攣、止吐作用，還具有鎮(zhèn)痛抗炎、抗血栓形成、抗氧化及化學預防作用［2，3］，其主要化學成分以雙苯庚烷類和黃酮類為主，雙苯庚烷類化合物和黃酮類化合物有效結構多樣，因此藥理作用也很廣泛，具有較好的抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛和抗腫瘤、抗細胞毒活性。但同樣作為山姜屬植物的艷山姜，目前對其促進胃腸運動研究的報道則較少。本實驗擬觀察其對實驗動物胃腸運動的影響，并檢測大鼠胃及十二指腸電活動的變化，以探討其可能的作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 正露丸，大幸藥品株式會社生產，批號11EA01；甲基橙，溫州市華僑化學試劑有限公司生產，批號20061027；黑墨水，上海派克筆有限公司生產，批號DO9941；0.1mmol／L碳酸氫鈉溶液，由莆田學院機能中心實驗室提供；艷山姜果實。實驗前配置0.0125g／ml正露丸溶液，0.1%甲基橙溶液，避光儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 動物 健康昆明種小鼠100只，體重16～24g，SD大鼠50只，體重180～220g，雌雄均有，由福建醫(yī)科大學實驗動物研究室提供。

1.3 儀器 離心機，型號：80－2，由上海浦東物理光學儀器廠生產；精密電子天平，型號：GF－200，由日本AND生產；721分光光度計，上海第三分析儀器廠生產；民間瓦罐燉蠱，深圳市聯創(chuàng)實業(yè)有限公司生產，型號：DF－BL011。RM6240生物信號采集處理系統(tǒng)，成都儀器廠生產。

1.4 實驗方法

1.4.1 艷山姜果實提取液的制備 用精密電子天平稱取艷山姜果實50g，加水200ml，混勻置于民間瓦罐燉蠱，燉化4h，將燉化后的溶液充分過濾，棄濾渣，再將收集的濾液經1 500r／min離心機離心，收集上清液，40℃旋轉蒸發(fā)后得到濃縮液為艷山姜果實提取液（Alpinia zerumbet fruit extract，Afex），用該濾液分別配置成0.4、0.2、0.1g／ml Afex，待用。

1.4.2 Afex對健康小鼠胃排空的影響 將50只健康小鼠隨機分成5組，每組10只，分組和給藥情況如下：①陰性對照組（蒸餾水，20ml／kg）；②陽性對照組（正露丸，0.625g／kg）；③Afex大劑量組（8g／kg）；④Afex中劑量組（4g／kg）；⑤Afex小劑量組（2g／kg）組。灌胃給藥，每日1次，連續(xù)給藥4天，末次給藥前禁食不禁水12h，第4天末次給藥為皮下注射，末次給藥40min后對各組每只小鼠灌胃0.1%甲基橙溶液0.7ml，20min后用頸椎脫臼法處死小鼠，立即剖腹取胃結扎胃賁門和幽門，取胃放于小燒杯中并加入10ml蒸餾水，將胃剪開充分沖洗，用碳酸氫鈉溶液調pH 至6.0～6.5，3 500r／min離心洗出液15min，將上清液置于721分光光度計于560nm波長處測其吸光度作為胃內0.1%甲基橙光密度［4］。

另以0.1%甲基橙0.7ml加入到10ml蒸餾水搖勻后置于721分光光度計于560nm波長處測其吸光度作為基數甲基橙光密度。計算甲基橙胃殘留率（%）。

甲基橙胃殘留率（%）＝胃甲基橙光密度／基數甲基橙光密度×100%

1.4.3 Afex對健康小鼠腸推進的影響 將50只生理狀態(tài)良好的小鼠，隨機分成5組，每組10只，分組和給藥情況同1.4.2項。灌胃給藥，每日1次，連續(xù)4天。末次給藥前禁食但不禁水24h，第4天末次給藥為皮下注射，末次給藥后30min，灌服墨汁0.1ml／只，20min后處死，立即剖腹取出胃腸，平鋪于玻璃板上，測量墨汁前端在腸管內的移動距離和小鼠的全長（自幽門至回盲部），計算推進百分率。

墨汁推進百分率（%）＝墨汁前端與幽門的距離／小腸全長×100%

1.4.4 Afex對大鼠胃及十二指腸電活動的影響［5］取大鼠50只，分組及給藥方法同1.4.2項。經禁食24h后，3%戊巴比妥鈉（1ml／kg）腹腔麻醉，剖腹，暴露胃腸；在胃竇部及十二指腸中段的平滑肌中各插入一對直徑為0.35mm的F4－康銅電極線，關腹，導線引出腹腔，1周后將導線與RM6240生物信號采集處理系統(tǒng)相連，選擇時間常數0.03s，高頻濾波10Hz，描記在給藥后1h內胃腸平滑肌電活動的頻率和振幅的變化。

2 實驗結果

2.1 Afex對健康小鼠胃排空的影響 與陰性對照組（蒸餾水組）比較，陽性對照藥正露丸也可減少甲基橙胃殘留率，但差異無顯著性；3個劑量（2、4、8g／kg）的 Afex，均有降低甲基橙胃殘留率作用（P＜0.05），有提高胃排空趨勢，且呈劑量依賴性。但隨著劑量的增加，Afex 3個劑量組（2、4、8g／kg）之間的甲基橙胃殘留率比較差異無顯著性，見表1。

表1 各組艷山姜果實提取液對健康小鼠胃排空的影響 （±s，每組n＝10）

表1 各組艷山姜果實提取液對健康小鼠胃排空的影響 （±s，每組n＝10）

注：與蒸餾水對照組比較，a：P＜0.05

組別 劑量（g／kg） 甲基橙胃殘留率（%）38.21±15.21正露丸組 0.625 35.96±13.52 Afex小劑量組 2 30.49±12.29a Afex中劑量組 4 26.53±11.23a Afex大劑量組 8 25.69±11.45蒸餾水組 －a

2.2 Afex對健康小鼠腸推進的影響 與陰性對照組比較，陽性對照藥正露丸也可促進小鼠小腸中墨汁的推進，但差異無顯著性；3個劑量（2、4、8g／kg）的 Afex，均有促進小鼠小腸中墨汁推進的作用（P＜0.05），且呈劑量依賴性。但隨著劑量的增加，Afex 3個劑量組（2、4、8g／kg）之間的小鼠小腸中墨汁推進百分率比較差異無顯著性，見表2。

表2 各組艷山姜果實提取液對健康小鼠腸推進的影響 （±s，每組n＝10）

表2 各組艷山姜果實提取液對健康小鼠腸推進的影響 （±s，每組n＝10）

注：與蒸餾水對照組比較，a：P＜0.05

組別 劑量（g／kg）小腸全長（cm）推進長（cm）墨汁推進百分率（%）－ 47.5±5.2 24.7±4.1 51.9±5.2正露丸組 0.625 48.2±5.9 27.6±5.55 7.6±10.4 Afex小劑量組 2 47.4±5.1 29.6±6.9 62.1±9.9a Afex中劑量組 4 47.1±5.2 32.8±6.2 69.5±9.1a Afex大劑量組 8 47.3±4.7 36.3±6.6 76.3±8.1蒸餾水組a

2.3 Afex對大鼠胃及十二指腸電活動的影響 見表3。對各組大鼠胃及十二指腸電活動進行分析發(fā)現，正露丸組和Afex 3個劑量組（2、4、8g／kg）均可引起大鼠胃電活動的變化，表現為慢波頻率加快、振幅增高，其中以4g／kg劑量組的胃電變化最為顯著，與陰性對照組比較差異有顯著性（P＜0.05）。

3 討論

艷山姜具溫胃散寒、燥濕健脾、行氣止痛、截瘧等功效［6］。艷山姜在莆田民間被廣泛應用，其葉用于紅團的制作歷史悠久，民間有流傳積食用紅團治療。民間對艷山姜的應用多集中在其根莖和葉方面，基礎研究較少，本實驗依據艷山姜果實粗提物促胃腸動力作用進行研究，并對其可能作用機制進行了初步探索，為進一步發(fā)現艷山姜的有效作用部位及藥理作用機制提供線索。

表3 Afex對大鼠胃及十二指腸電活動的影響 （±s，每組n＝10）

表3 Afex對大鼠胃及十二指腸電活動的影響 （±s，每組n＝10）

注：與蒸餾水對照組比較，a：P＜0.05

組別 劑量（g／kg）慢波頻率（次／min）振幅（mV）－ 3.65±0.24 3.53±0.53正露丸組 0.625 4.26±0.44 4.10±0.54 Afex小劑量組 2 4.44±0.48 4.11±0.33a Afex中劑量組 4 4.91±0.49 4.93±0.69a Afex大劑量組 8 4.73±0.51 4.65±0.40蒸餾水組a

實驗結果證實，不同劑量（2、4、8g／kg）的艷山姜果實提取液對小鼠胃排空、腸推進具有一定的促進作用，且呈一定的量—效關系，隨艷山姜劑量的增加其作用愈加明顯。不同劑量（2、4、8g／kg）的艷山姜果實提取液對小鼠的腸推進作用以及胃排空作用均強于正露丸，且大鼠胃十二指腸的慢波頻率加快、振幅增高，表明其作用機制可能與促進胃十二指腸電活動有關，對胃、十二指腸平滑肌收縮活動有較強的促進作用。艷山姜果實提取液的有效成分可能與艷山姜的雙苯庚烷類和黃酮類的化學成分有關［6］。雙苯庚烷類化合物可對抗由于硫酸酮引起的嘔吐，對番瀉葉引起的腹瀉亦有效。黃酮類化合物具有預防術后腹脹、抗病原微生物等作用?？赏ㄟ^增加胃液分泌和胃蛋白酶活性，降低總酸度與游離酸度，對胃有收縮興奮作用；對腸肌張力升高，振幅升高，收縮加快等引起腸管興奮性升高，從而促進胃內容物排空和腸壁蠕動。對該過程具體作用機制有待進一步研究。

從目前的臨床應用情況來看，促胃腸動力的藥物較少，中草藥的開發(fā)及利用就更為有限。所以，該研究具有良好的應用前景。隨著社會生活水平的不斷提高，人們飲食方式及食物的逐漸多樣化、復雜化等因素，由此而造成的胃腸道消化不良等胃腸道動力障礙性疾病逐漸增多。胃腸道動力異常性疾病是人群中的多發(fā)病、常見病。中醫(yī)認為脾胃虛弱、氣機失調為其病機。飲食勞倦、損傷脾胃、中氣不足、邪犯胃腸等為其病因。因此進一步研發(fā)促胃腸動力藥物是基礎醫(yī)學、臨床醫(yī)學研究領域的迫切需求。從自然界豐富的藥用植物中發(fā)現促胃腸動力藥物將具有廣闊的應用前景。

該研究結果為植物資源的合理研究開發(fā)與充分有效利用提供了實驗基礎。利用當地民間驗方進行研究是中草藥研究的一個方向，研究結果可促進農村中醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展及促進艷山姜果實資源的合理開發(fā)與利用。

［1］ 陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：27－67.

［2］ 彭騰，李鴻翔，文煥松，等.蜜橘皮中檸檬苦素總類似物促胃腸動力實驗研究［J］.海峽藥學，2010，22（8）：36.

［3］ 趙學軍，熊天琴，李卓明，等.疏肝和胃顆粒的催眠和促胃腸動力作用實驗研究［J］.成都中醫(yī)藥大學學報，2006，3（1）：40.

［4］ 李煜國，薛敬東.達泰膠囊促胃腸動力作用的實驗研究［J］.中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志，2005，11（8）：599.

［5］ 趙賢俊，金永日，崔海月，等.胃腸寧合劑對大鼠胃腸運動的作用及其機制探討［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2005，32（12）：1327－1329.

［6］ 楊世林，楊學東，劉江云.天然產物化學研究［M］.北京：科學出版社，2009：445－454.