郭燕，李俠，楊海晨

(江蘇淮安市第二人民醫(yī)院老年科，223002)

·臨床研究·

Toll樣受體2和4在老年慢性左心力衰竭中的表達

郭燕，李俠，楊海晨

(江蘇淮安市第二人民醫(yī)院老年科，223002)

目的 探討Toll樣受體2(TLR2)和T0ll樣受體4(TLR4)在老年慢性左心力衰竭患者外周血單核細胞表面的表達。方法 根據(jù)NYHA心功能分級和左室射血分數(shù)(LVEF)將健康對照者和慢性左心力衰竭患者分成對照組、心功能I級、Ⅱ級、Ⅲ級和Ⅳ級組。采用流式細胞儀檢測外周血單核細胞表面TLR2和TLR4的表達。結果 左心力衰竭患者不同心功能組中TLR2和TLR4的表達均顯著高于對照組(均P＜0.05)，且隨著心功能分級的升高而明顯上升。LVEF隨著心功能分級的升高而逐漸下降，且與對照組比較，均P＜0.05。結論 TLR2和TLR4可能作為一種危險因素參與老年慢性左心力衰竭的發(fā)生發(fā)展。

心力衰竭，充血性;Toll樣受體2;Toll樣受體4;危險因素;老年人

臨床上通常根據(jù)腦鈉肽(BNP)水平判定心力衰竭嚴重程度。但在無心力衰竭的60歲以上人群中發(fā)現(xiàn)腦鈉肽水平也升高［1-2］。因此在老年患者中僅根據(jù)腦鈉肽水平來判斷左心力衰竭嚴重程度有一定的局限性。為此我們通過臨床研究，探討Toll樣受體在老年慢性左心力衰竭患者外周血中的表達，為老年慢性左心力衰竭提供可能新的診斷手段。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年1月至2009年1月在本院老年病科的慢性左心力衰竭患者共87例，年齡60～86歲，平均(69.6±7.6)歲，其中男46例，女4l例。所有患者均符合老年左心力衰竭的臨床診斷標準［3］，入選患者經(jīng)病史及臨床實驗室檢查排除右心室功能受損、腫瘤、感染、血液系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病、近期手術、外傷、腎功能不全、肝臟疾病和發(fā)熱等，且均未服用非甾體抗炎藥和類固醇激素。根據(jù)美國紐約心臟病學會(NYHA)的心功能分級方案和超聲心動圖測定左室射血分數(shù)(LVEF)，將所有入選病例按心功能分成4組:I級組［LVEF(42.9± 2.2)%］21例;Ⅱ級組［LVEF(34.2±3.2)%］27例;Ⅲ級組［LVEF(29.0±1.1)%］21例;IV級組［LVEF(25.1±2.1)%］18例。對照組［LVEF (63.8±5.1)%］30例，為同期健康體檢者，其中男12例，女18例，年齡60～87歲，平均(67.1±5.7)歲。各組間年齡和性別差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

1.2 方法 TLR2和TLR4檢測:入選者均清晨空腹采集肘靜脈血20 ml。應用流式細胞儀檢測外周血單核細胞表面TLR2和TLR4的表達，以平均熒光強度(MFI)表示TLR2和TLR4的表達水平。流式細胞儀為美國貝克曼庫爾特公司的EPICS8 ALTRA TM Flow Cytometer with Hypersort TM。主要試劑為FITC一標記的小鼠抗人CDl4抗體、PE-標記的小鼠抗人TLR一4抗體以及FITC-標記的小鼠抗人TLR-2抗體，并設置IgG2 a同型對照。研究所用抗體均購自AbD seroteeh公司。LVEF的檢測:87例老年慢性左心力衰竭患者采用日本彩色多普勒超聲診斷儀測定LVEF。

1.3 統(tǒng)計學處理 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件包進行分析，計量資料以±s表示，采用方差分析、q檢驗。采用直線相關和回歸分析判斷TLR2、ILR4與左心功能指標變量間相關性和依存性。

2 結果

2.1 TLR2和TLR4在心力衰竭組的表達 左心力衰竭患者不同心功能組中TLR2和TLR4的表達顯著高于對照組，且隨著左心力衰竭程度的加重，TLR2和TLR4表達水平明顯上升。在各組的兩兩比較中發(fā)現(xiàn)，除了心功能I級組與Ⅱ級組之間差異無統(tǒng)計學意義，其他各組的均差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 不同左心功能組間TLR2和TLR4比較(±s)

表1 不同左心功能組間TLR2和TLR4比較(±s)

注:與對照組比較，aP＜0.05

組別 例數(shù) TLR2 TLR4 LVEF(%) 30 2.75±0.82 1.45±0.36 60.8±2.9 I級組 21 4.24±2.39a2.58±1.84a40.7±3.7aII級組 27 4.16±0.93a2.61±0.53a30.8±2.6aIII級組 21 6.36±0.69a5.03±0.71a28.6±1.9aIV級組 18 7.99±1.10a6.34±1.40a26.6±2.2對照組a

2.2 TLR2和TLR4與左心力衰竭嚴重程度的相關性 TLR2與LVEF呈負相關(r=－0.67，P＜0.01)，TLR4與LVEF亦呈負相關(r=－7.14，P＜0.01)，且TLR2和TLR4隨著LVEF的增加而下降(bTLR2，=－2.37，bTLR4=－3.52，P＜0.05)，即隨著LVEF值下降，外周血單核細胞表面TLR2和TLR4表達增多。

3 討論

Toll受體是免疫細胞表面識別病原相關分子模式的一個模式識別受體家族，最新研究顯示其在動脈硬化免疫反應和慢性炎癥的相互作用方面起著重要的橋梁作用［4-5］。目前研究已證實，TLR2和TLR4可導致心肌缺血和心肌細胞凋亡，在心功能失調中起關鍵作用。研究提示，TLR2和TLR4在體內高度表達可引起左室功能減退和心力衰竭［6］。

急性冠脈綜合征(ACS)、穩(wěn)定型心絞痛(SAP)和頸動脈硬化患者的循環(huán)單核細胞、內皮細胞和粥樣硬化斑塊中TLR2和TLR4的表達明顯升高。因此TLR2和TLR4與內皮損傷、動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展以及動脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性有關［7-8］。實驗研究證實，TLR信號通路的激活可通過有害炎性反應促使白細胞聚集、細胞因子異常表達、心肌缺血、再灌注損傷、活化促凋亡信號反應通路、心肌梗死后心肌細胞再灌注損傷、活化促凋亡信號反應通路、心肌梗死后心肌細胞凋亡、心肌梗死面積擴大、心臟幾何構型異常和心臟功能障礙［9］。

本研究結果表明，老年慢性左心力衰竭不同心功能組兩兩比較，除了心功能I級與Ⅱ級組外，其他各組間的差異都有統(tǒng)計學意義。老年慢性左心力衰竭患者TLR2和TLR4的表達水平隨著左心力衰竭程度的加重而顯著升高。本研究提示在老年慢性左心力衰竭中TLR2和TLR4之間可能存在著一致性關系，它們與LVEF呈負相關并和左心功能之間存在著依存性。由此推斷，TLR2和TLR4可能作為一種危險因素參與老年慢性左心力衰竭的發(fā)生發(fā)展。TLR2和TLR4表達上調提示老年慢性左心力衰竭惡化、NYHA級別升高和LVEF下降，因此可能成為老年慢性左心力衰竭新的危險因素和評估老年慢性左心力衰竭危險分層的新指標。

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R541.61

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10.3969/J.issn.1672-6790.2012.04.031

2012-03-05)

郭燕，副主任醫(yī)師，E-mail:guoyan2001344@163.com