趙檢英，石 雕，譚 茜，徐愛良，彭延古

心腦血管疾病已成為人類健康的最大威脅之一［1］。組織型纖溶酶原激活物（t－PA）、纖溶酶原活化物抑制劑（PAI－1）是纖溶系統(tǒng)中重要的活性物質(zhì)，它們均由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生。在諸多因素中，纖溶系統(tǒng)功能失衡是造成血管事件發(fā)生的決定性因素［2］。正常情況下血漿t－PA和PAI－1處于動態(tài)平衡狀態(tài)，t－PA的血液含量及活性可預(yù)測血栓形成的危險(xiǎn)度［3］，PAI－1水平升高則與心腦血管病變的形成關(guān)系密切［4，5］。研究表明［6］，血漿t－PA和PAI－1水平與血管內(nèi)皮穩(wěn)定性密切相關(guān)，

監(jiān)測t－PA和PAI－1這兩項(xiàng)指標(biāo)，在心腦血管事件的預(yù)防和治療方面，有簡便易行、可反復(fù)測定和經(jīng)濟(jì)實(shí)用的特點(diǎn)。本研究旨在觀察全蝎純化液對家兔頸總動脈血栓形成血漿t－PA、PAI－1的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 新西蘭白兔50只，1.8kg～2.1kg，雌雄各半，購自長沙市東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動物有限公司衛(wèi)生防疫動物中心，動物許可證號：SCXK（湘）2009－0012。

1.1.2 藥物 全蝎購自湖南省醫(yī)藥有限公司，經(jīng)水煮醇沉［7］、凝膠層析和離子交換層析等分離純化過程將其制備，真空冷凍干燥成粉末，－20℃保存?zhèn)溆茫b定為肽類物質(zhì)。

1.2 方法 將50只新西蘭白兔采用隨機(jī)數(shù)字表法分為5組，空白組、模型組、全蝎純化液大劑量組（20mg／kg）、全蝎純化液中劑量組（10mg／kg）和全蝎純化液小劑量組（5mg／kg）。全蝎純化液各劑量組耳緣靜脈注射全蝎純化液，空白組、模型組給予同等體積的生理鹽水。注射后模型組和全蝎純化液大、中、小劑量組按鄧常青模型制備方法［8］分離兩側(cè)頸總動脈和股動脈，以兩個(gè)動脈夾夾閉一側(cè)頸總動脈兩端，夾間距離為2.5cm；用4號針頭刺入動脈并固定，迅速抽出動脈段內(nèi)殘留血液，并以生理鹽水反復(fù)沖洗3次至動脈段內(nèi)無殘血，然后用0.4mL 10%H2O2分3次～4次注入動脈段內(nèi)連續(xù)作用10min，再以生理鹽水沖洗2次，并用ZT醫(yī)用膠粘合針孔以止血，最后再放開血流。2h后剪下頸總動脈稱質(zhì)量，以另外一側(cè)等長的頸總動脈作為對照，兩者質(zhì)量差即為血栓質(zhì)量。造模2h后股動脈取血，采用酶聯(lián)免疫吸附法測t－PA、PAI－1的含量，試劑盒購自上海太陽生物技術(shù)有限公司，按說明書操作步驟進(jìn)行。以直接計(jì)數(shù)法測定血小板計(jì)數(shù)（Pt）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較用t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

與空白組比較，模型組t－PA明顯降低，PAI－1明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，全蝎大、中、小各劑量組t－PA的含量均增高，PAI－1含量均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而各組的血小板計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見表1。

表1 全蝎抗凝活性成分對t－PA、PAI－1的影響（±s）

表1 全蝎抗凝活性成分對t－PA、PAI－1的影響（±s）

組別 只數(shù) t－PA（kU／L） PAI－1（kAU／L） Pt（×109／L）空白組10 2.38±0.68 3.32±1.12 76.1±10.3模型組 10 1.65±0.451） 7.89±1.231） 71.2±9.8全蝎純化液大劑量組 10 6.59±0.911）2） 2.02±0.982） 79.8±7.9全蝎純化液中劑量組 10 4.98±0.761）2） 2.98±0.842） 73.3±8.2全蝎純化液小劑量組 10 3.52±0.891）2） 3.78±1.102） 75.6±6.8與空白組比較，1）P＜0.01；與模型組比較，2）P＜0.01

3 討 論

血栓性疾病主要是指動脈血栓性疾病與靜脈血栓性疾病，已成為我國與西方國家人口死亡與致殘的主要原因，是中老年人易發(fā)的疾病之一，而且目前青年病人的數(shù)量也在上升。按世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)計(jì)，每年大概有1 800萬人死于各種心腦血管疾病。動脈血栓形成是心腦血管疾病的重要病理基礎(chǔ)之一，探討血栓形成的病因病理，尋找抗血栓形成的藥物對于心腦血管疾病的防治具有重要意義。血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的完整是機(jī)體維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、調(diào)節(jié)止血與抗血栓形成平衡的主要環(huán)節(jié)。在動脈血栓栓塞性疾病中，血栓形成大多在血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、動脈粥樣斑塊破裂的基礎(chǔ)上發(fā)生的［9］。大量研究表明，活性氧能破壞血管組織，使血管內(nèi)皮受損。H2O2為活性氧的一種，與其他自由基一樣也能損害各種組織［10］。該實(shí)驗(yàn)中使用高濃度H2O2溶液通過損傷血管內(nèi)膜，建立家兔頸總動脈血栓模型，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，所有家兔均有血栓形成。當(dāng)家兔動脈血管內(nèi)皮用H2O2損傷后，血小板黏附于受損血管處暴露的內(nèi)皮下組織，進(jìn)而聚集、分泌、釋放血栓素A2（TXA2），使血小板進(jìn)一步活化，同時(shí)激活凝血系統(tǒng)，凝血酶促使纖維蛋白形成，最終形成附壁的血栓。血栓疾病與纖溶系統(tǒng)功能有著密切的關(guān)系，纖溶系統(tǒng)主要由PLg、纖溶酶原激活物和激活物抑制劑、纖溶酶和纖溶酶抑制劑組成。纖溶活性低下或纖溶抑制物活性增高，是血栓形成的一個(gè)促進(jìn)因素。近年來研究顯示，t－PA、PAI－1在纖維蛋白溶解過程中起著重要作用，t－PA是纖溶系統(tǒng)主要的生理性激活劑，它能在纖維蛋白凝塊上高效地激活纖溶酶原生成纖溶酶使纖維蛋白降解。PAI－1能快速作用于t－PA而形成復(fù)合物使t－PA滅活。t－PA和PAI－1主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，t－PA能使纖溶酶原激活為纖溶酶，繼而使纖維蛋白水解，PAI－1為此反應(yīng)過程的抑制劑。當(dāng)血栓形成時(shí)，t－PA選擇性地與血栓中的纖維蛋白結(jié)合，激活纖溶酶以溶解血栓。PAI－1作為一種重要的纖溶酶原激活物抑制物，主要在血小板活化釋放的同時(shí)被釋放到血液中抑制纖溶酶原激活物的活性［11］，其與t－PA是調(diào)節(jié)纖溶系統(tǒng)活性的重要成分，兩者功能的平衡是防止血栓形成的重要條件［12］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，全蝎純化液能增強(qiáng)t－PA的活性，降低PAI－1的活性，提示全蝎純化液抗栓、溶栓機(jī)制可能與其影響t－PA和PAI－1的分泌有關(guān)，通過增強(qiáng)t－PA的活性、降低PAI－1的活性，從而增強(qiáng)纖溶系統(tǒng)活性，呈現(xiàn)出纖溶作用，進(jìn)而抑制血栓形成，使血栓溶解。全蝎純化液通過調(diào)節(jié)t－PA和PAI－1這兩種平衡物質(zhì)，來維持機(jī)體纖溶功能的平衡穩(wěn)定，防止血栓形成。故全蝎純化液有可能發(fā)展成為一類新型的抗血栓藥物，為肝素治療無效的血栓患者開辟新的、有效的治療方案提供新的思路。

［1］王兆鉞.加強(qiáng)我國血栓性疾病的診治研究［J］.國際輸血及血液學(xué)雜志，2006，29（6）：481－482.

［2］Antiplatelet Trialists’Collaborative.Meta－analysis of randomized trials of antiplatelet therapy for prevention of death，myocardial infarction，and stroke in high risk patients［J］.BMJ，2002，342：71－86.

［3］Arnell JW，Sweetnam PM，Rumley A，etal.Life style and hemoststic risk factors for ischemic heart disease：The caerphilly study［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2000，20：271－279.

［4］Haverkate F.Levels of homeostatic factors arteriosclarosis and cardiovascular disease［J］.Vasc Phaimacol，2002，39（3）：109－112.

［5］Poredos P.Endothelial dysfunction in the pathogensis of atherosclerosis［J］.Int Angiol，2002，21（2）：109－116.

［6］鐘遠(yuǎn)，楊慶良，李蔚，等.PAI－1、t－PA／PAI－1比值與急性血管事件的相關(guān)性研究［J］.中國老年保健醫(yī)學(xué)，2006，4（4）：27－29.

［7］許光明，羅躍，彭延古，等.幾種無機(jī)陽離子對全蝎抗凝活性的影響［J］.湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，27（3）：23－24.

［8］鄧常青，賀石林，彭延古，等.以雙氧水損傷血管內(nèi)膜所致的家兔頸總動脈血栓模型［J］.中國病理生理雜志，1990，6：318－319.

［9］李家增.動脈血栓形成及其標(biāo)志物［J］.中華內(nèi)科雜志，2006，45（2）：158－159.

［10］孫向東，況煒，陳瑩瑩.過氧化氫的血管效應(yīng)及其作用機(jī)制［J］.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2005，17（2）：124－126.

［11］Liu XS，Cui X，Wang LN，etal.The protective effects of pituitary adenylate cylase－activating polypeptide on neuren apoptosis during complete cerebral ischemia－reperfusion injury［J］.Chin J Chin Rehabilita，2003，7（1）：34－37.

［12］Kazuyuzki S.Diferential effects of enalapril and nitrendipineon the fibrinolytic system in essential hypertension［J］.Am Heart J，2003，139：1099－1102.