蔣 緯,胡 穎,譚書明
(貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院食品系,貴州貴陽550025)
泡椒,俗稱泡辣椒或酸辣椒,是我國傳統(tǒng)的風(fēng)味蔬菜。泡椒是以新鮮辣椒為主要原料,調(diào)配后經(jīng)厭氧發(fā)酵而成的乳酸發(fā)酵制品。辣椒營養(yǎng)價值高,其中維生素C的含量在蔬菜中居第一位,是番茄的7~15 倍[1]。研究表明[2]:長期食用辣椒不僅能促進(jìn)消化、增強(qiáng)食欲,甚至還能阻止癌細(xì)胞擴(kuò)散,抑制癌細(xì)胞生長。我國長期以來絕大部分發(fā)酵蔬菜都采用傳統(tǒng)的制作工藝,由于自然發(fā)酵,產(chǎn)品生產(chǎn)周期長,易出現(xiàn)雜菌污染,導(dǎo)致泡椒肉質(zhì)軟化等質(zhì)量問題。脆度是衡量泡椒肉質(zhì)軟化程度的重要指標(biāo)之一,對泡椒感官品質(zhì)、風(fēng)味特征有著至關(guān)重要的作用。對于硬度的測定,目前最常見的方法是手持硬度計。咔唑法也是果實硬度測定的常用方法,它通過測定果實中的果膠含量,從而間接地反映果實硬度,但是該方法測定時間長,步驟繁瑣。而質(zhì)構(gòu)測定是定義和控制食品物理特性的測定分析技術(shù),該測定方法能提供客觀的分析結(jié)果,越來越多的被用于食品領(lǐng)域[3]。有很多利用質(zhì)構(gòu)儀測定食品脆度的研究報道[4-5]。國外已經(jīng)有使用質(zhì)構(gòu)儀對辣椒的質(zhì)構(gòu)進(jìn)行分析的研究報道,研究中多選用直徑較小的探頭進(jìn)行穿刺實驗[6-7]。食品感官評價是在食品行業(yè)中相當(dāng)普及的一種經(jīng)典品質(zhì)評價方法[4],其結(jié)果通常被認(rèn)為最能真實反映消費(fèi)者的感受,因而被廣泛用于食品研究中。本實驗通過不同測定方法對泡椒硬度進(jìn)行測定,并與感官評價結(jié)果進(jìn)行對照,為獲得泡椒硬度最適測定方法提供理論依據(jù)。
典林小米辣(A)、民間1袋風(fēng)味泡椒(B)、佳仙小米辣(C)、東古野山椒(D)、典林小紅美人椒(E)市售泡椒;濃硫酸 優(yōu)級純;半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品 FLUKA公司;95%乙醇、咔唑 化學(xué)純。
TA.XT plus物性測試儀 英國Stable Micro System有限公司;FHM-1果實硬度計 日本Takemura Electric Works有限公司;DK-98-11K電熱恒溫水浴鍋 天津泰斯特儀器有限公司;TDL-40B型臺式離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;TU-1810紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。
1.2.1 手持硬度計法 選用圓錐型探頭(基部直徑12mm,高10mm),對泡椒果肉進(jìn)行穿刺阻力實驗。
1.2.1.1 穿刺方向由外到內(nèi) 用硬度計穿刺泡椒的頭部(靠近梗蒂部分)、中部(泡椒直徑最大處)、尖部進(jìn)行硬度測定,探頭刺破果肉時讀數(shù):硬度=(頭部硬度+中部硬度+尖部硬度)/3。
1.2.1.2 穿刺方向由內(nèi)到外 將泡椒剖開后,剪成1cm×1cm大小的片狀,固定辣椒片,用手持硬度計由內(nèi)部果肉向外表皮穿刺,探頭刺破表皮時讀數(shù)。
1.2.2 質(zhì)構(gòu)儀測定法
1.2.2.1 測試參數(shù)設(shè)置 選用A/CKB輕刀片探頭,承重平臺為HDP/90,操作模式選擇壓縮返回模式,測試前速度2.00mm/s,測試速度2.00mm/s,測試后速度10.00mm/s,下壓程度98%,觸發(fā)力10g。
1.2.2.2 泡椒縱切實驗 挑選大小一致、去除蒂梗的泡椒作為測試對象,把泡椒置于刀口的豎直正下方,用A/CKB輕刀片探頭執(zhí)行向下剪切測試,測得縱切最大剪切力Fmax,縱切表皮破裂距離,縱切表皮所做功(縱切表皮所作功=縱切最大剪切力×縱切表皮破裂距離),每個樣品重復(fù)測定5次,結(jié)果取平均值。
1.2.2.3 泡椒橫切實驗 挑選大小一致、去除蒂梗的泡椒作為測試對象,把泡椒整體長度的1/2處橫放于刀口的正下,用A/CKB輕刀片探頭執(zhí)行向下剪切測試,測得橫切最大剪切力Fmax,橫切表皮破裂距離,橫切表皮所作功(橫切表皮所作功=橫切最大剪切力×橫切表皮破裂距離),每個樣品重復(fù)測定5次,結(jié)果取平均值。
當(dāng)?shù)镀佑|到樣品并感應(yīng)到10g的觸發(fā)力時,刀片開始剪切,可以明顯的觀察到力的快速增加,一旦切破泡椒表皮就會出現(xiàn)第一個波峰,并伴隨“啪”的破裂聲,而力迅速下降。泡椒表皮破裂后,刀片繼續(xù)剪切樣品內(nèi)層(泡椒內(nèi)腔有辣椒籽,剪切辣椒籽會產(chǎn)生相應(yīng)數(shù)量的波峰),下壓到98%時,剪切過程結(jié)束。測試完成后,通過MACRO程序分析獲得所需數(shù)據(jù)(如:表皮剪切強(qiáng)度,表皮破裂距離),圖中陰影部分面積表示所作剪切功。
表1 繪制半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)曲線試劑添加量Table 1 The addition of reagent for drawing galacturonic acid standard curve
1.2.3.1 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 將1mg/mL半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)液按表1的添加量分別注入100mL容量瓶中,用去離子水定容,搖勻待用。取上述定溶液各1mL,與0.5mL 0.1%(w/v)咔唑-乙醇溶液于比色管中反應(yīng)出現(xiàn)白色絮狀沉淀后,加入6mL濃硫酸,立刻將比色管放入85℃水浴里恒溫反應(yīng)5min,冷卻至室溫,測定其在530nm處的吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.2.3.2 果膠的提取 稱取1g辣椒組織樣品,置于研缽中研磨成勻漿,轉(zhuǎn)入到50mL刻度離心管中,加入25mL 95%乙醇,在85℃加熱30min,以除去樣品中糖分及其他物質(zhì)(注意在煮沸過程中要及時補(bǔ)加95%乙醇溶液,使體積保持在25mL)。取出冷卻至室溫后,8000r/min離心15min,棄去上清液,再加入95%乙醇,在沸水浴上加熱30min,如此重復(fù)3~5次。用5% α-萘酚的乙醇溶液對上清液中糖分殘留進(jìn)行檢測,以完全除去糖分[9]。制備出的果膠沉淀用5mL 1mol/L NaOH溶液轉(zhuǎn)入100mL容量瓶,用去離子水定容待測。
1.2.3.3 測定 吸取1mL提取液,加入到25mL刻度試管中,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作步驟進(jìn)行測定。重復(fù)三次,求平均值。
1.2.3.4 結(jié)果計算 根據(jù)溶液吸光度值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的半乳糖醛酸質(zhì)量,計算辣椒組織中果膠含量(以生成半乳糖醛酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)表示)。計算公式:
式中:m'-從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的半乳糖醛酸質(zhì)量,μg;V-樣品提取液總體積,mL;Vs-測定時所取樣品提取液體積,mL;m-樣品質(zhì)量,g。
1.2.4 感官評定 由10位專業(yè)人士組成評分小組,根據(jù)泡椒的咀嚼感、色澤、多汁性、風(fēng)味等指標(biāo)進(jìn)行綜合評分,取其平均分為總感官評分(百分制),感觀評分標(biāo)準(zhǔn)見表2。
圖1 泡椒剪切測試典型分析圖Fig.1 Cut test typical analytical curve of pickled pepper
采用Texture Exponent 32軟件對質(zhì)構(gòu)儀測定結(jié)果進(jìn)行圖表和數(shù)據(jù)分析,采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行皮爾遜相關(guān)分析(Pearson correlation analysis)。
1.2.3 咔唑法
手持硬度計穿刺待測泡椒的硬度結(jié)果如表3所示。穿刺方向由外向內(nèi)測試結(jié)果顯示5個樣品的硬度大小為:D>C>A>B>E,而穿刺方向由內(nèi)向外測試結(jié)果顯示5個樣品的硬度大小為:A>D>C>B>E,結(jié)果差異的原因可能是受到辣椒表皮蠟質(zhì)層的干擾。
表3 泡椒硬度Table 3 The hardness of pickled pepper
表4 質(zhì)構(gòu)儀測試結(jié)果Table 4 The results of texture analyzer test
利用質(zhì)構(gòu)儀對泡椒的硬度進(jìn)行測定,測定模式和具體操作方法按照1.3.2所述。測定結(jié)果如表4所示。
結(jié)果顯示,剪切方式不一樣,各樣品相關(guān)特性除了表皮剪切強(qiáng)度的大小表現(xiàn)出一致性外,其余剪切參數(shù)的大小是有差異的。剪切模式為縱切時,各樣品表皮剪切強(qiáng)度的大小是:C>B>A>E>D,表皮破裂距離的大小為:C>D>B>A>E,剪切表皮所用功的大小為:C>B>A>D>E。剪切模式為橫切時,各樣品表皮剪切強(qiáng)度的大小是:C>B>A>E>D,表皮破裂距離的大小為:C>A>B>D>E,剪切表皮所用功的大小為:C>B>A>E>D。
2.3.1 半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 按1.3.3.1中所述方法測定并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。曲線方程為:y=0.0081x+0.0146,R2=0.9971。
2.3.2 咔唑法測定泡椒硬度結(jié)果 利用咔唑法對待測樣品的果膠含量進(jìn)行了測定,各樣品的果膠含量如圖2所示。結(jié)果顯示,樣品組織中果膠含量的大小為:E>C>D>A>B。有文獻(xiàn)報道[8],果蔬表皮中果膠含量與硬度大小有著直接關(guān)系。所以5種樣品泡椒的硬度大小也為:E>C>D>A>B。
根據(jù)泡椒的咀嚼感、色澤、多汁性、風(fēng)味等指標(biāo),對不同待測泡椒進(jìn)行綜合評分。結(jié)果如表5所示。從表中可以看出,樣品C的咀嚼感最好,評定得分為46分,樣品A、B和E的咀嚼感評定得分相差不大,分別為34、33.2、34.6分,而樣品D的咀嚼感最差得分為27.8分;樣品C的總體得分最高為85.2分,各樣品感官總體評分大小為:C>B>E>A>D。感官評定是對產(chǎn)品綜合品質(zhì)的全面考量,更能代表消費(fèi)者對于產(chǎn)品的直觀感受。
圖2 果膠含量Fig.2 The content of pectin
表5 泡椒感官評分結(jié)果Table 5 The sensory score result of pickling pepper
2.5.1 感官評分結(jié)果與手持硬度計測定結(jié)果的相關(guān)性 用5種樣品感官評分結(jié)果的平均值與手持硬度計測定結(jié)果的平均值進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析,得到相關(guān)系數(shù)如表6所示。
表6 感官評價結(jié)果與手持硬度計測定結(jié)果相關(guān)系數(shù)表Table 6 Correlation of handheld hardness tester test and sensory evaluation results
從表6中可看出,手持硬度計的兩種穿刺方法所得結(jié)果與感官評分之間都呈負(fù)相關(guān),且不顯著。因此,通過手持硬度計測定泡椒硬度代表性不強(qiáng)。
2.5.2 感官評分結(jié)果與質(zhì)構(gòu)儀測定結(jié)果的相關(guān)性用5種樣品感官評分結(jié)果的平均值與質(zhì)構(gòu)儀測定結(jié)果的平均值進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析,得到相關(guān)系數(shù)如表7所示。
表7 感官評價結(jié)果與質(zhì)構(gòu)儀測定結(jié)果相關(guān)系數(shù)表Table 7 Correlation of texture analyzer test and sensory evaluation results
結(jié)果顯示,利用質(zhì)構(gòu)儀對泡椒硬度測定中,縱切表皮剪切強(qiáng)度和橫切表皮所用功都與感官評定結(jié)果在0.05水平上呈現(xiàn)出顯著正相關(guān)。因此,通過質(zhì)構(gòu)儀剪切模式測試中的縱切表皮強(qiáng)度以及橫切表皮所用功表征泡椒的硬度特性是可行的。
2.5.3 感官評分結(jié)果與咔唑法測定結(jié)果的相關(guān)性用5種樣品感官評分結(jié)果的平均值與咔唑法測定結(jié)果的平均值進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析,得到相關(guān)系數(shù)如表8所示。
表8 感官評價結(jié)果與咔唑法測定結(jié)果相關(guān)系數(shù)表Table 8 Correlation of carbazole method test and sensory evaluation results
結(jié)果顯示,利用咔唑法測定泡椒組織果膠含量的結(jié)果與感官評分結(jié)果呈負(fù)相關(guān),但不顯著,因此利用果膠含量判定泡椒硬度缺乏代表性,這可能是泡椒在泡制過程中表皮的高度纖維化造成的。
本實驗分別利用了手持硬度計、質(zhì)構(gòu)儀以及咔唑法對泡椒硬度進(jìn)行測定,并對各種方法測定結(jié)果與樣品感官評分進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析,以探討泡椒硬度測定的最優(yōu)方法。綜上,可得出以下幾個結(jié)論:
3.1 手持硬度計一直被廣泛用于果蔬硬度測定,操作快速簡單,但由于泡椒表皮被蠟質(zhì)層包裹,內(nèi)層中空,導(dǎo)致該方法測定數(shù)據(jù)波動大,其結(jié)果與感官評定結(jié)果呈不顯著負(fù)相關(guān),因此,該方法用于表征泡椒硬度可行性差。
3.2 目前咔唑法測定泡椒硬度還鮮有報道,實驗結(jié)果表明,利用這一方法測定泡椒硬度,其結(jié)果與感官評定沒有顯著相關(guān)性。因此,咔唑法測定果膠含量表征泡椒硬度可行性不強(qiáng)。
3.3 質(zhì)構(gòu)儀越來越多的應(yīng)用于物料特性的分析測定,能具體直觀的表征物料的物理特性。實驗結(jié)果顯示,利用質(zhì)構(gòu)儀剪切模式對泡椒硬度測定的縱切表皮剪切強(qiáng)度和橫切表皮所用功與感官評定結(jié)果呈正相關(guān),且相關(guān)性顯著。說明利用質(zhì)構(gòu)儀表征泡椒硬度特性是比較科學(xué)的。
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