謝家濱

(深圳市松崗人民醫(yī)院婦產科，廣東 深圳 518105)

缺氧誘導因子-1α在前置胎盤患者胎盤組織中的表達及意義

謝家濱

(深圳市松崗人民醫(yī)院婦產科，廣東 深圳 518105)

目的 研究缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)在前置胎盤患者胎盤組織中的表達，探討其在前置胎盤發(fā)病及病理生理過程中的作用。方法采用免疫組化法檢測并比較前置胎盤患者及正常孕婦的胎盤組織中HIF-1 α的表達情況。結果前置胎盤孕婦組胎盤HIF-1α陽性表達率為73.33%(22/30)，光密度值平均為(2 02.87± 18.54)，均明顯高于正常孕婦組水平[HIF-1α陽性表達率為23.33%(7/30)，光密度值平均為(118.51±10.62)]，差異均具有極顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。結論HIF-1α在前置胎盤患者胎盤組織中表達明顯升高，有可能成為前置胎盤早期診斷的重要指標。

前置胎盤；缺氧誘導因子；表達

前置胎盤是妊娠晚期陰道流血的第一位病因，如處理不當可危及母兒的生命安全。缺氧誘導因子(HIF)是哺乳動物和人類在缺氧環(huán)境下產生的一種特殊的細胞因子，具有在缺氧條件下穩(wěn)定，但在正常氧條件下可被水解的特點[1]。目前國內尚未有HIF與前置胎盤相關的報道。本研究采用免疫組化法檢測前置胎盤患者及正常孕婦胎盤組織的缺氧誘導因子-1α (HIF-1α)的表達，以探討其在前置胎盤發(fā)病及病理生理過程中所起到的作用，并為臨床上前置胎盤的診治提供一定的參考價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年4月至2011年7月在我院婦產科行剖宮產術的孕產婦合并前置胎盤患者30例，均為初產婦，年齡21～33歲，平均(27±4.2歲)，孕周35～42周，平均(37±2.1)周，均符合《婦產科學》第7版中前置胎盤的診斷標準[2]。選取同期我院婦產科正常孕產婦30例作為對照組，均為初產婦，年齡22～35歲，平均(26±5.4歲)，孕周36～42周，平均(38±1.2)周。兩組產婦均無肝腎疾病、糖尿病、原發(fā)性高血壓及其他心血管疾病史，兩組孕產婦的年齡、孕周等基礎資料比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 標本收集處理方法 在胎盤娩出后，立即在位于臍帶附著部對側母體面的胎盤中央帶位置取兩條胎盤組織(大小約1 cm×1 cm×1 cm)，一條用10%的甲醛溶液中固定，石蠟包埋切片；另一條胎盤組織放置于-70℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 免疫組織化學方法 采用SP法，取鼠抗人單克隆抗體NF2κB p65濃縮液(工作濃度1：300，購于Santa Cruz公司)和鼠抗人單克隆抗體HIF-1α濃縮液(工作濃度1:50，購于博士德公司)，顯色使用PV29000試劑盒和DAB(購于中杉金橋生物技術公司)。操作步驟及使用方法按照產品說明書進行。在光鏡下觀察細胞質內呈現(xiàn)不同程度的棕黃色或棕褐色粗大顆粒反應情況。

1.2.3 陽性判斷標準[3]在視野中隨機選取5個鏡頭來評價，將細胞核著色列為陽性，如果細胞核、細胞漿都著色，則根據細胞核著色作為標準：無著色者為0分，淡黃色者為1分，棕黃色者為2分，棕褐色者為3分；將細胞陽性率＜5%記為0分，5%～25%記為1分，26%～50%記為2分，5I%～75%記為3分，＞75%記為4分，兩項結果相加得總分，以≤2分判為陰性，≥3分判為陽性。圖像采集分析使用Image8000彩色圖像分析儀進行，每張免疫組化切片中隨機選取5個高倍視野(40倍)，根據陽性區(qū)進行平均光密度分析，結果為其平均值水平。

1.3 統(tǒng)計學方法 使用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件，計量資料采用均數±標準差表示，均數比較采用t檢驗，率的比較采用χ2檢驗，均以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

前置胎盤組HIF-1α陽性表達率與光密度值均明顯高于正常對照組水平，差異均具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，見表1。

表1 兩組孕產婦胎盤HIF-1α表達情況的比較[例(%)]

3 討論

近年來，前置胎盤的發(fā)病率有不斷上升的趨勢，據Yang等[4]的調查顯示，在美國單胎妊娠前置胎盤的發(fā)生率為0.19%，而多胎妊娠其發(fā)生率為0.39%。亞洲女性前置胎盤的發(fā)生率是0.3%～0.5%[5]，國內張瀟瀟等[6]報道前置胎盤的發(fā)生率高達2.08%。前置胎盤的發(fā)病機制尚未完全清楚，目前較為公認的發(fā)病機制包括多次分娩、多次刮宮、產褥感染、子宮瘢痕、盆腔炎等。上述因素共同引起了損傷了子宮內膜，使子宮產生炎癥或者萎縮性病變，可導致子宮蛻膜血管出現(xiàn)缺陷，一旦受精卵著床時血液供給不充分，導致胎盤面積增大(甚至可以增到到子宮下段)以攝取足夠的養(yǎng)分[7]。也可能由于各種原因導致滋養(yǎng)層發(fā)育遲緩，達宮腔時尚未發(fā)育到能著床的階段，因此仍繼續(xù)下行植入子宮下段，胎盤的面積過大使副胎盤位于子宮下段、接近宮口，形成前置胎盤。

缺氧誘導因子是1995年Semenza組在缺氧條件下研究促紅細胞生成素增強子時發(fā)現(xiàn)的，在缺氧條件下廣泛存在于哺乳動物及人體，是目前發(fā)現(xiàn)的唯一一個在缺氧狀態(tài)下發(fā)揮活性的轉錄因子，參與機體對缺氧的反應，調控細胞氧平衡以及誘導表達缺氧基因[8]。其最大的特點是處于正常氧分壓的環(huán)境時性質極不穩(wěn)定，可被快速降解，半衰期約為5～10 min，被認為是一種壽命最短的蛋白質之一。缺氧誘導因子-1由α和β兩個亞基組成，主要依靠HIF-1α來調節(jié)其活性[9]。有研究指出，在妊娠的早期時段，胚胎滋養(yǎng)細胞種植在宮腔內，此時表現(xiàn)為缺血缺氧的狀態(tài)，HIF已有較高的表達水平，這樣可以促使胚胎在低氧的環(huán)境下處于耐受狀態(tài)，使滋養(yǎng)細胞的正常發(fā)育得以進行；但是子宮血管會繼續(xù)增生以增加血供，此時胚胎則緩慢的處于高氧環(huán)境狀態(tài)，HIF表達水平逐步下降[10]。眾多研究已證實，在一些存在缺氧的過程或疾病中，胎盤組織HIF-1α的表達水平增高，并在相應疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起到一定的作用，比如胎盤的形成過程、子癇前期、FGR等[11-13]。本研究首次分析HIF-1α在前置胎盤組織中的表達情況，結果表明，前置胎盤與正常的妊娠胎盤組織相比較，其HIF-1α表達升高明顯。因此，筆者認為HIF在前置胎盤的發(fā)生發(fā)展中起到重要的作用，而HIF-1α有可能會成為前置胎盤早期診斷的一個指標，但需要進一步深入研究明確其機理，為前置胎盤的診斷和治療提供新的思路。

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[7]杜習羽,王 潔,董玉楠.前置胎盤患者產后出血的高危因素分析[J].海南醫(yī)學,2011,22(7):91-93.

[8]幺宏彥,韓小英,遲心左.胎兒宮內窘迫產婦胎盤組織中缺氧誘導因子-1α的表達[J].實用醫(yī)學雜志,2011,27(4):625-627.

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Expression of hypoxia-inducible factor-1α in placental tissues in patients with placenta previa.

XIE Jia-bin.
Department of Obstetrics and Gynaecology,Songgang People’s Hospital of Shenzhen City,Shenzhen 518105,Guangdong, CHINA

ObjectiveTo study the expression of hypoxia-inducible factor-1α(HIF-1α)in patients with placenta previa,and explore the effect in the pathophysiology of placenta previa.MethodsThe expression of HIF-1α was detected in patients with placenta previa(group A)and normal pregnant women(group B)by using immunohistochemistry.Then the results were compared between the two groups.ResultsIn group A,the positive expression rate of HIF-1α was 73.33%(22/30)and the average optical density was(202.87±18.54),significantly higher than those in group B[23.33%(7/30)and(118.51±10.62)],P＜0.01.ConclusionThe expression of HIF-1α in placental tissues in patients with placenta previa was significantly higher than normal,which could serves as an important indicator for the early diagnosis of placenta previa.

Placenta previa;Hypoxia-inducible factor;Expression

R714.56

A

1003—6350(2012)13—037—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.13.016

2012-02-09)

謝家濱(1974—)，女，廣東省深圳市人，主治醫(yī)師，本科。