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        PTCL石蠟組織中HTLV-I感染情況的初步研究

        2012-09-05 10:45:58凡琳琳張英愛王識華
        海南醫(yī)學 2012年13期
        關(guān)鍵詞:病理科石蠟海南省

        凡琳琳,談 順*,饒 翔,張英愛,王識華

        (中南大學湘雅??卺t(yī)院病理科1、中心實驗室2,海南 ???570208;海南省農(nóng)墾三亞醫(yī)院病理科3,海南 三亞 572000)

        ·論 著·

        PTCL石蠟組織中HTLV-I感染情況的初步研究

        凡琳琳1,談 順1*,饒 翔1,張英愛2,王識華3

        (中南大學湘雅海口醫(yī)院病理科1、中心實驗室2,海南 ???570208;海南省農(nóng)墾三亞醫(yī)院病理科3,海南 三亞 572000)

        目的檢測外周T細胞淋巴瘤石蠟包埋組織中HTLV-1感染情況以了解外周T細胞淋巴瘤(PTCL)各類型與人類T細胞淋巴瘤病毒Ⅰ型(HTLV-1)的關(guān)系。方法根據(jù)2008年WHO分類法對46例外周T細胞淋巴瘤進行分類,提取外周T細胞淋巴瘤石蠟組織中人基因組DNA,用PCR方法檢測HTLV-1前病毒。結(jié)果收集到的46例外周T細胞淋巴瘤石蠟組織中HTLV-1陽性8例,其中HTLV-1在外周T細胞淋巴瘤,非特殊型(PTCL-U)、NK/T細胞淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL)、成人T細胞淋巴瘤中(ATLL)中HTLV-1的檢出率分別為15%、8%、10%、75%。結(jié)論外周T細胞淋巴瘤存在HTLV-1感染,HTLV-1除與ATLL有密切關(guān)系外,與其他類型外周T細胞淋巴瘤也有一定關(guān)系。

        外周T細胞淋巴瘤;HTLV-1;石蠟包埋組織

        外周T細胞淋巴瘤(Peripheral T cell lymphoma,PTCL)是起源于成熟細胞或稱胸腺后細胞的惡性腫瘤。廣義上的PTCL包括除T細胞淋巴母細胞淋巴瘤/白血病以外的所有T/NK細胞淋巴瘤。外周T細胞淋巴瘤是一組具有很強異質(zhì)性的疾病的總和,其病因尚不清楚,研究發(fā)現(xiàn)與免疫缺陷、病毒感染、基因突變等有關(guān)。近年來人類T細胞淋巴瘤病毒1(Human T cell lymphotropic virus type 1,HTLV-1)與外周T細胞淋巴瘤的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系備受關(guān)注,國內(nèi)外學者幾乎都以患者血液樣本作為實驗材料,罕見應(yīng)用石蠟包埋瘤組織進行研究,為進一步探討外周T細胞淋巴瘤與HTLV-1之間的關(guān)系,我們將收集到的經(jīng)石蠟包埋的46例外周T細胞淋巴瘤依據(jù)2008年WHO分類標準[1]進行分類,并運用PCR方法檢測。

        1 材料與方法

        1.1 材料來源 收集??谑腥嗣襻t(yī)院、海南醫(yī)學院附屬醫(yī)院及農(nóng)墾三亞醫(yī)院病理科自1995-2010年診斷為外周T細胞淋巴瘤的石蠟組織,經(jīng)高年資醫(yī)師閱片并結(jié)合免疫組織化學結(jié)果最終篩選出外周T細胞淋巴瘤46例,并依據(jù)2008年WHO最新分類對所篩選出的外周T細胞淋巴瘤進行分類,HTLV-1陽性的人基因組DNA(廈門大學熊君輝博士提供)作為陽性對照,淋巴結(jié)反應(yīng)性增生石蠟組織作為陰性對照,PCR試劑盒(天根生化科技有限公司),PCR引物合成按參考文獻[2]擴增產(chǎn)物為326 bp(見表1)由生工生物(上海)有限公司合成。

        表1 兩對特異性引物

        1.2 方法

        1.2.1HTLV-1 DNA抽提 石蠟組織DNA抽提參照文獻[3],每例標本在HE切片對照下,選取病變區(qū)域,以消毒刀片挑取約6 mm×3 mm×0.5 mm大小的石蠟組織塊一片,小心置于0.2 ml PCR管中,并加入1×PCR緩沖液(20 mmol/L Tris-HCl,20 mmol/L KCl,pH 9.0)50 μl,以加樣槍頭碎裂組織片。100℃加熱15 min,13 200 r/min離心5 min,吸取蠟層與組織片之間的澄清液作為DNA粗提產(chǎn)物作模板。

        1.2.2HTLV-1前病毒DNA的PCR法檢測 DNA粗提產(chǎn)物8 μl、10×Taq buffer 5 μl、dNTP混合物(2.5 mmol)4 μl、兩種引物各10 μmol/ml、Taq酶(2.5 U/μl)0.5 μl,加水補至50 μl,混勻,石蠟油覆蓋。反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性10 min;94℃30 s,55℃30 s,72℃1 min,35個循環(huán);72℃后延伸7 min。

        1.2.3 PCR產(chǎn)物純化、克隆及測序 取10 μl擴增產(chǎn)物加6×2 μl上樣緩沖液于1.2%瓊脂糖凝膠上電泳(120 V,30 min),對照標志物無誤后,切下特異性條帶,用膠回收試劑盒(天根)回收純化擴增產(chǎn)物,克隆入PGM-T載體(天根),轉(zhuǎn)化大腸桿菌Top菌株。并由本實驗室進行雙向序列測定。

        2 結(jié) 果

        依據(jù)2008年WHO分類,我們所收集到得46例T細胞淋巴瘤具體分類見表2,PCR檢測46例外周T細胞淋巴瘤中HTLV-1陽性8例(占17.39%),不同類型的外周T細胞淋巴瘤中HTLV-1的檢出率不同,在外周T細胞淋巴瘤非特殊型(PTCL-U)、NK/T細胞淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL)、成人T細胞淋巴瘤中(ATLL)中HTLV-1的檢出率分別為15%、、10%、75%。

        表2 外周T細胞淋巴瘤中HTLV-1的檢測(n=46)

        用部分PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果見圖1,在326 bp處有一條清晰的條帶,與陽性對照一致?;厥誔CR產(chǎn)物,克隆入T載體并測序后證實是HTLV-1前病毒DNA的pX區(qū)的部分序列。

        圖1 T細胞淋巴瘤石蠟組織中HTLV-1前病毒PCR檢測的部分結(jié)果

        3 討論

        HTLV-1是人類發(fā)現(xiàn)的第一個逆轉(zhuǎn)錄病毒,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA并整合到人類基因組DNA上,位于pX區(qū)的TAX基因在該病毒的致病過程中發(fā)揮重要作用,主要導致人類T細胞淋巴瘤(ATLL),因此本實驗根據(jù)參考文獻[2]合成了針對TAX部分基因片段的兩對引物。該病毒具有傳染性并呈地域流行,主要流行于日本西南部,在我國的福建和廣東的沿海地區(qū)有局部小流行[4],海南地理及氣候環(huán)境與廣東相似,因而海南是否也存在HTLV-1流行引起關(guān)注。

        本研究通過收集海南省三家醫(yī)院病理科診斷為外周T細胞淋巴瘤的石蠟組織并依據(jù)2008年WHO分類,收集到的46例外周T細胞淋巴瘤中PTCL-U 20例、NK/T細胞淋巴瘤11例、CTCL 11例、ATLL 4例。運用PCR方法檢測到外周T細胞淋巴瘤中HTLV-1前病毒陽性8例(占17.39%)與唐秋萍等[5]對海南省無償獻血人群HTLV-I/II血清抗體陽性率(0%)的調(diào)查相比,說明海南省外周T細胞淋巴瘤的發(fā)生與HTLV-1存在密切關(guān)系。本實驗中ATLL患者的HTLV-1檢出率高達75%,進一步證實了HTLV-1與ATLL的發(fā)病密切相關(guān)。CTCL中HTLV-1感染的發(fā)生率各家報道不一,從0~100%都有[6-9],其相關(guān)性存在爭議,本實驗中CTCL患者的HTLV-1檢出率為10%,與高紅陽等[10]報道的CTCL中HTLV-1的檢出率(10.5%)相近,說明HTLV-1感染與CTCL的發(fā)病可能存在一定關(guān)系。T/NK及PTCL-U與HTLV-1的關(guān)系國內(nèi)還未見報道,不過日本曾有研究發(fā)現(xiàn)28例PTCL-U中HTLV-1陽性的6例[2]。

        總之,以上研究結(jié)果表明HTLV-1除與ATLL發(fā)病密切相關(guān)外,與其他類型的T細胞淋巴瘤也存在一定關(guān)系,本實驗成功提取外周T細胞淋巴瘤石蠟包埋組織中HTLV-I的cDNA,以后我們可以充分利用病理科石蠟組織的資源搜集更多的病例,進一步研究外周T細胞淋巴瘤各類型與HTLV-I的關(guān)系,同時,我們打算建立HTLV-1感染的動物模型,對其具體的致病機制做進一步研究。

        (廈門大學熊君輝博士對本實驗給予了無私的幫助,特此致謝!)

        [1]Dogan A,Gaulard P,Jaffe E,et al.WHO Classification of Tumours of the Haematopoietic and Lymphoid Tissues[S].France:InternationalAgency for Research on Cancer,2008.

        [2]Jun-ichi Miyagi,Takayoshi Toda,Hiroshi Uezato,et al.Detection of epstein-barr virus and human T-Cell lymphotropic virus type 1 in malignant nodal lymphoma,studied in okinawa,a subtropical Area in Japan[J].Int J Hematol,2002,75:78-84.

        [3]江 煒,劉衛(wèi)平,李 雷,等.石蠟包埋組織快速DNA提取方法在診斷病理PCR分析中的應(yīng)用研究[J].四川大學學報(醫(yī)學版), 2007,38(4):709-712.

        [4]宋 蓓,戴啟宇,王 輝.人類T淋巴細胞病毒及其相關(guān)疾病的研究進展[J].實用醫(yī)藥雜志,2009,26(8):73-75.

        [5]唐秋萍,蘇慶元,韓 慧,等.海南省無償獻血人群HTLV-Ⅰ/Ⅱ血清抗體陽性率調(diào)查[J].中國熱帶醫(yī)學,2007,7(11):2164.

        [6]Kikuchi A,Ohata Y,Matsumoto H,et al.Anti HTLV-1 antibody positivecutaneous T-celllymphoma[J].Cancer,1997,79(2): 269-274.

        [7]Ghosh SK,Abrams JT,T erunuma H,et al.Human T-cell leukemia virus type I tax/rex DNA and RNA in cutaneous T-cell lymphoma [J].Blood,1994,84(8):2663-2671.

        [8]Kikuchi A,Nishikawa T,Ikeda Y,et al.Absence of human T-lymphomatropic virus type I in Japanese patient s with cutaneous T-cell lymphoma[J].Blood,1997,89(5):1529-1532.

        [9]Lapis P,Freeman J,Bitter MA,et al.Absence of HTLV-1 DNA sequences in cutaneous T-cell lymphoma/mycosis fungoides[J].Acta-Morphologica Hungarica,1992,40(1-4):249-255.

        [10]高紅陽,單易非,王 平,等.皮膚T細胞淋巴瘤患者的人類T淋巴細胞白血病病毒I型感染[J].復旦學報(醫(yī)學版),2002,29(1): 36-38.

        Primary study of HTLV-1 infection in paraffin-embeded PTCL tissues.

        FAN Lin-lin1,TAN Shun1*,RAO Xiang1, ZHANG Ying-ai2,WANG Shi-hua3.
        Department of Pathology1,Central Laboratory2,the Affiliated Haikou Hospital of Xiangya School of Medicine,Central South University,Haikou 570208,Hainan,CHINA;3.Department of Pathology, Hospital of Agricultural Reclamation of Sanya City,Sanya 572000,Hainan,CHINA

        Objective To study the relationship between Human T cell leukemia virus type-1(HTLV-1) and peripheral T cell lymphoma(PTCL)by detecting the HTLV-1 infection in paraffin-embeded PTCL tissues.MethodsForty-six samples of PTCL were classified according to World Health Organization classification(2008). Genomic DNA extracted from PTCL was detected by PCR for previous DNA of HTLV-1.ResultsEight of the 46 samples showed positive results in the detection of HTLV-1.The detection rate of HTLV-1 was 3/20,1/12,1/10,and 3/4 for peripheral T cell lymphoma-unspecified(PTCL-U),NK/T cell lymphoma,cutaneous T-cell lymphoma(CTCL),and adult T-cell lymphoma(ATLL),respectively.ConclusionHTLV-1 infection is found in patients with PTCL.HTLV-1 may be related to other type of peripheral T cell lymphoma besidesATLL.

        Peripheral T cell lymphoma;HTLV-1;Paraffin-embeded tissues

        R37

        A

        1003—6350(2012)13—001—03

        10.3969/j.issn.1003-6350.2012.13.001

        2012-02-13)

        海南省自然科學基金(編號:808240)

        凡琳琳(1986-),女山東省菏澤市人,醫(yī)師,碩士。

        談 順。E-mail:tsc116@163.com

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