付 林

（玉溪農業(yè)職業(yè)技術學院，玉溪 653106）

1 前 言

酵母培養(yǎng)物作為益生素添加劑中的一類，益生素是一類活微生物制劑，它作為一種新型飼料添加劑，具有無毒、無副作用，以及促進動物生長，提高飼料轉化率，增強動物機體的免疫功能等特點，目前已被廣泛用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)中。而飼料中添加抗生素促進動物生長已有50多年的歷史，對集約化畜牧業(yè)的發(fā)展做出了重大貢獻。隨著人們生活水平的提高和對健康的重視程度不斷加強，人們開始發(fā)現(xiàn)抗生素飼料添加劑在帶來巨大經(jīng)濟效益的背后所隱藏的負面效應，如抗生素引起的內源性感染和二重感染（劉亞力，1999），耐藥性的產生，腸道正常菌群的破壞和畜產品及環(huán)境中的殘留等問題，這些都將對養(yǎng)殖業(yè)、飼料工業(yè)和動物帶來嚴重威脅，進而通過食物鏈危及人類的健康。因此，面對目前土雜雞廣泛的養(yǎng)殖市場及滿足人們生活水平提高對優(yōu)質雞肉的需求。同時，禁止抗生素添加劑在畜牧業(yè)中使用的呼聲越來越高，研究和開發(fā)新的抗生素替代品的工作更加緊迫，益生素的應用前景更為廣闊。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

酵母培養(yǎng)物。

2.2 試驗動物與分組

本試驗用動物為云南省江川縣宏豐養(yǎng)雞場的28日齡脫溫土雜雞200 只，公母各100只，雞群未見任何異常，生產性能良好。將200只雞隨機分為5組，每組公母各20只，即試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組、試驗Ⅳ組和對照組（Ⅴ組）。在試驗組基礎日糧中分別添加酵母培養(yǎng)物0.30%、0.25%、0.20%、0. 15 %，但不加任何抗生素。對照組基礎日糧按照該養(yǎng)殖場配方要求，加入抗生素。試驗設計見表1。

表1 試驗設計

2.3 試驗方法

2.3.1 給對照組、試驗組完全相同的基礎日糧，飼養(yǎng)管理制度及環(huán)境條件。

在試驗組雞的基礎日糧中添加酵母培養(yǎng)物，按試驗設計的添加比例，生產配合飼料。采取自由采食，共給充足引水。

2.3.2 光照制度

堅持采用長時間弱強度的光照原則，即：長時間光照以延長其采食時間，增加其采食量而促進生長；光照強度小，可降低雞的興奮，使雞保持安靜的狀態(tài)。則有利于提高其生長速度和飼料效率。具體光照制度為：光照時間：光照21～23 h/d；光照強度：5LX，即每20 m2安裝1個15 W的燈泡。

2.3.3 試驗期

試驗期分為：預試期和試驗期。其中，預試期為5 d；試驗期為28 d。

2.4 試驗用飼料配方及營養(yǎng)水平

2.4.1 試驗用飼料配方

試驗基礎日糧采用原養(yǎng)殖場日糧配比，試驗組按照試驗設計添加酵母培養(yǎng)物替代原日糧中的抗生素，差額部分用載體等量替代。（見表2）。配方設計以美國NRC飼養(yǎng)標準作為參考。

2.4.2 試驗用日糧的營養(yǎng)水平

表2 飼糧營養(yǎng)水平表

2.5 飼養(yǎng)管理及疾病預防

嚴格執(zhí)行試驗場的飼養(yǎng)管理及疫病防治制度。

表3 土雞參考免疫程序

2.6 測試項目與方法

2.6.1 健康狀況

試驗期間記錄每組試驗雞只的健康狀況，即：球蟲病狀況、雞只新城疫發(fā)病狀況、死亡率等，并記錄好日期以及各組雞只各種癥狀的程度。

2.6.2 新城疫抗體水平測試

本試驗中在雞只48日齡進行雞新城疫Ⅳ系疫苗免疫，在18日后，隨機對每組抽取5只雞于翅膀靜脈采血，使其凝集后取其血清測試其抗體水平。

2.6.3 腸道內容物大腸桿菌和乳酸桿菌數(shù)量計數(shù)

于雞只60日齡每組抽取9只雞，從結腸取內容物約2 g，裝于1.5ML滅菌離心管中，分別測出腸道內容物大腸桿菌和乳酸桿菌數(shù)量。

2.7 統(tǒng)計分析

用SAS6.12軟件包一般線性模型進行方差分析和Duncan多重比較，比較不同處理間的差異。

3 試驗結果

3.1 臨床觀察

試驗組與對照組相比，試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組雞只大小均勻，生長速度較快，羽毛干凈，脫毛很少，外形美觀，腹瀉雞只很少、成活率高，糞便較黑；對照組次之；試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組，雞只大小差異大，羽毛脫落多，腹瀉雞只較多，啄羽明顯，各有2只雞尾部羽毛幾乎被啄光且被啄破而出血，成活率較低。

3.2 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞成活率的影響

表4 試驗期成活率

注：試驗期第1周～第2周無雞只死亡。

從表5亦可以看出，雞只的成活率最高的是試驗組Ⅰ和Ⅱ，最低的是試驗組Ⅳ，試驗組Ⅰ和Ⅱ雞只的成活率均高于對照組，而試驗組Ⅲ和試驗組Ⅳ雞只的成活率均低于對照組雞只的成活率。

3.3 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞健康狀況的影響

從表6可知，在整個試驗期中，試驗組和對照組球蟲癥表現(xiàn)差異不大，只有試驗Ⅱ組發(fā)病率較為明顯的低于其他試驗組和對照組。試驗組Ⅲ和試驗組Ⅳ以及對照組雞只排綠色數(shù)量明顯高于試驗組Ⅰ和Ⅱ以及對照組，而且，死亡雞只中，試驗組Ⅲ和試驗組Ⅳ雞主要表現(xiàn)為腺胃乳頭有出血點，十二指腸出血。

雞新城疫典型的癥狀為：腺胃乳頭有出血點，十二指腸出血，糞便呈綠色或黃綠色。由此，試驗組Ⅲ和試驗組Ⅳ雞只主要為典型的雞新城疫癥狀，明顯高于試驗組Ⅰ和Ⅱ以及對照組。

3.4 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞免疫性能的影響

從表7可以看出，試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ顯著提高了血清中新城疫抗體（HI）水平（P<0.05），但試驗組Ⅲ和試驗組Ⅳ以及對照組在新城疫抗體（HI）水平上無顯著性差異（P>0.05）。

3.5 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞腸道微生物的影響

表7 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞腸道菌群的影響

從表8可以看出，60日齡雞只結腸內菌群受酵母培養(yǎng)物的影響，乳酸桿菌和大腸桿菌均表現(xiàn)出顯著的差異性（P<0.05），試驗組Ⅰ雞只結腸內乳酸桿菌數(shù)量顯著高于試驗組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和對照組；試驗組Ⅰ、Ⅱ雞只結腸內大腸桿菌數(shù)量顯著低于試驗組Ⅲ、Ⅳ和對照組。

4 結果分析討論

4.1 臨床觀察

表5 雞只健康狀況表

表6 酵母培養(yǎng)物對土雜雞新城疫抗體（HI）的影響

在試驗過程中，開始試驗的第1周，各組都有較多的水樣白色絮狀糞便，而且在試驗Ⅳ組有個別雞只腳跛行。在這之前，剛進行了分組、編號、雞舍的消毒以及雞只初重的稱量等工作，對雞造成了不小的應激！應激容易造成雞只代謝機能紊亂，導致尿酸鹽沉積過多而導致雞只排水樣白色絮狀糞便。但是，雞只受應激使尿酸鹽沉積過多，導致跛行，這是否與酵母培養(yǎng)物的添加有關，還有待于進一步研究。

在試驗的第2周，各組雞的啄毛現(xiàn)象很突出，約一周后明顯減少。這與天氣和光照有關，在此期間，天氣呈陰天，氣溫較低，還有小雨，而且雞舍呈半開放式，舍內溫度較低。為給雞只提供適宜的環(huán)境溫度，只好采取了用白質燈來保溫，造成了舍內光照過強，引起了雞只的煩躁不安，使得雞只啄毛現(xiàn)象明顯。

4.2 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞成活率影響

針對試驗過程中雞的死亡率，從雞死亡后解剖癥狀看，其主要表現(xiàn)出了雞新城疫的典型癥狀，試驗組Ⅳ除雞新城疫的典型癥狀外，還有2只表現(xiàn)出了大腸桿菌病癥狀，試驗組Ⅲ除雞新城疫的典型癥狀外，還有一只表現(xiàn)出了沙門氏菌引起的雞白痢癥狀；酵母培養(yǎng)物使用量低的試驗組Ⅲ、Ⅳ死亡率最高。分析其原因，可能與試驗組Ⅲ、Ⅳ日糧中不含常規(guī)使用的促生長抗生素藥物、而且酵母培養(yǎng)物的使用量較低從而影響到了雞只的自身的抵抗力有關；除此之外，可能也與48日齡進行新城疫Ⅳ系疫苗免疫時的環(huán)境條件有關，進行免疫時，天氣氣溫很低，而且還在下雨，這會影響到免疫的效果。另外，酵母培養(yǎng)物使用量多的試驗組Ⅰ和Ⅱ的死亡率最低，對照組的死亡率略低于酵母培養(yǎng)物使用量低的試驗組Ⅲ和Ⅳ的死亡率。此結果表明，使用一定用量的酵母培養(yǎng)物可以降低生長土雜雞的死亡率，對其免疫機能具有積極的作用。

4.3 健康狀況

在整個試驗過程中，雞球蟲病長時間存在，每組每天發(fā)病雞只數(shù)量比較少，而且從表5可以看出，各組球蟲病的發(fā)病狀況沒有明顯的差異。其可能的原因主要是：試驗采取舍內平地放養(yǎng)，雞舍為半開放式（這是我們當?shù)赝岭s雞普遍采用的飼養(yǎng)模式），此類雞舍的特點是：有較好的采光和太陽光的照射，通風好，空氣質量容易控制，但舍內溫度很難控制，而且一遇下雨，雞舍內就難于保持干燥。這就給球蟲的感染創(chuàng)造了有利條件。雞在陰冷潮濕的環(huán)境中容易感染球蟲。另外，由于雞舍面積較小又是平地方養(yǎng)，這就大大限制了雞的活動范圍，雞啄食糞便，這就容易造成重復感染。所以，在試驗過程中，中雞階段每2 d清1次糞和消毒1次，到大雞階段，每天清1次糞和消毒1次，再加上合理使用球蟲藥，球蟲病雖然較長時間的存在，但仍就可以控制，每天只會有極少數(shù)發(fā)病。所以，此結果表明，酵母培養(yǎng)物是否對雞的球蟲病表現(xiàn)出積極的作用，將有待于進一步研究。

4.4 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞免疫性能的影響

此次研究中，從表5可以看出，各試驗組中，試驗組Ⅲ和Ⅳ雞只排綠色糞便的出現(xiàn)次數(shù)明顯高于試驗組Ⅰ和Ⅱ，對照組雞只排綠色糞便的出現(xiàn)次數(shù)也明顯高于試驗組Ⅰ和Ⅱ，與試驗組Ⅲ和Ⅳ很接近。從病理學的角度分析，雞排綠色糞便主要是由于雞的胃受到損傷，導致雞的采食量下降，胃的消化機能明顯下降，胃中的食糜向十二指腸推移的速度明顯減慢，而膽囊中的膽汁排入十二指腸，膽汁只能對少量食糜起作用，之后膽汁也就隨著食糜向后部腸管推移，最后排除體外，也就形成了綠糞，而引起胃損傷的疾病常見的主要是雞新城疫。在從雞只死亡原因看，其主要原因還是由雞新城疫所引起的。最后，從表6對雞新城疫抗體水皮測試可以看出，添加較高劑量的酵母培養(yǎng)物，試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ顯著提高了血清中新城疫抗體（HI）水平，明顯高于對照組和試驗組Ⅲ和Ⅳ。上述三方面的原因說明了試驗組Ⅲ和Ⅳ以及對照組死亡率較高的根本原因，是由于雞體內雞新城疫抗體水平低，容易感染雞新城疫。此結果表明，添加一定量的酵母培養(yǎng)物可以增強育成土雜雞的免疫性能，提高雞對雞新城疫的抵抗力。

4.5 酵母培養(yǎng)物對育成土雜雞腸道微生物的影響

胃腸道是機體獲取營養(yǎng)的門戶，是動物體內的最大器官，需要有大量的營養(yǎng)素用來維持其生存和健康。胃腸道還擁有一個由許多不同微生物組成的龐大群體。在這些細菌中，有些是病菌，如沙門氏桿菌、大腸桿菌和梭狀芽胞桿菌；有些則是有益菌，如乳桿菌和雙歧桿菌，這些細菌在正常情況下處于平衡狀態(tài)，相互抑制，所以，對這個群體進行調整，提高其消化機能，充分發(fā)揮其作用，把這個群體調整為對動物有益是至關重要的。為了維持動物的健康，有效而迅速地吸收各種已消化的營養(yǎng)素至關重要。如果已消化的營養(yǎng)素不能被胃腸道迅速地吸收，它們就將在腸道內被細菌所利用并導致消化紊亂。添加到飼料中的抗生素能夠很容易地將胃腸道內的微生物群體加以調整，但是，抗生素的負面影響已眾所周知，直接影響到畜產品的品質，危害到人類的健康，所以，在不再使用抗生素的情況下，對胃腸道的控制就必須通過營養(yǎng)的手段，即運用含有各種營養(yǎng)因子的功能性添加劑來實現(xiàn)。本研究表明，本研究中酵母培養(yǎng)物，對育成土雜雞腸道微生物區(qū)系有明顯的影響，酵母培養(yǎng)物使用量大的試驗組Ⅰ和Ⅱ的大腸桿菌明顯少于對照組和試驗組Ⅲ和Ⅳ，而酵母培養(yǎng)物使用量大的試驗組Ⅰ乳酸桿菌數(shù)量明顯高于對照組和試驗組Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ?；啬c內每 mm腸絨毛上杯狀細胞數(shù)量，隱窩深度下降。腸道隱窩深度決定腸絨毛通過有絲分裂產生上皮細胞的速度（Hodges，1974）。隱窩深度下降表明上皮細胞更新率下降，更新率的下降是腸道微生物所產毒素濃度下降的結果（Radecki等，1992）。所以補飼酵母培養(yǎng)物可能降低腸道微生物所產毒素的濃度。這可能是酵母培養(yǎng)物可改善育成土雜雞胃腸道中的微生物區(qū)系的部分原因。從而減少消化紊亂的發(fā)生，提高免疫性能，從而降低死亡率，提高成活率。

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