田軍 權(quán)城 王麗彬 宋小海

在臨床實(shí)驗(yàn)中，要求所有項(xiàng)目均應(yīng)該嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)進(jìn)行操作，但實(shí)際工作中由于人為或外界因素，實(shí)驗(yàn)進(jìn)程往往會(huì)受到干擾，對(duì)結(jié)果造成一定影響。促甲狀腺激素(thyroid stimulating hormone，TSH)是判斷甲狀腺功能是否正常的首選指標(biāo)，化學(xué)發(fā)光法因具有快速、準(zhǔn)確、靈敏度高等特點(diǎn)而被臨床普遍接受，但在全自動(dòng)儀器沒(méi)有普及的情況下，試劑加注過(guò)程通常會(huì)有人為因素的存在。底物加注為測(cè)量的最后一步，關(guān)系到最終的檢測(cè)結(jié)果，因此，筆者對(duì)本院部分甲狀腺疾病患者的血液標(biāo)本進(jìn)行了分組研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 試劑 北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的化學(xué)發(fā)光促甲狀腺激素(TSH)定量試劑盒(批準(zhǔn)文號(hào)，國(guó)藥準(zhǔn)字S20040080)。兩個(gè)level質(zhì)控由同一廠家提供。

1.2 儀器 GloRunner化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀(美國(guó)原裝);DEMII型自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)(北京產(chǎn));BL－ZDQ－OA微量振蕩器(北京產(chǎn))。

1.3 檢測(cè) 留取25份甲狀腺疾病患者血液，按不同方式分組，同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。兩個(gè)level質(zhì)控在控，證明本次試驗(yàn)TSH檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 由操作軟件自動(dòng)得出TSH具體數(shù)值，組間差異由于數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，采用秩和檢驗(yàn)，所有結(jié)果均由SPSS 11.5軟件計(jì)算所得。

2 結(jié)果

測(cè)試階段的底物分別為1 h、30 min和10 min前配置，并各自在加注后5 min、10 min、30 min、1 h和 2 h檢測(cè)，得出各組促甲狀腺激素的結(jié)果，其檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

以底物10 min前配置，加注后10 min檢測(cè)為標(biāo)準(zhǔn)組，各分組與其進(jìn)行秩和檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)的部分檢測(cè)結(jié)果如下:底物配置時(shí)間1 h檢測(cè)延遲時(shí)間1 h(P=0.040);底物配置時(shí)間1 h檢測(cè)延遲時(shí)間2 h(P=0.000);底物配置時(shí)間30 min檢測(cè)延遲時(shí)間1 h(P=0.027);底物配置時(shí)間30 min檢測(cè)延遲時(shí)間2 h(P=0.000);底物配置時(shí)間10 min檢測(cè)延遲時(shí)間1 h(P=0.000);底物配置時(shí)間10 min檢測(cè)延遲時(shí)間2 h(P=0.000)。

表1 不同分組下TSH的檢測(cè)結(jié)果中位數(shù)(μIU/ml)

3 討論

TSH是垂體前葉分泌的一種糖蛋白激素，其主要作用是調(diào)控甲狀腺細(xì)胞生長(zhǎng)和甲狀腺激素合成與分泌。甲狀腺功能改變時(shí)，TSH的波動(dòng)較甲狀腺激素更迅速顯著，是反映下丘腦－垂體－甲狀腺軸功能的敏感指標(biāo)。臨床上多用于甲狀腺功能亢進(jìn)(甲亢)和減退(甲減)的診斷、原發(fā)與繼發(fā)性甲減的鑒別診斷、檢測(cè)甲亢和甲減的治療效果、亞臨床甲亢的診斷以及垂體TSH瘤的實(shí)驗(yàn)室診斷等。特別是對(duì)甲低的診斷，其價(jià)值約等于 FT4，好于 TT4、FT3和 TT3。

通過(guò)對(duì)以上數(shù)據(jù)的比較不難看出，測(cè)定促甲狀腺激素時(shí)，加注底物后檢測(cè)延遲時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響是顯著的。本實(shí)驗(yàn)中，所有1 h和2 h檢測(cè)組，其結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。其余分組無(wú)論底物何時(shí)配置(≤1 h)均與標(biāo)準(zhǔn)組較為一致(P＞0.05)。因此，筆者認(rèn)為，在化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)促甲狀腺激素的實(shí)驗(yàn)中，無(wú)論底物何時(shí)配置(≤1 h)，都應(yīng)在底物加注后規(guī)定時(shí)間內(nèi)(≤30 min)進(jìn)行檢測(cè)，否則都將會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響。

筆者所采用的試劑盒，其說(shuō)明書(shū)中關(guān)于底物的內(nèi)容是:“化學(xué)發(fā)光底物液A、B使用前根據(jù)需要量等體積(1∶1)混合，現(xiàn)用現(xiàn)配?！奔啊氨仨氂诩踊瘜W(xué)發(fā)光底物液后的第5～30 min內(nèi)測(cè)量?！闭f(shuō)法較為含糊，不利于標(biāo)準(zhǔn)化操作的執(zhí)行。通過(guò)本次試驗(yàn)，說(shuō)明筆者在測(cè)試中不按操作規(guī)程進(jìn)行，不注重保養(yǎng)及試劑的混勻準(zhǔn)備，其結(jié)果的偏差顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定敏感度高，甚至超過(guò)放射免疫分析。操作上的微小誤差也會(huì)導(dǎo)致結(jié)果上的偏離［1］。因此，筆者認(rèn)為應(yīng)該嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)去做，選擇適當(dāng)?shù)牡孜锱渲脮r(shí)機(jī)，盡量避免檢測(cè)中系統(tǒng)誤差的出現(xiàn)。

［1］陶義訓(xùn)．免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)［M］．第2版．北京:人民衛(wèi)生出版社，1997:174．