李文峰 張慧晶

目前，非典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamouscells,ASC）是指鱗狀上皮已經(jīng)增生，并且出現(xiàn)了異型性，包括無(wú)明確診斷意義的非典型的鱗狀上皮細(xì)胞(ASC—US)和不除外高度病變的非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASC—H)[1],其診斷一直沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，各實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞學(xué)醫(yī)生的診斷標(biāo)準(zhǔn)亦有差別，且主觀性強(qiáng)[2]。導(dǎo)致對(duì)ASC的處理意見(jiàn)多樣，根據(jù)2001年美國(guó)陰道鏡和子宮頸病理學(xué)會(huì)（the American Society for Colposcopy and Cervical Pathology,ASCCP）制定的處理指南，提出了3種處理意見(jiàn)：（1）直接行陰道鏡檢查。（2）4～6個(gè)月復(fù)查細(xì)胞學(xué)。（3）行高危型HPV DNA檢測(cè)，陽(yáng)性者行陰道鏡檢查，陰性者6～12個(gè)月復(fù)查細(xì)胞學(xué)。但由于我國(guó)宮頸病發(fā)病率高，本地區(qū)經(jīng)濟(jì)欠佳，隨訪條件受到制約等原因，我們嘗試對(duì)ASC的病人進(jìn)行DNA定量分析系統(tǒng)檢測(cè)，取得了較好的效果，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2008年6月～2010年11月湖北省鐘祥市計(jì)劃生育服務(wù)站檢測(cè)出的ASC病例60例，其中意義不明的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS，atypical squamous cells of undetermined significance）52例，非典型鱗狀上皮內(nèi)病變，不排除高度病變（ASC-H,atypical squamous cells,cannot exclude hig-grade squamous intraepithelial lesion）8例。年齡20～53歲，平均年齡34歲。

1.2 方法

1.2.1 器材 SPICM-DNA型全自動(dòng)細(xì)胞腫瘤篩查分析系統(tǒng)，F(xiàn)euigen染液等。

1.2.2 液基薄層制片及染色 將裝有固定液和刷頭的標(biāo)本收集管，加入0.1%DTT消化液放在震蕩器上震蕩2小時(shí)，然后將消化后的細(xì)胞懸液離心5分鐘（1000轉(zhuǎn)/分），棄上清液后，加50%酒精分別清洗、離心兩次（1000轉(zhuǎn)/分，5分鐘/次）。然后將用固定液稀釋的細(xì)胞混懸液，放入細(xì)胞涂片離心機(jī)甩片5分鐘，每例制成1張薄層細(xì)胞學(xué)片，進(jìn)行FeulgenDNA染色做DNA定量測(cè)定。

1.2.3 細(xì)胞DNA定量分析 SPICM-DNA型全自動(dòng)細(xì)胞腫瘤篩查分析系統(tǒng)根據(jù)不同細(xì)胞成分所具有的不同特征參數(shù)來(lái)完成自動(dòng)細(xì)胞分類和計(jì)數(shù)過(guò)程，標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照細(xì)胞為同張玻片上的100個(gè)正常上皮細(xì)胞，所測(cè)出的平均光密度（IOD,Intergrated Optical Density）為2C的參考值，其CV（Coefficient of Variation）值小于5%。

根據(jù)SPICM-DNA型全自動(dòng)細(xì)胞腫瘤篩查分析系統(tǒng)所做的細(xì)胞DNA倍體分析結(jié)果及處理方法有如下三種情況：⑴正常2C細(xì)胞為主，未見(jiàn)異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰，建議一年復(fù)查。⑵出現(xiàn)DNA指數(shù)（D1）大于2.5細(xì)胞及DI在1～2之間的細(xì)胞數(shù)超過(guò)被測(cè)細(xì)胞總數(shù)的10%，建議病理活檢。⑶出現(xiàn)異倍體細(xì)胞峰及大量D1大于2.5的細(xì)胞，建議病理活檢。

1.2.4 病理診斷 對(duì)60例ASC病例均在陰道鏡下對(duì)宮頸可疑部位進(jìn)行組織活檢。病理診斷報(bào)告為：正常、宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變CINI級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)或原位癌及浸潤(rùn)癌。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 以宮頸活檢病理診斷結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)DNA定量分析系統(tǒng)篩查ASC中宮頸癌及癌前病變的敏感性、特異性。敏感性（%）=[真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性）]×100%，特異性（%）=[真陰性/（真陰性+假陽(yáng)性）]×100%。

2 結(jié)果

DNA定量分析系統(tǒng)用于非典型磷狀細(xì)胞篩查結(jié)果如下：

在52例ASCUS患者中，DNA定量分析系統(tǒng)檢測(cè)異常36例，病理組織活檢異常（包括CINI、CINⅡ、CINⅢ或原位癌及浸潤(rùn)癌）符合34例，DNA定量分析系統(tǒng)檢測(cè)假陰性1例，假陽(yáng)性2例。敏感性為97.1%，特異性為90.0%。

在8例ASC-H患者中，DNA定量分析系統(tǒng)檢測(cè)異常6例，病理組織活檢異常（包括CINI級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)或原位癌及浸潤(rùn)癌）符合6例。DNA定量分析系統(tǒng)檢測(cè)無(wú)漏診，假陽(yáng)性1例。其敏感性為100%，特異性為66.7%。

3 討論

宮頸癌是最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，在女性惡性腫瘤中位居第二位，占癌癥患者總數(shù)的15%，嚴(yán)重威脅女性的健康，每年有371200個(gè)新發(fā)病例，約200000例死亡。特別是在經(jīng)濟(jì)水平低下以及缺乏宮頸腫瘤普查手段的發(fā)展中國(guó)家，宮頸癌發(fā)病率更高[3]。現(xiàn)在降低宮頸癌病死率的最有效手段依然是早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療，故準(zhǔn)確地檢測(cè)出宮頸癌前病變顯得尤為重要。在宮頸癌前病變中，ASC是一類不能明確診斷為無(wú)上皮內(nèi)病變及惡性改變（negative for intraepithelial lesion or malignancy，NILM）和鱗狀上皮內(nèi)病變（squamous intraepithelial lesion，SIL）的一類細(xì)胞。有研究資料表明，ASC中真正低于CIN的病變僅占40%，半數(shù)以上病例為CIN與癌，其中高級(jí)別病變與癌在ASC-US和ASC-H中的比例分別達(dá)18.68%與33.3%[4]。由于受到感染、變性改變、炎癥刺激、可能存在癌細(xì)胞、出現(xiàn)風(fēng)干現(xiàn)象以及實(shí)驗(yàn)室在染色和制片技術(shù)上的差別等原因，ASC的診斷標(biāo)準(zhǔn)一直難以統(tǒng)一；2001年TBS（The Bethesda System，TBS）系統(tǒng)更新，將ASC分為ASCUS和ASCH[5],但細(xì)胞學(xué)醫(yī)生對(duì)它并不能作出準(zhǔn)確并可重復(fù)性的判讀。而對(duì)ASC的處理，ASCCP作出了明確的說(shuō)明，但受到經(jīng)濟(jì)條件、隨訪條件等原因的影響，而DNA定量分析系統(tǒng)能夠解決這些問(wèn)題，它不需要長(zhǎng)時(shí)間的隨訪，也不需要對(duì)病人再行宮頸部位的各種檢查，且準(zhǔn)確性和特異性均較好。

在ASCUS檢查中出現(xiàn)的1例假陰性，系統(tǒng)只掃描出2027個(gè)細(xì)胞，且炎癥細(xì)胞比例占62%，固縮核細(xì)胞比例占15%，可供分析的細(xì)胞只占23%?？赡苁欠治黾?xì)胞數(shù)目過(guò)少導(dǎo)致儀器沒(méi)檢測(cè)出。而出現(xiàn)的2例假陽(yáng)性，其中1例有口服避孕藥史，另1例經(jīng)檢查，維生素B12低于正常參考范圍，而口服避孕藥、維生素B12缺乏等因素，均可影響細(xì)胞DNA異常。在判讀為ASC-H的患者，提示潛在的CINⅡ或CINⅢ，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)價(jià)值較ASC-US更高，但比明確診斷為HSIL預(yù)測(cè)CINⅡ或更嚴(yán)重病變的價(jià)值要低[6-7]。此次在ASC-H中出現(xiàn)的1例假陽(yáng)性為老年女性，宮頸萎縮，可能因該患者年齡偏大（53歲），激素水平紊亂導(dǎo)致核改變有關(guān)。

總之，DNA定量分析系統(tǒng)用于ASC的檢測(cè)中，不管是敏感性還是特異性均較好。用該方法進(jìn)行檢測(cè)值得嘗試。

此次分析病例數(shù)較小，下次將在更大群體和更廣的范圍中進(jìn)行。但DNA定量分析系統(tǒng)用于ASC患者檢查，可以使ASC的病變更明確；結(jié)合本單位實(shí)際，對(duì)ASC患者的處理，在征得患者理解的前提下，進(jìn)行DNA定量分析系統(tǒng)檢測(cè)，結(jié)果異常者，進(jìn)行宮頸組織活檢；結(jié)果正常者1年復(fù)查。

[1]劉君芬.TCT結(jié)合HR-HPV檢測(cè)在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2008,14（11）：55.

[2]馬博文.子宮頸細(xì)胞病理學(xué)診斷圖譜[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2008：90-101.

[3]常玉梅,蔣旭東,鄭娜,等.宮頸癌前病變研究進(jìn)展[J].河北醫(yī)藥,2010,32(9):1136-1138.

[4]張新瑩,郭東輝,張小晶,等.宮頸細(xì)胞涂片中的非典型鱗狀細(xì)胞與低度鱗狀上皮內(nèi)病變[J].診斷病理學(xué)雜志,2006,13(6):407-409.

[5]Boulanger JC,Sevestre H,ASCUS:an update[J].Gynecol Obstet Fertil,2006,34(1):44-48.

[6]Quddus MR,Sung CJ,Steinhoff MM,et al.A typical squamous metaplastic cell:reproducibility,outcome,and diagnostic features on Thinprep Pap test[J].Cancer Cytopathol,2001,93,(1):16-22.

[7]Sherman ME,Solomon D,Schiffman M (for the ALTS Group).Qualification of ASCUS.A comparison of equivocal LSIL and equivocal HSIL cervical cytology in the ASCUS LSIL Triaye Study[J].Am J Clin Pathol,2001,116(3):386-394.