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        VEGF和MMP-2在食管癌中的表達及其意義探討

        2012-08-15 00:51:36趙林韓彪劉健馬敏杰魏寧
        衛(wèi)生職業(yè)教育 2012年12期
        關(guān)鍵詞:陽性細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞食管癌

        趙林,韓彪,劉健,馬敏杰,魏寧

        VEGF和MMP-2在食管癌中的表達及其意義探討

        趙林1,韓彪2,劉健2,馬敏杰2,魏寧2

        (1.臨洮縣中醫(yī)院,甘肅臨洮730500;2.蘭州大學(xué)第一醫(yī)院,甘肅蘭州730000)

        目的探討VEGF和MMP-2在食管癌中的表達及其臨床病理意義。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法,檢測58例食管癌患者手術(shù)切除標(biāo)本中VEGF和MMP-2的表達。結(jié)果食管癌組織中VEGF表達率分別為60.3%(35/58),MMP-2表達率為79.3%(46/58)。VEGF和MMP-2的表達分別與食管癌浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期密切相關(guān),而與組織類型和分化程度無關(guān)。結(jié)論VEGF和MMP-2的協(xié)同表達在食管癌浸潤和轉(zhuǎn)移中起重要作用,可作為反映食管癌進展的生物學(xué)指標(biāo)。

        食管腫瘤;血管內(nèi)皮生長因子;基質(zhì)金屬蛋白酶-2

        許多研究提示,腫瘤組織內(nèi)的血管生成與腫瘤生長和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本文應(yīng)用免疫組化法檢測58例食管癌患者手術(shù)切除標(biāo)本中血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)的表達變化,探討其在食管癌發(fā)展過程中的的作用以及與食管癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。

        1 材料與方法

        1.1 標(biāo)本

        收集蘭州大學(xué)第一醫(yī)院胸外科2006年12月至2010年1月間臨床資料完整的手術(shù)切除食管癌標(biāo)本58例?;颊吣挲g36~ 70歲,平均年齡57.3歲,男性45例,女性13例。所有患者術(shù)前均未接受化療、放療或其他針對腫瘤的治療,均在全麻下行食管癌根治術(shù),術(shù)后病理均為食管癌,其中鱗癌46例、腺癌12例;癌組織分級G113例,G225例,G320例;UICC臨床分期:Tis2例,T12例,T218例,T333例,T43例;NO26例,N132例;M057例,M11例。14例正常食管組織取自食管切除斷段,距瘤緣10 cm,均經(jīng)病理證實為正常組織。所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林液固定,常規(guī)石蠟包埋,制備成4~6μm厚度的連續(xù)切片,備染HE、原位雜交和免疫組織化學(xué)。

        1.2 主要試劑

        鼠抗人VEGF單克隆抗體,鼠抗人MMP-2單克隆抗體,即用型免疫組化染色S-P試劑盒(福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司)。

        1.3 方法

        免疫組織化學(xué)染色:采用常規(guī)S-P法,切片經(jīng)脫蠟和水化后,組織抗原微波修復(fù),10%羊血清封閉,滴加一抗,4℃過夜后加入生物素標(biāo)記的二抗,室溫孵育10 min,滴加鏈親和素—過氧化物酶溶液,室溫孵育10 min,各步驟間以PBS沖洗,5 min連續(xù)3次。DAB顯色后脫水、透明、封片。用PBS代替一抗體為陰性對照,用邁新公司提供的胃癌、乳腺癌和食管癌陽性片作為VEGF、MMP-2陽性對照。

        1.4 結(jié)果判斷

        1.4.1 VEGF結(jié)果判斷免疫組織化學(xué)染色按照Kitadai等[1]的評分標(biāo)準(zhǔn),以胞漿或胞膜染成棕黃色為陽性細(xì)胞,選擇染色均勻的癌間質(zhì)區(qū),在高倍視野下,以著色細(xì)胞數(shù)占視野細(xì)胞總數(shù)的百分比劃為:未見陽性細(xì)胞為陰性,陽性細(xì)胞<30%為弱陽性,陽性細(xì)胞≥30%為陽性。

        1.4.2 MMP-2結(jié)果判斷按照封國生等[2]的評分標(biāo)準(zhǔn),以胞漿或胞膜染成棕黃色為陽性細(xì)胞,每例取3個高倍視野,每個高倍視野計數(shù)100個細(xì)胞,未見到陽性細(xì)胞為陰性,陽性細(xì)胞<30%為低表達,≥30%為高表達。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

        應(yīng)用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件處理,計數(shù)資料采用χ2檢驗和Spearman等級相關(guān)分析,計量資料采用t檢驗和方差分析。

        2 結(jié)果

        2.1 VEGF表達與食管癌臨床病理因素之間的關(guān)系

        VEGF蛋白陽性物質(zhì)主要存在于癌細(xì)胞的胞漿內(nèi)和胞膜,其表達有明顯的異質(zhì)性,強陽性表達的癌細(xì)胞常位于浸潤前緣,也有少量成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞等間質(zhì)細(xì)胞表達陽性,正常對照組無陽性表達。其中,VEGF在58例標(biāo)本的陽性表達率分別為60.3%,其陽性表達率均與食管癌組織類型和分化程度無關(guān),而與食管癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期均呈顯著性相關(guān)(分別為P<0.01;P<0.01、P<0.05及P<0.05)。

        2.3 MMP-2表達與食管癌臨床病理因素之間的關(guān)系

        MMP-2陽性物質(zhì)位于癌細(xì)胞的胞漿和大部分間質(zhì)內(nèi),表達程度不一,正常對照組未見陽性表達。其中,MMP-2在58例標(biāo)本的陽性表達率79.3%,兩者陽性表達率均與食管癌組織類型和分化程度無關(guān),而與食管癌浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期均呈顯著性相關(guān)(分別為P<0.05、P<0.01;P<0.05及P<0.05、P<0.01)。

        2.4 VEGF和MMP-2表達的關(guān)系

        58例食管癌組織中,VEGF和MMP-2表達一致的符合率分別為74.1%(43/58)。分析發(fā)現(xiàn),兩種表達結(jié)果之間分別呈顯著性相關(guān)(χ2=8.795,χ2=12.06,均P<0.01)。

        2.5 VEGF與MMP-2的相關(guān)關(guān)系

        經(jīng)Spearman等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),VEGF和MMP-2的表達呈顯著性相關(guān)(r=0.681,P<0.01;r=0.676,P<0.01)。

        3 討論

        侵潤和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要生物學(xué)特征,誘導(dǎo)血管生成是惡性腫瘤生長、侵潤和轉(zhuǎn)移的前提之一。作為調(diào)節(jié)血管生成最主要的生長因子——血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF),其高水平表達與食管癌的形成、生長和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[3]。

        VEGF可直接調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖,是高度特異性的血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂素,最直接參與腫瘤的血管生成,可以增加血管通透性,有利于血漿蛋白、纖維蛋白原外滲,促進血管生成和新基質(zhì)形成[4]。本研究中,我們觀察到VEGFmRNA和蛋白表達與食管癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān),且兩者表達之間呈顯著性正相關(guān)(r=0.929,P<0.01),表明VEGF mRNA和蛋白水平是穩(wěn)定的。國外學(xué)者[1]研究發(fā)現(xiàn)食管組織中VEGF表達與腫瘤的侵潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期密切相關(guān)。郭文忠等[5]研究也證實了上述觀點,并發(fā)現(xiàn)VEGF的表達與食管癌的組織類型和分化程度無關(guān),這些結(jié)果說明VEGF表達與食管癌血管形成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起重要作用。

        MMP是一組鋅離子依賴性內(nèi)肽酶?;|(zhì)金屬蛋白酶具有降解細(xì)胞外基質(zhì)(ExtracellularMatrix,ECM)的作用,也是促進腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成的重要因子之一。MMP-2屬于Ⅳ型膠原酶,降解底物著重是構(gòu)成所有基底膜的主要成分—Ⅳ型膠原,降解產(chǎn)物除了對癌細(xì)胞有化學(xué)趨向性處,還可促進血管形成和腫瘤生長[6]。Koyama等[7]用原位酶譜分析技術(shù)研究了30例食管癌組織,發(fā)現(xiàn)MMP-2在癌巢周邊的間質(zhì)細(xì)胞表達陽性者12例,在癌巢中表達陽性者13例,另外5例在兩者中均有表達,MMP-2的表達與食管癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴管和血管侵犯相關(guān)。王曉峰等[8]對80例食管鱗癌組織、40例正常鱗狀上皮進行VEGF、CD44v6、 MMP-2免疫組化染色分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者陽性表達率相比差異均有顯著性(P<0.05),其在食管癌中的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。本研究結(jié)果表明,食管癌組織中MMP-2mRNA和蛋白在腫瘤細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞等間質(zhì)細(xì)胞均有陽性表達,其陽性率分別為75.9%和79.3%,其表達與食管癌分化程度、組織類型和患者的年齡、性別無關(guān),而與腫瘤的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。mRNA和蛋白表達呈顯著性相關(guān)(r=0.891,P<0.01),說明MMP-2的表達和食管癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

        VEGF和MMP-2的協(xié)同作用,促進了新生血管形成和ECM的降解,從而進一步加速腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。Kurizahi等[9]研究發(fā)現(xiàn)人乳腺癌中活化的MMP-2表達與VEGF有顯著的相關(guān)性,并認(rèn)為VEGF可上調(diào)MMP-2的表達,在血管生成兩者可協(xié)同作用。Lamoreaux等[10]用VEGF處理體外培養(yǎng)的人皮膚微血管內(nèi)皮細(xì)胞,結(jié)果也發(fā)現(xiàn)VEGF可明顯促進內(nèi)皮細(xì)胞增生,并使MMP-2表達明顯增加,而MMP-2抑制劑(TIMP-2)表達則明顯下降,研究認(rèn)為VEGF可通過增加MMP-2分泌和減少TIMP-2對MMP-2抑制作用來調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞源性MMP-2的活性。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),在mRNA和蛋白水平上,VEGF、MMP-2兩者在食管癌中的表達存在著顯著的相關(guān)性(r=0.681,P<0.01;r=0.676,P<0.01),說明兩者的協(xié)同表達在食管癌的侵潤、轉(zhuǎn)移及血管生成中具有非常重要的意義。結(jié)合本研究,我們認(rèn)為在食管癌的浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切中,VEGF可上調(diào)MMP-2的表達,兩者可協(xié)同作用。但這種調(diào)節(jié)的確切分子生物學(xué)機制尚待進一步研究。

        [1]Kitadai Y,Haruma K,Tokutomi T,et al.Significance of vessel count and vascular endothelial growth factor in human esophageal carcinomas[J]. Clin Cancer Res,1998,4(9):2195-2200.

        [2]封國生,譚毓銓.基質(zhì)金屬蛋白酶及Ⅳ型膠原在胃癌中的表達及其意義[J].中華外科雜志,2000(8):775-777.

        [3]Shin CH,Ozawa S,Ando N,et al.Vascular endothelial growth factor expression predicts outcome and lympl node metastasis in squamous cell carcinoma of the esophagus[J].Clin Cancer Res,2000,6(3):1161-1168.

        [4]LinksInda AM,Andrini LB,Garcia MN,et al.Evaluation of angiogenesis with expression of VEGF and CD34 in human non-small cell lung cancer [J].JExp Clin Cancer Res,2007,26(3):375-378.

        [5]郭文忠,冉宇靚,王貴齊,等.VEGF和MMP-9在食管癌中的表達及低氧調(diào)節(jié)[J].中華腫瘤雜志,2002,24(1):44-47.

        [6]楊光華.病理學(xué)[M].第5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001.

        [7]Koyama H,Iwata H,Huwabara Y,et al.Gelationlytic activity ofmatrix metalloproteimase-2 and 9 in esophageal carcinoma;a study using in situ zymography[J].Eur JCancer,2000,36(16):2164-2170.

        [8]王曉峰,薛梅,倪毓輝,等.VEGF、CD44v6、MMP-2在食管癌中的表達及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2008,28(1):110-112.

        [9]Kurizaki T,ToiM,Tominaga T,et al.Relationship between matrixmetalloproteinase expression and tumor angiogensis in human breast carcinomas[J].Oncol Rep.1998,5(3):673-677.

        [10]Lamoreaux WJ,F(xiàn)itzgeald ME,Reiner A,et al.Vascular endothelial growth factor increase release of gelatinase A and dscreases release of tissue inhibitior of metalloproteinases by microvascular endothelial cells in vitro[J].Microvasc Res,1998,55(1):29-42.蕢

        R735.2文獻標(biāo)示碼:A

        1671-1246(2012)12-0110-02

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