舒立云
血細(xì)胞檢驗(yàn)是指對(duì)血液中白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血小板(PLT)、血紅蛋白(HGB)及相關(guān)數(shù)據(jù)的技術(shù)檢測(cè)分析,、也稱血常規(guī)檢驗(yàn)。血常規(guī)檢驗(yàn)不僅是診斷各種血液病的重要依據(jù),而且對(duì)其他系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別也可提供許多重要信息,是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中最常用、最重要的基本內(nèi)容之一。
1.1 檢驗(yàn)人員需要具備系統(tǒng)的理論基礎(chǔ)和專業(yè)水平。在操作儀器前,要對(duì)儀器設(shè)備的原理、性能、操作規(guī)程、使用注意事項(xiàng)、報(bào)警的含義、引起實(shí)驗(yàn)誤差的因素、儀器的維護(hù)、保養(yǎng)、使用方法等了如指掌。
1.2 嚴(yán)把質(zhì)控關(guān),注意患者生理或病理因素造成的實(shí)驗(yàn)誤差,注意工作環(huán)境對(duì)儀器的干擾,嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作,以確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確無(wú)誤。
高質(zhì)量的標(biāo)本是取得準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果的第一步。為了保證血液標(biāo)本中各項(xiàng)細(xì)胞的形態(tài)完整,一定要注意血液細(xì)胞檢驗(yàn)標(biāo)本制備過(guò)程中的幾個(gè)重要環(huán)節(jié)-采集、抗凝,標(biāo)本的稀釋和貯存。
2.1 采血部位的選擇 最常用的是靜脈采血和末梢毛細(xì)血管采血兩個(gè)部位,文獻(xiàn)表明,靜脈血血樣是最為可靠的標(biāo)本。與靜脈血相比,手指血的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性較差:表現(xiàn)為白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯升高(+8%)而血小板計(jì)數(shù)明顯減低(-9%),因此,除少數(shù)不易取得靜脈血的(如新生兒、血液病及大面積燒傷)患者外,原則上均應(yīng)采取靜脈血行血常規(guī)檢驗(yàn)。
采集靜脈血時(shí),要避免造成人為因素引起的血液稀釋或血液濃縮,因此不易在輸液靜脈同側(cè)血管采集標(biāo)本及止血帶壓迫時(shí)間不易過(guò)長(zhǎng)(<1 min)。
2.2 標(biāo)本的抗凝 用于血常規(guī)檢驗(yàn)的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理,在目前種類繁多的抗凝劑中,EDTA鹽(EDTA-Na、EDTA-K2、EDTA-K3)是對(duì)白細(xì)胞形態(tài)和血小板影響相對(duì)較小的抗凝劑,因此最適合于血常規(guī)檢驗(yàn)。除了采血因素(生理性因素、采血部位等)的影響外,血樣的質(zhì)量絕大多數(shù)取決于血液和抗凝劑的比例。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5 mg/ml。
2.3 標(biāo)本的稀釋 血液是由血細(xì)胞和血漿兩部分組成的紅色粘稠混懸液。在進(jìn)行白細(xì)胞檢驗(yàn)計(jì)數(shù)時(shí),直接血液計(jì)數(shù)非常困難,無(wú)論是鏡檢還是血細(xì)胞分析儀檢測(cè),血液均需合適準(zhǔn)確的稀釋后才能進(jìn)行檢驗(yàn)計(jì)數(shù)[1]。基于血細(xì)胞分析儀的基本原理,在血細(xì)胞分析儀的設(shè)計(jì)應(yīng)用中,稀釋倍數(shù)和計(jì)數(shù)容量是最重要的設(shè)計(jì)指標(biāo)之一。實(shí)際應(yīng)用時(shí),是將血液稀釋于稀釋液中形成稀釋標(biāo)本(稀釋比為1:N),以流動(dòng)檢測(cè)的方式測(cè)出一定量(V)的稀釋標(biāo)本內(nèi)的血細(xì)胞數(shù)(T),經(jīng)換算后得出血液中的細(xì)胞濃度L(L=T N/V)。
2.4 標(biāo)本的儲(chǔ)存 前文提到,抗凝劑因時(shí)間和濃度的不同,會(huì)造成對(duì)血細(xì)胞形態(tài)的影響。在研究表明,用EDTA抗凝靜脈血標(biāo)本,在標(biāo)本收集后的5 min內(nèi)或30 min后,8 h內(nèi)(室溫)檢測(cè),可以得到最佳的檢測(cè)結(jié)果,如果不能及時(shí)用儀器進(jìn)行檢測(cè),須盡快推制血涂片,以便必要時(shí)用顯微鏡對(duì)血涂片進(jìn)行復(fù)查。
3.1 血液分析儀計(jì)數(shù)的最適溫度為18℃ ~22℃,溫度過(guò)高、過(guò)低均對(duì)結(jié)果有影響。
3.2 應(yīng)嚴(yán)格按照操作程序操作,應(yīng)定期對(duì)儀器進(jìn)行保養(yǎng),清洗和濃縮沖洗,避免半堵孔現(xiàn)象發(fā)生。
3.3 每日開機(jī)后,應(yīng)先做室內(nèi)質(zhì)控,參加室間質(zhì)評(píng)。室內(nèi)質(zhì)量控制是質(zhì)控的主要環(huán)節(jié),它能夠保證儀器測(cè)定值的穩(wěn)定性;室間質(zhì)評(píng)可以解決準(zhǔn)確性和參加室間結(jié)果協(xié)調(diào)一致的問(wèn)題,這是保證成批測(cè)定標(biāo)本不會(huì)產(chǎn)生明顯誤差的重要部分。
3.4 根據(jù)直方圖及參數(shù)變化確定計(jì)數(shù)結(jié)果是否準(zhǔn)確,是否需要顯微鏡復(fù)查。
3.5 準(zhǔn)確分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果及各參數(shù)之間的關(guān)系,分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否與臨床相符,出現(xiàn)異常結(jié)果主動(dòng)與臨床聯(lián)系。
總之,影響血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多,要想取得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù),對(duì)實(shí)驗(yàn)中的每一個(gè)步驟都應(yīng)進(jìn)行監(jiān)督和管理,尤其應(yīng)大力提高對(duì)質(zhì)量控制方面的分析、判斷、表達(dá)及計(jì)算能力,要有一套完整的質(zhì)量控制體系,才能保證實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性、準(zhǔn)確性,才能為臨床診斷、治療和療效評(píng)價(jià)提供準(zhǔn)確的信息。
[1]劉健,梁玉霞.抗凝劑對(duì)血小板及其參數(shù)檢測(cè)結(jié)果的影響分析.國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2004,10(8):64-65.