(天津市畜牧獸醫(yī)研究所,天津 300112)
許多研究證明,丹參的有效成分具有抑制細胞發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng),清除機體產(chǎn)生的多余自由基,保護機體免受過氧化危害的作用[3-4]。同時有研究證明,中藥在加工提取過程中,會有部分有效成分殘留在剩余物中不能被完全提取。目前天津市每年丹參提取剩余物的產(chǎn)量在1 000 t以上,以往這些剩余物被當做垃圾處理掉,不僅需要耗費大量的人力、物力、財力,還會對環(huán)境保護造成一定壓力。本試驗旨在研究在肉仔雞日糧中添加丹參提取剩余物,對于肉仔雞生產(chǎn)性能和抗氧化能力的影響,為丹參提取剩余物作為動物抗氧化飼料添加劑的應(yīng)用提供理論依據(jù)。通過本項目的研究,最終使丹參提取剩余物變廢為寶,并為實現(xiàn)中藥加工廢棄物的循環(huán)、可持續(xù)利用提供指導(dǎo)。
丹參提取剩余物(丹參渣)從天津天士力現(xiàn)代中藥資源有限公司生產(chǎn)現(xiàn)場采樣,干燥備用;經(jīng)天津市疾病預(yù)防與控制中心大鼠急性經(jīng)口性試驗表明,屬于食品級無毒。經(jīng)過天津市農(nóng)科院中心實驗室測定,丹參提取剩余物中含有抗氧化成分丹酚酸B 0.7%、丹參素0.7%、丹參酮ⅡA 0.1%。
選用1日齡體重一致、健康的AA肉仔雞320只,分成4個處理,每個處理8個重復(fù),每個重復(fù)10只雞。處理1為對照組,飼喂基礎(chǔ)日糧;處理2、3、4分別為在基礎(chǔ)日糧中添加0.3%、0.5%和1.0%丹參提取剩余物的試驗組。試驗期42 d。
試驗雞以重復(fù)為單位單籠飼養(yǎng),自由采食,自由飲水。日常管理與免疫程序按常規(guī)進行。試驗期間每天記錄雞的供料量和余料量,計算每天的耗料量。
日糧配方為玉米-豆粕型,分為0~3周和4~6周兩階段,參照AA肉雞營養(yǎng)需要配制,原料營養(yǎng)成分參考2004《中國雞飼養(yǎng)標準》?;A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
1.4.1 生產(chǎn)性能
試驗期間以重復(fù)為單位記錄每天雞的耗料量,試驗第0、21、42日齡以重復(fù)為單位分別稱重,計算采食量、日增重和料重比。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平
1.4.2 血清抗氧化指標
范堅強抓過青年男子手中的皮鞭,狠狠地抽在一杭身上。一杭痛苦地呻吟著,低垂著頭。范堅強說:“你說不說?”一杭咬著牙,什么也不說。
分別于試驗第21、42 d早上空腹稱重后,每個組選擇24只體重一致、健康的肉雞(每個重復(fù)選擇3只)進行翅靜脈采血5 ml,3 000 r/min離心10 min制備血清,于-20℃保存待測。測定血清中總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。測定方法為南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒推薦方法,儀器為島津-UV2210紫外分光光度儀。
數(shù)據(jù)用“Mean±SD”表示,采用 SAS 9.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,ANOVA方差分析,Duncan's法多重比較,以P<0.05作為差異顯著性判斷標準。
由表2可知,0~3周齡時,分別添加0.3%、0.5%和1.0%丹參提取剩余物的試驗組肉仔雞平均日采食量、平均日增重、料重比與對照組相比沒有顯著差異(P>0.05),但料重比都低于對照組。
4~6周齡時,分別添加0.3%、0.5%和1.0%丹參提取剩余物的試驗組肉仔雞平均日采食量、平均日增重、料重比與對照組相比沒有顯著差異(P>0.05),但料重比都低于對照組。
整個試驗周期(0~6周齡),分別添加0.3%、0.5%和1.0%丹參提取剩余物的試驗組肉仔雞平均日采食量、平均日增重、料重比與對照組相比沒有顯著差異(P>0.05),但料重比都低于對照組,添加1.0%丹參提取剩余物的試驗組效果較好。
表2 日糧中添加不同比例丹參提取剩余物對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響
2.2.1 丹參提取剩余物對肉仔雞血清總抗氧化能力(T-AOC)的影響(見表3)
表3 日糧中添加不同比例丹參提取剩余物對肉仔雞血清T-AOC的影響(U/ml)
由表3可知,與對照組相比,在日糧中添加0.3%、0.5%丹參提取剩余物,對于肉仔雞21日齡和42日齡血清總抗氧化能力(T-AOC)的影響差異不顯著(P>0.05);添加1.0%丹參提取剩余物可以顯著提高肉仔雞21日齡和42日齡血清總抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),說明添加1.0%丹參提取剩余物試驗組效果最佳。
2.2.2 丹參提取剩余物對肉仔雞血清超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響(見表4)
表4 日糧中添加不同比例丹參提取剩余物對肉仔雞血清SOD活性的影響(U/ml)
由表4可知,與對照組相比,在日糧中添加0.3%、0.5%丹參提取剩余物,可以提高肉仔雞21日齡和42日齡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,但是差異不顯著(P>0.05);添加1.0%丹參提取剩余物可以顯著提高肉仔雞21日齡和42日齡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),其中添加1.0%丹參提取剩余物試驗組效果最佳。
2.2.3 丹參提取剩余物對肉仔雞血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性的影響(見表5)
表5 日糧中添加不同比例丹參提取剩余物對肉仔雞血清GSH-Px活性的影響(U/ml)
由表5可知,與對照組相比,在日糧中添加0.3%、0.5%丹參提取剩余物,可以提高肉仔雞21日齡和42日齡血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性,但差異不顯著(P>0.05);添加1.0%丹參提取剩余物可以顯著提高肉仔雞21日齡和42日齡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05)。
2.2.4 丹參提取剩余物對肉仔雞血清丙二醛(MDA)含量的影響(見表6)
表6 日糧中添加不同比例丹參提取剩余物對肉仔雞血清MDA含量的影響(nmol/ml)
由表6可知,在日糧中添加0.3%丹參提取剩余物可以降低肉仔雞21日齡、42日齡血清丙二醛(MDA)含量,但差異不顯著(P>0.05);添加 0.5%丹參提取剩余物可以降低肉仔雞21日齡血清丙二醛(MDA)含量,但差異不顯著(P>0.05),可以顯著降低42日齡血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05);添加 1.0%丹參提取剩余物可以顯著降低肉仔雞21日齡和42日齡血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05),其中添加 1.0%丹參提取剩余物試驗組效果最佳。
目前,關(guān)于中草藥添加劑對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響研究很多,但關(guān)于丹參提取剩余物(包括丹參)對肉仔雞生產(chǎn)性能影響的研究未見有報道。李笑春等(2011)[5]研究認為,在肉仔雞日糧中添加中草藥添加劑,中草藥組與基礎(chǔ)日糧組相比,終末平均體重、日增重、采食量、料肉比和死淘率均無顯著差異(P>0.05),除料肉比稍高于基礎(chǔ)日糧組外,其他指標均優(yōu)于基礎(chǔ)日糧組。賀永康等(2010)[6]研究表明,在肉仔雞日糧中添加白頭翁、黃芪、黃連、黨參和大黃等藥材組成的中草藥添加劑,可促進肉雞生長,提高生產(chǎn)性能。添加量為1.5%時取得了較好的日增重(ADG)和料重比(F/G),與對照組相比,ADG提高7.38%,F(xiàn)/G降低6.25%。本次試驗結(jié)果表明,在日糧中添加丹參提取剩余物,肉仔雞平均日采食量、日增重和料重比與對照組相比差異不顯著(P>0.05),但料重比都低于對照組。
正常情況下,機體組織中皆有自由基代謝發(fā)生,當自由基產(chǎn)生過多,同時機體清除能力降低時,自由基可造成許多生物分子如蛋白質(zhì)、核酸的損傷,引起超氧化反應(yīng),導(dǎo)致發(fā)生細胞結(jié)構(gòu)和功能的損害。機體內(nèi)存在的可清除自由基、減輕其危害的物質(zhì)主要是抗氧化酶,包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)等,它們通過各自的作用途徑,維持著體內(nèi)自由基產(chǎn)生和清除的動態(tài)平衡。研究表明[3],丹參的主要活性成分(丹參素、丹酚酸和丹參酮ⅡA)都具有一定的清除自由基能力,保護機體免受過氧化損傷。
有很多學(xué)者研究了丹參的體外抗氧化活性及其對小鼠抗氧化作用的影響。李欣等(2011)[7]研究認為,丹參總酚酸的含量和抗氧化活性之間具有很高的相關(guān)性,表明抗氧化活性可能與酚酸類物質(zhì)有關(guān)。夏鑫華等(2009)[8]研究認為,丹參的活性成分具有很強的體外自由基清除能力,其中4種酚酸化合物清除超氧陰離子的IC50(超氧陰離子清除率為50%時的樣品濃度)值大小順序為:丹參素>咖啡酸>原兒茶醛>丹酚酸B,表明丹酚酸B的作用最強,丹參素鈉、原兒茶醛和咖啡酸的作用相近。試驗結(jié)論為丹酚酸B可能是丹參通過清除氧自由基治療心血管疾病的重要活性成分。張斌等(2007)[9]研究指出,小鼠分別灌胃給予白花丹參水提物 10、20、40 g/(kg·d),可以不同程度地提高小鼠血液內(nèi)T-AOC、SOD的活性,提示白花丹參水提物能增強內(nèi)源性抗氧化酶的活力;能使血液內(nèi)MDA及ROS不同程度下降,提示白花丹參水提物能顯著清除活性氧和抑制脂質(zhì)過氧化。
本次試驗結(jié)果表明,在日糧中添加丹參提取剩余物可以提高肉仔雞血清總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶活性(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活性,降低丙二醛(MDA)的含量,其中添加比例為1%時作用效果最佳。
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