周志偉 莫海山 黎民宇 董啟超 范津瑞 高 原

廣東省珠海市人民醫(yī)院普外科，廣東 珠海 519040

梗阻性黃疸是肝膽外科常見疾病，梗阻性黃疸不僅能夠引起肝臟的直接損傷，對內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能也具有明顯的影響，如胰島素分泌及利用異常、甲狀腺激素代謝異常等。已經(jīng)有研究表明在肝炎、肝硬化等急慢性肝臟損傷時，常伴隨體內(nèi)甲狀腺激素及其轉(zhuǎn)化物水平異常[1]，并且同預(yù)后密切相關(guān)，能夠反映肝臟的損傷程度及預(yù)后，為明確梗阻性黃疸時體內(nèi)甲狀腺素的代謝異常情況及給予相應(yīng)的干預(yù)治療，減輕肝臟損傷，增強膽道腫瘤、胰頭腫瘤等重大疾病圍術(shù)期安全，本文就梗阻性黃疸大鼠甲狀腺激素代謝異常以及外源性甲狀腺素對肝臟的保護作用進行研究。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

促甲狀腺激素（TSH）、游離甲狀腺素 FT3、FT4、TRab 放免試劑盒（天津原子能公司）、血清白蛋白（ALB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、凝血酶原活度（PA）檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所）、大鼠甲狀腺素（南京建成生物工程研究所）。

放免計數(shù)儀（天津原子能公司），生化分析儀（日本奧林巴斯株式會社），分光光度計（常州醫(yī)用儀器廠）。

1.2 實驗動物及分組

24只清潔級 SD 雄性大鼠，體重（200±20）g，由中山醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，隨機分成三組：對照組、模型組和干預(yù)組，每組各8只。所有大鼠均給予標準飲食，自由飲水，分籠飼養(yǎng)，保持飼養(yǎng)室22℃，適當光照，大鼠適應(yīng)環(huán)境后造模，手術(shù)前12 h禁食，自由飲水，腹腔內(nèi)注射1%氯胺酮（80 mg/kg）麻醉，麻醉生效后，取劍突下3 cm無菌正中切口進入腹腔，沿十二指腸上緣找到膽總管，游離之，5-0絲線雙重結(jié)扎，兩線之間離斷，3-0絲線逐層關(guān)腹。對照組僅游離膽總管，模型組和對照組給予腹腔注射生理鹽水1 mL/（kg·d），干預(yù)組給予腹腔注射甲狀腺素溶液（20 μg/mL）1 mL/（kg·d），連續(xù) 14 d，后活體開胸、剪開心臟，取血6 mL，分離血清后深低溫保存，分批檢測。

1.3 檢測方法

TSH、FT3、FT4檢測采用放射免疫法 ，ALB、ALT、TBIL、DBIL、AST采用生化分析儀自動檢測，PA采用比色法。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 11.5統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（）表示，采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組大鼠血清甲狀腺激素水平

干預(yù)組及模型組TSH水平低于對照組（P<0.05），對照組及干預(yù)組FT3、FT4水平高于模型組（P<0.05），對照組同干預(yù)組FT3、FT4水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。組間比較，TSH、FT3、FT4差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均 P<0.05）。見表1。

表1 三組大鼠甲狀腺激素水平比較（）

表1 三組大鼠甲狀腺激素水平比較（）

注：與對照組比較，＊P<0.05；與模型組比較，△P<0.05

組別 只數(shù) TSH（IU/mL） FT3（ng/dL） FT4（ng/dL）對照組模型組干預(yù)組F值P值888 0.142±0.010 0.104±0.050 0.106±0.020 12.94<0.05 0.60±0.04 0.34±0.06＊0.57±0.07△27.96<0.05 38.16±6.15 25.97±9.20＊40.20±5.74△33.18<0.05

2.2 三組大鼠肝功能情況

干預(yù)組及對照組血清ALT、AST、TBIL、DBIL水平低于模型組（P<0.05），干預(yù)組及對照組ALB及PA水平高于模型組（P<0.05），干預(yù)組血清 ALT、AST、TBIL、DBIL 水平高于對照組（P<0.05），干預(yù)組ALB及PA水平低于對照組（P<0.05）。見表2。

3 討論

梗阻性黃疸是臨床常見疾病，梗阻性黃疸多由于膽道機械性阻塞所致，膽道內(nèi)壓力增高，引起膽汁分泌障礙，膽色素逆向反流進入血液，導(dǎo)致梗阻性黃疸的發(fā)生，梗阻性黃疸多引起明顯的肝臟損害，除急性肝臟損傷外，甚至能夠引起肝臟的纖維化及膽汁性肝硬化，引起肝臟功能嚴重的損害。肝臟是體內(nèi)最大的內(nèi)分泌器官，肝臟能夠合成多種激素、酶類及相關(guān)的轉(zhuǎn)運蛋白，也是體內(nèi)激素代謝、滅活的場所，因此肝臟功能損害時多伴有內(nèi)分泌系統(tǒng)功能異常及激素代謝障礙，如胰島素代謝異常引起的血糖水平紊亂。近年來的研究發(fā)現(xiàn)[2]，在嚴重肝功能損害患者，多半有體內(nèi)甲狀腺激素的代謝障礙，表現(xiàn)為TSH與T3、T4同向變化，甲狀腺激素的內(nèi)在反饋調(diào)節(jié)機制異常，有研究認為，在發(fā)生肝臟功能損害時，肝臟甲狀腺原氨酸 5-脫碘酶（5-deiodinase，5-MDI）合成 5-MDI減少，導(dǎo)致T3生成減少[3]。此外，外周組織對T4攝取減少，可導(dǎo)致T4濃度下降。但是，T4的外環(huán)氧酶活性和含量增加，導(dǎo)致T4向rT3轉(zhuǎn)化增多，引起體內(nèi)甲狀腺的激素水平的降低。此外，有研究認為[4]，在肝臟功能損害時，肝臟合成甲狀腺素受體蛋白及下丘腦-垂體-甲狀腺軸功能抑制也是引起體內(nèi)甲狀腺激素水平異常的主要機制。甲狀腺激素能夠促進機體的能量代謝，在膽汁分泌過程中，甲狀腺激素能夠促進膽汁的分泌[5]，但是具體機制目前尚未明確。

表2 三組大鼠肝功能變化比較（）

表2 三組大鼠肝功能變化比較（）

注：與對照組比較，＊P<0.05；與模型組比較，△P<0.05

組別 只數(shù) ALT（U/L） AST（U/L） TBIL（μmol/L） DBIL（μmol/L） ALB（g/L） PA（g/L）對照組模型組干預(yù)組F值P值888 41.20±1.83 340.4±21.47＊202.83±19.65＊△89.67<0.05 41.20±1.83 340.4±21.47＊202.83±19.65＊△89.67<0.05 7.32±1.15 137.66±17.15＊105.40±9.45＊△126.42<0.05 5.57±0.55 119.94±11.89＊87.37±8.41＊△227.64<0.05 5.57±0.55 119.94±11.89＊87.37±8.41＊△227.64<0.05 164.29±17.58 129.46±13.26＊142.65±22.40＊△17.2<0.05

本研究發(fā)現(xiàn)，在梗阻性黃疸大鼠，體內(nèi)存在甲狀腺激素代謝異常情況，F(xiàn)T3及FT4水平下降，而TSH水平并未出現(xiàn)升高，而是同步下降，提示在梗阻性黃疸時，大鼠體內(nèi)甲狀腺激素分泌的反饋機制失衡，其可能是甲狀腺激素水平異常的主要原因，而在給予外源性甲狀腺激素后，干預(yù)組大鼠體內(nèi)甲狀腺激素水平上升，但是TSH水平未發(fā)生明顯的變化，說明采用外源性甲狀腺激素能夠改善梗阻性黃疸大鼠體內(nèi)的甲狀腺激素水平異常，但是并不能糾正甲狀腺軸反饋機制的異常。在進一步的研究中發(fā)現(xiàn)，給予外源性甲狀腺素后，干預(yù)組大鼠的肝功能明顯改善，肝臟損傷減輕，值得注意的是，干預(yù)組大鼠的TBIL及DBIT水平低于模型組，說明外源性甲狀腺素能夠調(diào)節(jié)梗阻性黃疸大鼠膽色素的代謝，由于膽道梗阻并未解除，提示其可能在膽色素合成、轉(zhuǎn)運或分泌的水平發(fā)生了調(diào)節(jié)作用，甲狀腺素能夠調(diào)節(jié)能量代謝，能夠調(diào)節(jié)三羧酸循環(huán)和Na+-K+-ATP酶的活性，在病理條件下，能夠促進肝臟細胞的增殖[6-7]，促進損傷干細胞的修復(fù)，也是肝功能改善的原因之一，此外對于ALB及PA的檢測證實，外源性甲狀腺素在減輕肝臟功能損傷的同時能夠改善肝臟的合成功能，發(fā)揮對肝臟的保護作用。

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