郭洪海 宋巧云 周振東 馬景枝

研究表明，惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移以及復(fù)發(fā)都與患者血液的高凝狀態(tài)有密切關(guān)系，而惡性腫瘤患者體內(nèi)多存在明顯的高凝狀態(tài)[1]。肺癌是呼吸系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率與死亡率逐年升高，凝血及纖溶系統(tǒng)激活在肺癌患者中較為常見(jiàn)且與肺癌的臨床變化有關(guān)，轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最重要的生物學(xué)特征之一，腫瘤細(xì)胞的血行轉(zhuǎn)移與血粘狀態(tài)的異常改變關(guān)系極大。血漿D-二聚體是血漿中的纖維蛋白在纖溶酶作用下形成纖維蛋白單體，纖維蛋白單體經(jīng)活化因子X(jué)交聯(lián)后再經(jīng)纖溶酶降解產(chǎn)生的特異性終未產(chǎn)物，為纖維蛋白降解產(chǎn)物中的最小片段[2], 正常人體血漿中含量很低，血漿D-二聚體含量增高表明血漿發(fā)生凝固反應(yīng)，纖溶系統(tǒng)被激活可以作為體內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶亢進(jìn)的分子標(biāo)志物之一[3]，其在判斷血栓形成性疾病中的作用正日益受到重視。本文通過(guò)對(duì)肺癌患者不同轉(zhuǎn)移情況及不同病理類(lèi)型血漿D-二聚體水平進(jìn)行檢測(cè)，以分析D-二聚體水平的異常改變與腫瘤轉(zhuǎn)移和病理類(lèi)型的關(guān)系。

1 材料與方法

本研究將肺癌患者與健康體檢者分為兩組，對(duì)其血漿D-二聚體水平進(jìn)行分析。

1.1 一般資料

132例肺癌患者均為病理及影像學(xué)確診的住院患者，其中男性83例，女性49例，年齡26～88歲。31例鱗癌，79例腺癌，22例未分化癌。對(duì)照組選擇門(mén)診接受健康體檢者30例，其中男性17例，女性13例，年齡28～65歲，平均58.34歲。

1.2 D-二聚體測(cè)定方法

1.2.1 血漿制備

靜脈采血2～3 ml，用0.11 mol/L枸櫞酸鈉抗凝，抗凝劑與全血之比為1∶9。2500 r/min離心20 min，分離血漿2 h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2.2 D-二聚體測(cè)定

使用煙臺(tái)奧斯邦生物工程有限公司生產(chǎn)的D-二聚體單一試劑盒。采用膠體金方法，基于固相夾心免疫分析原理，將血漿樣本加入檢測(cè)卡孔內(nèi)，樣本被吸收，D-二聚體分子被包被在薄膜中的D-二聚體特異單克隆抗體捕獲，然后加入D-二聚體單克隆抗體與膠體金的偶聯(lián)液，膜中D-二聚體與該偶聯(lián)液中金標(biāo)D-二聚體單克隆抗體形成夾心式反應(yīng)，標(biāo)本中存在0.1 mg/L以上的D-二聚體時(shí)檢測(cè)膜顯現(xiàn)紅色。使用Nyco Card ReaderⅡ小型讀數(shù)儀判讀，正常值為＜0.3 mg/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本資料經(jīng)spss 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，且計(jì)量資料以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較用t檢驗(yàn)，(P＜0.05)為差異有顯著意義。

2 結(jié)果

(1)肺癌患者血漿D-二聚體檢測(cè)值為(0.76±1.16)mg/L,健康對(duì)照組檢測(cè)結(jié)果為(0.18±0.09) mg/L(見(jiàn)表1)。

表1 肺癌患者和健康對(duì)照組的血漿D-二聚體檢測(cè)結(jié)果比較

(2)肺癌轉(zhuǎn)移組D-二聚體檢測(cè)值為1.17±1.30 mg/L，明顯高于肺癌局限組0.50±1.00 mg/L(t=1.192；P＜0.05)(見(jiàn)表2)。

表2 肺癌轉(zhuǎn)移組和肺癌局限組的血漿D-二聚體檢測(cè)結(jié)果比較

3 討論

血栓形成與栓塞是惡性實(shí)體瘤最常見(jiàn)的并發(fā)癥，其中以肺癌的發(fā)病率最高[4]，且栓塞部位呈多樣性，不僅見(jiàn)于上、下肢體的靜脈栓塞，而且可見(jiàn)動(dòng)脈栓塞、肺栓塞及腦梗塞，另一半表現(xiàn)為慢性DIC。D-二聚體是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子ⅩⅢ交聯(lián)后再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異降解產(chǎn)物，其水平的增高反映繼發(fā)性纖溶活性的增強(qiáng)?？勺鳛轶w內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶功能亢進(jìn)的分子標(biāo)志之一。本組132例肺癌患者中，D-二聚體水平與健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.192；P＜0.05)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]。結(jié)果表明肺癌患者血漿D-二聚體含量明顯升高，提示交聯(lián)纖維蛋白降解增強(qiáng)，有凝血活性亢進(jìn)和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。肺癌患者凝血及纖溶功能異常的機(jī)制是：①肺癌細(xì)胞具有潛在凝血酶原活性，能提高血小板的粘附能力，促進(jìn)血管內(nèi)凝血；②肺癌組織自身還能產(chǎn)生一些蛋白酶及異常蛋白，能直接激活凝血因子，促進(jìn)凝血；③近年的研究表明，許多腫瘤細(xì)胞可分泌促凝活性物質(zhì)，如類(lèi)組織因子促凝活性物質(zhì)，因子Ⅹ活化劑，多糖蛋白質(zhì)血漿素原激活劑等，使體內(nèi)處于高凝狀態(tài)，具有血栓形成傾向；④肺癌在腫瘤免疫性淋巴細(xì)胞刺激下可以合成釋放大量組織因子，癌細(xì)胞對(duì)其他組織的破壞也可引起其他組織釋放一定量的組織因子[6]。

有研究顯示，腫瘤初治組和難治組的血漿D-二聚體含量明顯增高，治療緩解組血漿D-二聚體含量有不同程度下降，其含量變化及患者的病情嚴(yán)重程度與預(yù)后顯著相關(guān)[7]。在本研究中將肺癌患者分為兩組，肺癌局限組與轉(zhuǎn)移組，組間差異非常顯著，隨轉(zhuǎn)移擴(kuò)散血漿D-二聚體呈逐漸遞增趨勢(shì)，提示血漿D-二聚體濃度和腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系非常密切，已有的實(shí)驗(yàn)表明，惡性腫瘤患者其全血粘度和血漿濃度均明顯高于健康者[8]。肺癌患者血液的高粘狀態(tài)，血小板、紅細(xì)胞聚集增多，導(dǎo)致血流緩慢，且肺癌患者的高凝狀態(tài)和纖溶亢進(jìn)加速了腫瘤的生長(zhǎng)、血管的形成以及轉(zhuǎn)移進(jìn)程[9]，為瘤細(xì)胞血行轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了條件。

4 結(jié)語(yǔ)

肺癌患者有凝血機(jī)制的異常，常規(guī)凝血功能檢查如PT,APTT等指標(biāo)改變均不敏感。血漿D-二聚體在心腦血管、肺部疾患、惡性腫瘤、白血病及結(jié)核病時(shí)均可升高[10]。血漿D-二聚體檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷雖不是特異的，但有過(guò)篩作用，本實(shí)驗(yàn)表明在肺癌的輔助診斷和病情判斷方面具有重要的臨床意義。該方法迅速，簡(jiǎn)便，敏感性高，不失為肺癌患者的一項(xiàng)早期診斷指標(biāo)。對(duì)肺癌患者及時(shí)應(yīng)用促凝活性物質(zhì)及血小板活性的藥物可能有助于治療。有關(guān)這方面的內(nèi)容將在臨床研究中獲得進(jìn)一步的發(fā)展。

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