朱曉紅，凌 磊，王 楊，王 強(qiáng)

燒傷為平時及戰(zhàn)時常見外傷，隨著高技術(shù)武器如燃料空氣炸彈、氣浪彈、新型燃燒武器等的發(fā)展，燒傷的發(fā)生率較以往戰(zhàn)爭不斷增加。在燒傷的治療中，外治療法居多，外用藥物在治療燒傷中具有重要地位［1］。理想的燒傷外用治療藥物應(yīng)具備良好的抗感染及促進(jìn)創(chuàng)面愈合的功效。雙黃燒傷膏為在充分分析現(xiàn)有燒傷藥物的優(yōu)缺點(diǎn)，挖掘民間治療燒傷的特效藥物，反復(fù)進(jìn)行篩方、組方的基礎(chǔ)上研制的療效高、不良反應(yīng)少、使用方便、平戰(zhàn)時都適用的燒傷制劑。本文通過建立大鼠燙傷、燒傷感染動物模型，進(jìn)一步研究其藥效，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 雙黃燒傷膏由我院制劑室提供(批號:20110818);京萬紅，天津達(dá)仁堂京萬紅藥業(yè)有限公司(批號:211803);注射用硫噴妥鈉，中國醫(yī)藥工業(yè)公司(批號:09036884);注射用水(5 mL)，沈陽志鷹制藥廠(批號:2011051507);硫化鈉(分析純)，沈陽市新西試劑廠(批號:05007);膏狀固體酒精，沈陽市東凌化工廠(批號:081643)。

1.2 儀器 SW-CJ-2FD 型雙人單面凈化工作臺，蘇州凈化設(shè)備有限公司。

1.3 動物、菌種及培養(yǎng)基 Wistar 大鼠，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限公司/中國科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動物中心［普通級;許可證號:SCXK(滬)2007-0005;合格證編號:2007000503684、2007000503999;序號:0018890、0019214］;銅綠假單胞菌(10104)、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，我院藥檢微生物室提供。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 皮膚刺激性實(shí)驗(yàn) 隨機(jī)取5 只體質(zhì)量160 ～180 g Wistar 大鼠，實(shí)驗(yàn)前24 h 用脫毛劑(8%硫化鈉溶液［2］)給大鼠背部脫毛，面積約2 cm ×2 cm，用清水洗凈、擦干，以防脫毛劑刺激皮膚，分籠喂養(yǎng)，自由進(jìn)食、進(jìn)水。分別在各鼠的背部涂藥。24 h 后用75%酒精去除殘留物，分別于1、24、48、72 h 后觀察皮膚情況，觀察涂藥部位皮膚的紅斑和水腫等情況，并進(jìn)行評分。

最高總分值為8 分(見表1);按分值高低評價刺激性強(qiáng)度:0 ～0.49 分為無刺激性;0.5 ～2.99 分為輕微刺激性;3.0 ～5.99 分為中度刺激性;6.0 ～8.0 分為強(qiáng)刺激性［3］。

表1 皮膚刺激性強(qiáng)度的評分標(biāo)準(zhǔn)

1.4.2 大鼠燙傷實(shí)驗(yàn) 將21 只體質(zhì)量160 ～180 g Wistar 大鼠，按體質(zhì)量隨機(jī)分為雙黃燒傷膏實(shí)驗(yàn)組、京萬紅陽性對照組和空白對照組，每組7只。實(shí)驗(yàn)前24 h 用脫毛劑(8%硫化鈉溶液)給大鼠背部脫毛，用清水洗凈、擦干，分籠喂養(yǎng)，自由進(jìn)食、進(jìn)水。24 h 后腹腔注射2% 硫噴妥鈉(2 mL/kg)麻醉，75%酒精消毒，將脫毛消毒后的背部皮膚置于一孔洞直徑為1.5 cm 圓孔的厚紙板上，紙板下置一盛水燒杯，電爐加熱產(chǎn)生水蒸汽，利用水蒸汽灼燙大鼠背部6 s，造成Ⅱ°燙傷［3］。0.5 h 后分別在燙傷部位涂抹給藥，連續(xù)8 h 以保持創(chuàng)面濕潤。以后2 次/d 給藥至創(chuàng)面愈合為止，以結(jié)痂脫落、新皮長好為愈合標(biāo)準(zhǔn)。記錄創(chuàng)面變化情況及愈合時間，見表2。

1.4.3 大鼠的燒傷感染實(shí)驗(yàn)［4］于實(shí)驗(yàn)前24 h用脫毛劑(8%硫化鈉溶液)給大鼠背部脫毛，用清水洗凈、擦干，以防脫毛劑刺激皮膚，分籠喂養(yǎng)，自由進(jìn)食、進(jìn)水。24 h 后腹腔注射2%硫噴妥鈉(2 mL/kg)麻醉，將燒傷背部皮膚75%酒精消毒，將膏狀固體酒精均勻涂抹于預(yù)燒傷區(qū)，燒傷面積1.5 cm×1.5 cm，立即點(diǎn)火燃燒25 s，然后用濕布將火撲滅，造成Ⅲ°燒傷［5］。銅綠假單胞菌經(jīng)16 ～24 h的培養(yǎng)，用生理鹽水制成含4 ×108CFU/mL(相當(dāng)于0.375 倍的濁度為0.5 麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn))的細(xì)菌懸液，各取1 mL 注入Ⅲ°燒傷創(chuàng)面上［6］。0.5 h 后分別在燒傷部位涂抹給藥，連續(xù)8 h 以保持創(chuàng)面濕潤。以后每天給藥2 次，連續(xù)給藥6 d，給藥后第9天檢查各組大鼠燒傷創(chuàng)面感染情況，見表3。

2 結(jié)果

2.1 皮膚刺激性實(shí)驗(yàn) 去除受試藥物后1、24、48、72 h，肉眼觀察涂藥部位有無紅斑和水腫等情況，并按表1 評分，結(jié)果5 只大鼠評分均小于0.5分，說明雙黃燒傷膏對皮膚無毒、無刺激性。

2.2 大鼠燙傷實(shí)驗(yàn) 見表2。由表2 可知，大鼠實(shí)驗(yàn)性燙傷實(shí)驗(yàn)組在第3 天、第5 天、第10 天創(chuàng)面面積變化較小;第15 天創(chuàng)面結(jié)痂面積明顯減小，脫痂愈合時間縮短，與陽性對照組、空白對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.05、P ＜0.01);第20天創(chuàng)面面積與陽性對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01)，說明雙黃燒傷膏對創(chuàng)面的愈合具有良好的促進(jìn)作用，明顯縮短愈合時間，療效確切。

表2 雙黃燒傷膏對大鼠實(shí)驗(yàn)性燙傷的影響(n=7，±s)

表2 雙黃燒傷膏對大鼠實(shí)驗(yàn)性燙傷的影響(n=7，±s)

注:與實(shí)驗(yàn)組比較，* P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

組別原始面積(cm2)涂藥后各時相點(diǎn)創(chuàng)面殘留面積A(cm2)3 d5 d10 d15 d20 d愈合時間(d)1.31 ±1.190.72 ±0.4920.28 ±4.41陽性對照組 8.28 ±0.8110.92 ±1.518.63 ±1.417.74 ±1.891.59 ±0.46*0.63 ±0.2823.22 ±1.61*空白對照組 8.61 ±0.7510.23 ±1.199.12 ±1.148.25 ±1.454.57 ±1.36＊＊2.81 ±1.29＊＊ 25.78 ±1.19實(shí)驗(yàn)組8.78 ±1.5211.32 ±2.2111.72 ±1.6911.78 ±1.65＊＊

2.3 大鼠燒傷感染實(shí)驗(yàn) 見表3。結(jié)果表明，大鼠實(shí)驗(yàn)性燒傷感染實(shí)驗(yàn)組在第9 天燒傷感染只數(shù)與陽性對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01)，說明雙黃燒傷膏對燒傷感染創(chuàng)面具有抗炎作用，療效確切。

表3 雙黃燒傷膏對大鼠實(shí)驗(yàn)性燒傷感染的影響(n=7，±s)

表3 雙黃燒傷膏對大鼠實(shí)驗(yàn)性燒傷感染的影響(n=7，±s)

組別感染只數(shù)(第9 天)實(shí)驗(yàn)組1陽性對照組1空白對照組6

3 討論

雙黃燒傷膏對創(chuàng)面具有較強(qiáng)的收斂作用，能夠促進(jìn)創(chuàng)面結(jié)痂愈合，防止組織液滲出，抗炎消腫止痛，有效促進(jìn)皮膚附件及周圍皮膚生長增殖，對深Ⅱ度燒傷有明顯的治愈作用。實(shí)驗(yàn)中大鼠的燙傷模型主要分為水燙傷和水蒸汽燙傷2 種，水燙傷創(chuàng)面不易控制，所以本實(shí)驗(yàn)中采用水蒸汽燙傷法制備大鼠的燙傷模型。實(shí)驗(yàn)組、陽性對照組、陰性對照組第3 天面積與原始面積比較明顯增大，說明水蒸汽燙傷法制備燙傷模型仍然有其不足之處。水蒸汽穿透力較強(qiáng)，易擴(kuò)散，使得燙傷面積在制備模型后的第2 天或第3 天才完全呈現(xiàn)，與制備模型當(dāng)天相比有所增加。所以燙傷水蒸氣量和時間的控制，膏狀固體酒精涂布的面積及厚度是模型成功的關(guān)鍵。涂布給藥時，盡量嚴(yán)格控制局部藥物濃度，濃度太高，粘稠度增加，導(dǎo)致流動性和滲透性降低，使藥物難于進(jìn)入大鼠體內(nèi)，同時高濃度的藥物阻止了炎性滲出液的滲出，從而使效果受到影響。

綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果，雙黃燒傷膏治療燙傷、燒傷的作用機(jī)制有以下3 個方面:(1)保護(hù)創(chuàng)面，收濕斂痂，促進(jìn)結(jié)痂。本藥劑型為油劑，可以在創(chuàng)面形成一層保護(hù)膜，起到保護(hù)創(chuàng)面的作用;同時可以使創(chuàng)面保持濕潤，促進(jìn)結(jié)痂。(2)活血、生肌、消腫。本藥中含有的當(dāng)歸、蜂蠟等具有活血、生肌、消腫的功效，促進(jìn)上皮生長，加快創(chuàng)面愈合。(3)抗菌抗感染。本藥中含有的黃連、黃柏、蒼術(shù)、地榆等均具有較強(qiáng)的抗菌作用，特別是對與皮膚、黏膜感染有關(guān)的致病菌有明顯的抑制作用。雙黃燒傷膏對皮膚無毒、無刺激性;治療局部燙傷、燒傷具有收斂、利于創(chuàng)面保濕、加快創(chuàng)面愈合等作用。本研究結(jié)果為雙黃燒傷膏治療局部燙傷、燒傷提供了藥效學(xué)依據(jù)。

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