陳 新

(長春中醫(yī)藥大學，吉林 長春 130021)

在祖國醫(yī)學中，高血壓屬于“風?！狈秶?，病變涉及心、肝、腎諸多臟器，但其變動在肝、根源在腎，肝腎陰虛、肝陽上亢是其重要的發(fā)病機制。由于肝腎陰虛，陰不制陽，導致肝陽上亢，是高血壓病理發(fā)展過程中的主要階段。夏芩顆粒為臨床經(jīng)驗方，由夏枯草、黃芩、澤瀉等五味藥組成，具有清肝瀉火之功效，主治高血壓肝火亢盛證見血壓增高、頭暈頭痛、心煩易怒等，具有良好的臨床療效。本研究主要探討夏芩顆粒對高血壓大鼠肝陽上亢證的干預(yù)作用。

1 材料與方法

1.1 動物及分組 選擇健康雄性Wistar大鼠40只，體重200～250 g，由長春生物制品研究所提供(合格證號0018388)。飼養(yǎng)于標準環(huán)境內(nèi)〔室溫(22±2)℃〕，自由飲食飲水。隨機將大鼠分為正常對照組、模型組、夏芩組及陽性藥對照組，每組10只。

1.2 方法

1.2.1 模型制備及給藥方法 參照文獻〔1～3〕方法，將大鼠置于特制鼠箱內(nèi)，應(yīng)用隨機噪音刺激結(jié)合光照的復(fù)合刺激法進行造模。每天上午、下午給予噪聲刺激，每次1 h，同時給予光照刺激，持續(xù)4 w。正常對照組:大鼠每天放于同樣的鼠箱，但不給予應(yīng)激刺激。4 w后測量大鼠收縮壓，模型組、夏芩組及陽性藥對照組收縮壓高于正常對照組。于造模4 w后開始給藥，夏芩組給予夏芩顆粒劑，陽性藥對照組給予牛黃降壓丸。模型組和正常對照組給予相同量的水，持續(xù)給藥4 w。

1.2.2 檢測指標

1.2.2.1 大鼠外觀和性情變化 外觀:包括毛色是否有光澤及雙眼結(jié)合膜顏色是否加深變紅。性情變化:將大鼠易激惹程度分為Ⅲ級，Ⅰ級喜跳躍，Ⅱ級在Ⅰ級基礎(chǔ)上加喜抓鐵籠;Ⅲ級在Ⅱ級基礎(chǔ)上加打斗、咬鐵籠。

1.2.2.2 心率和收縮壓 采用尾動脈測定法測量大鼠的收縮壓。在大鼠清醒狀態(tài)下，將大鼠置于38℃ ～40℃室溫10～20 min，使尾部動脈擴張后，將尾部套于壓敏傳感器上。在動物適應(yīng)環(huán)境后，打開主機，主機顯示屏上出現(xiàn)穩(wěn)定的脈搏數(shù)即為大鼠心率。利用充氣球使套內(nèi)壓力升高到搏動完全消失，然后慢慢放氣，觀察并讀取脈搏從無到開始出現(xiàn)對應(yīng)的壓力值，此即為大鼠的收縮壓，重復(fù)測量3次，取平均值。

1.2.2.3 血漿血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)及皮質(zhì)醇 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測，分別按AngⅡELISA試劑盒、皮質(zhì)醇ELISA試劑盒說明書操作。

1.2.2.4 血漿兒茶酚胺 采用高效液相色譜法測定。

1.3 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，數(shù)據(jù)資料以x±s表示，組間均數(shù)比較采用獨立樣本t檢驗，同組之間的比較采用配對t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 大鼠外觀和性情變化 采用復(fù)合應(yīng)激法造模后，大鼠雙眼結(jié)合膜顏色加深，呈現(xiàn)深紅色，并出現(xiàn)抓鐵籠、咬鐵籠的行為。給藥第2周后，夏芩組大鼠雙眼結(jié)合膜顏色開始逐漸恢復(fù);至給完藥后第四周，夏芩組大鼠雙眼結(jié)合膜顏色恢復(fù)正常，呈現(xiàn)正常紅色，并不再出現(xiàn)抓鐵籠、咬鐵籠的行為。陽性藥對照組大鼠雙眼結(jié)合膜顏色較正常對照組略深，無抓鐵籠、咬鐵籠行為;模型組大鼠雙眼結(jié)合膜顏色仍呈深紅色，并有抓鐵籠、咬鐵籠等行為。見表1。

表1 大鼠外觀和性情變化

2.2 應(yīng)激刺激后各組不同時間收縮壓及心率的變化 模型組、夏芩組、陽性藥對照組收縮壓在第1周均小幅上升，第2周上升幅度較大，到第3周基本達到峰值，而后基本維持峰值不變。見表2，表3。

2.3 夏芩顆粒對大鼠收縮壓及心率的影響 給藥前模型組、夏芩組、陽性藥對照組大鼠收縮壓和心率均高于正常對照組，至給藥第2周，夏芩組和陽性藥對照組大鼠收縮壓和心率均開始下降，至給藥結(jié)束，陽性藥對照組大鼠收縮壓和心率降至正常值，夏芩組大鼠收縮壓和心率也基本降至正常值，模型組大鼠的收縮壓和心率與造模后比較無明顯變化。見表4，表5。

2.4 應(yīng)激刺激后各組大鼠血漿AngⅡ、兒茶酚胺 (NE、E)及皮質(zhì)醇水平的變化比較 采用應(yīng)激刺激法造模后，各項指標均高于正常對照組。給藥后夏芩組和陽性藥對照組均能使各項指標下降，模型組大鼠各項指標與造模后相比無明顯變化。見表6。

表2 應(yīng)激刺激后各組收縮壓的變化(x ±s，n=10，mmHg)

表3 應(yīng)激刺激后各組間心率的變化(x ±s，n=10，次/min)

表4 給藥期間大鼠收縮壓的變化(x ±s，n=10，mmHg)

表5 給藥期間大鼠心率的變化(x ±s，n=10，次/min)

表6 應(yīng)激刺激后及給藥后各組大鼠血漿AngⅡ、兒茶酚胺(NE、E)、皮質(zhì)醇水平的變化(x ± s，n=10)

3 討論

肝陽上亢證是EH最常見的證型之一，主要病理生理基礎(chǔ)為外周交感-腎上腺髓質(zhì)功能偏亢。關(guān)于該證型的動物模型有許多造模方法，采用藥物造模及復(fù)合造模方法較多，本次研究采用外在條件噪聲和光照刺激復(fù)合造模，制成特制的模型箱，不用手術(shù)，動物模型成功率較高。大鼠除血壓升高外，出現(xiàn)煩躁不安、易激惹、尖叫、打斗等表現(xiàn)，與臨床癥狀基本一致。

夏芩顆粒對上述模型大鼠具有良好的治療作用，尤其明顯改善了大鼠性情和外觀。對處方中的藥味分析，夏枯草平肝潛陽，為治肝陽上亢之主藥;黃芩清瀉少陽邪熱，平肝止痛;澤瀉泄腎起陰以清肝，淫羊藿入肝腎、益精氣，且防苦寒傷正?，F(xiàn)代藥理研究表明，夏枯草總苷靜脈注射對麻醉大鼠的舒張壓和收縮壓有降低作用;澤瀉的成分澤瀉醇以100～300 mg/kg口服或腹腔給藥，對脫氧皮質(zhì)酮(DOCA)型高血壓、腎型高血壓和原發(fā)性高血壓大鼠都有持久性中等強度的降壓作用。黃芩降壓機制的進一步研究表明，黃芩苷可通過阻斷平滑肌細胞膜上的電壓依賴型鈣通道和受體操縱型鈣通道，抑制細胞Ca2+增高，從而產(chǎn)生降壓作用〔4〕。

1 董艷芬，梁燕玲，羅 艷.慢性應(yīng)激誘發(fā)高血壓大鼠模型的建立〔J〕.解剖學研究，2005;27(4):313-4.

2 王秀卿，高 貞，郭 紅，等.慢性應(yīng)激性高血壓動物模型的建立〔J〕.白求恩軍醫(yī)學院學報，2003;1(4):202-3.

3 鐘航海，馮英凱.慢性復(fù)合應(yīng)激誘發(fā)高血壓動物模型的制備〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2010;26(23):3523-5.

4 王本祥.現(xiàn)代中藥藥理與臨床〔M〕.天津:天津科技翻譯出版社，2004.