尹 勝，張素英，劉 林，胡婷婷

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208；2.株洲千金藥業(yè)股份有限公司，湖南 株洲 412003）

據(jù)報(bào)道，我國每年人工流產(chǎn)至少有1300萬人，流產(chǎn)的人數(shù)與不孕的人數(shù)在逐年的上升，我國育齡人群中不孕不育癥患者的比例，已由20年前的2%～5%上升到了目前的10%～15%，翻了兩番。專家稱，不孕不育癥患者的增多，與環(huán)境污染加劇，人流手術(shù)泛濫等因素有關(guān)[1]。目前，藥物流產(chǎn)因存在藥物吸收代謝的個(gè)體差異，影響絨毛及蛻膜剝離的速度引起藥物流產(chǎn)后出血時(shí)間長短不一，因出血時(shí)間長及蛻膜殘留引起子宮內(nèi)膜炎、盆腔炎、可能致再次妊娠并發(fā)癥增加[2]。本研究主要通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究觀察補(bǔ)血益母顆粒對大鼠藥流后陰道流血量、再次妊娠率的情況。以此確定補(bǔ)血益母顆粒對于藥流后子宮的恢復(fù)情況以及對于再次妊娠的影響，從而為臨床上藥流術(shù)后應(yīng)用補(bǔ)血益母顆粒修復(fù)子宮內(nèi)膜，提高再次妊娠質(zhì)量提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

W i s t a r大鼠，雌性性成熟而未生育，體質(zhì)量（230±10）g，200只。雄性性成熟，體質(zhì)量260±10 g，80只。以上動(dòng)物由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。動(dòng)物合格證號：SCXK（滬）2007-0005。

1.2 藥物

補(bǔ)血益母顆粒（株洲千金藥業(yè)生產(chǎn)），成人日用量為24 g/d；廣譜抗生素，米非司酮，（北京紫竹藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：4308145）；米索前列醇，（北京紫竹藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：43080521）；地塞米松片，（浙江仙琚制藥股份有限公司提供，批號：100331）。葆宮止血顆粒，（中盛海天制藥有限公司，批號：100331）。

1.3 儀器

TP100型動(dòng)物天平，湘儀天平儀器廠；LEICADMLB2型雙目顯微鏡，德國LEICA公司；MIAs醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)，北航公司；Shandon325型石蠟切片機(jī)，英國Shandon公司；MoticB顯微攝像系統(tǒng)，麥克奧迪公司。

1.4 方法

實(shí)驗(yàn)方法[3]將健康的200只雌性Wistar大鼠進(jìn)行分組，隨機(jī)選取40只為正常組，其余雌性大鼠與有生育能力的雄性大鼠2∶1合籠，次日晨進(jìn)行陰道涂片檢查，以發(fā)現(xiàn)精子的當(dāng)天為妊娠的第1 d。將妊娠的160只雌性大鼠按照體質(zhì)量，隨機(jī)分為4組，分別為補(bǔ)血益母顆粒低劑量組40只（0.27 mg/kg地塞米松+2.2 g/kg補(bǔ)血益母顆粒）；補(bǔ)血益母顆粒高劑量組40只（0.27 mg/kg地塞米松+4.4 g/kg補(bǔ)血益母顆粒）；陽性藥葆宮止血顆粒組（0.27 mg/kg地塞米松+ 葆宮止血顆粒2.7 g/kg）；模型對照組40只（0.27 mg/kg地塞米松）于受孕第7 d造模，灌胃米非司酮8.3 mg/kg（上午8 h），米索前列醇0.1 mg/kg（下午6 h）,體積為10 mL/kg，造模成功后，給藥組分別按照劑量灌胃給藥，同時(shí)每鼠于陰道內(nèi)置入定量海綿（0.035 g），空白對照給予同體積的生理鹽水，每日更換海綿, 觀察記錄每鼠子宮出血情況, 并將取出的海綿裝入玻璃小瓶密閉冷藏, 連續(xù)收集至受孕第22 d。受孕第22天，每周隨機(jī)抽取10只，采血20 μL, 加入4 mL 5%NaOH溶液，并以5%NaOH溶液為空白對照, 用紫外分光光度計(jì)于546 nm波長下, 測定靜脈血吸光度（A），取血后將大鼠處死，取出子宮放入10%福爾馬林液中固定, HE染色，進(jìn)行組織學(xué)檢查。將大鼠連續(xù)收集的海綿加入適量的5%NaOH溶液浸提24 h后，測定子宮出血A值, 按下式計(jì)算自造型日起5 d內(nèi)的子宮出血總量。各組剩余的雌性大鼠與有生育能力的雄性大鼠2:1合籠，次日晨進(jìn)行陰道涂片檢查，計(jì)算再次妊娠率。

式中：V1為稀釋靜脈血所用5%NaOH量（4 mL）；V2為浸提子宮血所用5%NaOH量（mL）

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組數(shù)據(jù)均采用（±s）表示。

2 結(jié)果

2.1 對大鼠子宮內(nèi)膜的病理結(jié)構(gòu)的影響

正常組光鏡下見內(nèi)膜正常完整無損。模型組上皮細(xì)胞脫落較多，較分散，大量炎性細(xì)胞浸潤，間質(zhì)較疏松水腫，有充血、出血。葆宮止血顆粒組少數(shù)上皮細(xì)胞脫落，炎性細(xì)胞浸潤少，偶有血管擴(kuò)張充血、出血。補(bǔ)血益母顆粒低劑量組上皮細(xì)胞脫落，炎性細(xì)胞浸潤，有充血、出血。補(bǔ)血益母顆粒高劑量組上皮細(xì)胞損壞較輕，炎性細(xì)胞浸潤少，內(nèi)膜血管收縮，宮腔中未見明顯滲液。結(jié)果表明,補(bǔ)血益母顆粒具有減少藥流后大鼠子宮出血量并促進(jìn)流產(chǎn)子宮復(fù)原的作用。

2.2 對大鼠子宮內(nèi)膜的出血量的影響

與模型組比較，葆宮止血顆粒組、補(bǔ)血益母顆粒高劑量組能顯著減少出血量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）; 補(bǔ)血益母顆粒對藥流后大鼠子宮出血具有一定抑制作用。結(jié)果見表1。

表1 補(bǔ)血益母顆粒對藥流后大鼠子宮內(nèi)膜的出血量的影響（±s，n=20）

表1 補(bǔ)血益母顆粒對藥流后大鼠子宮內(nèi)膜的出血量的影響（±s，n=20）

注：與模型組比較#P＜0.05。

組別 劑量（g/kg）出血量（mL）正常組 —— — —模型組 —— 0.197±0.095葆宮止血顆粒組 2.7 0.135±0.084#補(bǔ)血益母顆粒高劑量組 4.4 0.145±0.076補(bǔ)血益母顆粒低劑量組 2.2 0.132±0.082#

3.3 對藥流后大鼠再次妊娠率的影響

與模型組比較，葆宮止血顆粒組、補(bǔ)血益母顆粒能明顯提高再次妊娠率，補(bǔ)血益母顆粒對藥流后大鼠妊娠有一定的促進(jìn)作用。結(jié)果見表2。

表2 補(bǔ)血益母顆粒對藥流后大鼠再次妊娠率的影響（n=10）

3 討論

藥物流產(chǎn)后陰道出血時(shí)間過長，出血量偏多，常與妊娠物殘留、子宮復(fù)舊不良、血凝纖溶系統(tǒng)障礙[4]等因素有關(guān)，中醫(yī)認(rèn)為：藥流后余血未盡，瘀阻沖任，血不歸經(jīng)，故以活血化瘀為主。再針對病情，輔以補(bǔ)氣血、清熱等治療，均可不同程度的縮短藥流后陰道出血時(shí)間[5]。瘀血內(nèi)停（妊娠殘留物）沖任，妨礙胞宮的復(fù)舊（子宮內(nèi)膜的新生和修復(fù)）而致出血不止，故活血祛瘀是治療本病的關(guān)鍵。藥流乃人為終止妊娠，對臟腑、氣血、沖任損傷較甚，沖為血海，任主胞胎，藥流損傷沖任，致使胞脈空虛，氣血虛弱，故在活血祛瘀的同時(shí)應(yīng)益氣養(yǎng)血。而活血祛瘀、補(bǔ)益氣血同用可以更好的修復(fù)受損的子宮內(nèi)膜[5]。本研究采用補(bǔ)血益母顆粒，是綜合古方“當(dāng)歸補(bǔ)血湯” 處方精要得來，方中當(dāng)歸味甘、辛、苦，性溫，歸心、肝、脾經(jīng)，功擅養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，和血止痛為方中君藥；黃芪，性溫味甘，歸脾、胃、肺、腎經(jīng)，益大補(bǔ)中氣，益元?dú)舛ㄕ{(diào)血脈；阿膠性味甘、平，歸肺、肝、腎經(jīng)，功能滋陰補(bǔ)血。二者益氣養(yǎng)血 ，能增強(qiáng)君藥之功用，故為臣藥。益母草活血、止血而不留瘀，瘀去則新血易生；陳皮理氣，健脾以助運(yùn)化，兩藥共為方中佐藥。諸藥配伍，有補(bǔ)益氣血，祛瘀生新之功效。與適應(yīng)病癥之病因病機(jī)吻合，因能奏效[6]。

綜上所述，補(bǔ)血益母顆粒立于“產(chǎn)后多虛多瘀”的原則，具有“氣血雙補(bǔ)、祛瘀生新”雙重功效，有效去除藥流后殘留的瘀血和內(nèi)膜，防止感染，有助于新生內(nèi)膜生長。并且可以更好的修復(fù)受損內(nèi)膜[7]。所以它的組方更適合藥流后宮腔內(nèi)瘀血黏膜殘留，而子宮又受到損傷的病理特點(diǎn)。對于防治藥流后遺癥，在保護(hù)子宮，促進(jìn)內(nèi)膜生長，為下次妊娠提供好的內(nèi)環(huán)境方面發(fā)揮較大的作用。

[1]生殖醫(yī)學(xué)[J].生物學(xué)教學(xué),2008,31(2):74.

[2]夏妮娜.米非司酮配伍米索前列醇終止早孕對再次妊娠并發(fā)癥的影響[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,1999,15(5):272.

[3]陳 奇.中藥藥效研究思路與方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:823.

[4]賀昌海.米非司酮和米索前列醇抗早孕臨床藥理學(xué)研究[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,1994:19.

[5]胡思專,楊鳳蓮.中藥防治藥物流產(chǎn)后陰道出血研究進(jìn)展[J].江蘇中醫(yī),2000:21(4):45.

[6]姜慧君,李 力.復(fù)創(chuàng)湯促進(jìn)子宮內(nèi)膜射頻消融術(shù)后創(chuàng)面修復(fù)的臨床觀察[J].湖北中醫(yī)雜志,2006,28(7):35-36.

[7]賈沄.婦科再造膠囊治療育齡期月經(jīng)病患者的臨床觀察[J].中國醫(yī)藥,2012,7(4):412-413.