周素琴

（廣東珠海衛(wèi)生學(xué)校，珠海519020）

二陳湯中橙皮苷的含量測(cè)定

周素琴

（廣東珠海衛(wèi)生學(xué)校，珠海519020）

目的建立二陳湯中橙皮苷的含量測(cè)定方法。方法采用C18柱；流動(dòng)相：甲醇∶醋酸∶水（35∶4∶61）；檢測(cè)波長(zhǎng)：283nm；結(jié)果橙皮苷的線性范圍為0.356～2.848μg，R=0.9998；平均回收率為97.46%，RSD=1.21%。結(jié)論本含量測(cè)定方法準(zhǔn)確、穩(wěn)定，可用于二陳湯的質(zhì)量控制。

高效液相色譜法；陳皮；橙皮苷

二陳湯是由宋代傳統(tǒng)經(jīng)方二陳湯經(jīng)劑型改進(jìn)而來(lái)，主要由半夏與陳皮組成，主治濕痰咳嗽。本文以方中君藥陳皮（Pericarpium Citri Reticulatae）中主要成分橙皮苷為指標(biāo)成分，對(duì)二陳湯含量測(cè)定方法進(jìn)行了初步研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器島津LC-10ATvp高效液相色譜儀（島津公司）；N2000色譜數(shù)據(jù)工作站（浙江大學(xué)智能信息工程研究所）；DZF-6021型真空干燥箱（上海一恒）；METTLER-TOLEDD AB265-S型電子天平（瑞士）。

1.2 材料二陳湯（批號(hào)20070512），自制；陰性對(duì)照樣品：自制；對(duì)照品：橙皮苷（批號(hào)110721-200211，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所）；試劑除HPLC用甲醇為色譜純外，其他均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[1]色譜柱：Venusil XBP-C18柱（5μm，4.6×250mm）；流動(dòng)相：甲醇-醋酸-水（35∶4∶61）；流速：1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：283nm；柱溫：35℃。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備精密稱取橙皮苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.178mg的溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備取本品粗粉取約1.5g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加100ml甲醇，加熱回流3h，放冷，濾過(guò)，濾液置100ml量瓶中，用少量甲醇分?jǐn)?shù)次洗滌容器，洗液濾入同一量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。

2.2.3 缺陳皮陰性對(duì)照樣品溶液的制備稱取缺陳皮對(duì)照樣品1.5g，照2.2.2項(xiàng)下同法操作。

2.3 測(cè)定取上述橙皮苷對(duì)照品溶液、供試品溶液、缺陳皮陰性對(duì)照溶液，進(jìn)行色譜分析，記錄色譜圖。結(jié)果見(jiàn)圖1?？芍┰嚻分谐绕ぼ张c其它組分達(dá)到較好分離，分離度＞1.5，陰性對(duì)照樣品無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.4 橙皮苷線性關(guān)系考察精密吸取已知濃度橙皮苷對(duì)照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、8ml置10ml量瓶中，分別加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取20μl，依次注入液相色譜儀，測(cè)定。以進(jìn)樣量X（μg）對(duì)峰面積A進(jìn)行線性回歸，回歸方程為：A=7.64×105X-33426，r=0.9998，橙皮苷在0.356～2.848μg范圍內(nèi)峰面積與進(jìn)樣量呈良好線性關(guān)系。

圖1 高效液相色譜圖

2.5 精密度試驗(yàn)吸取同一濃度的對(duì)照品溶液20μl，重復(fù)進(jìn)樣測(cè)定5次，記錄色譜圖，結(jié)果橙皮苷峰面積RSD=0.48%。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，于室溫放置0h、4h、8h、10h和24h后分別取樣測(cè)定，結(jié)果橙皮苷峰面積RSD=2.15%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)精密稱取同一批號(hào)的樣品5份，分別照含量測(cè)定方法測(cè)定，結(jié)果樣品中橙皮苷平均含量為3.62mg/g，RSD=2.08%。

2.8 回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，取二陳湯樣品共6份，精密稱定，加入橙皮苷對(duì)照品，依法制備供試品溶液，照含量測(cè)定方法測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.9 樣品的含量測(cè)定取三批二陳湯樣品，照2.2.2項(xiàng)下操作。精密吸取橙皮苷對(duì)照品溶液與二陳湯樣品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。用內(nèi)標(biāo)法，以峰面積計(jì)算樣品中橙皮苷（C28H34O15）的含量，并折算為每片含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 三批樣品中橙皮苷的含量結(jié)果

3 討論

含量測(cè)定樣品的提取方法，根據(jù)中國(guó)藥典2005版一部陳皮含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品制備方法，是先將樣品加石油醚脫脂，再加甲醇回流提取。由于本樣品特點(diǎn)，擬直接加甲醇回流提取，并將兩種方法進(jìn)行了比較，結(jié)果表明含量測(cè)定結(jié)果一致，并對(duì)回流時(shí)間進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)考察，結(jié)果顯示3h內(nèi)已提取完畢。

經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，本含量測(cè)定方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確，可用于二陳湯的質(zhì)量控制。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)[S].北京∶化學(xué)工業(yè)出版社,2005∶132.

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.14.105

：1672-2779（2012）-14-0152-02

：楊燕平

2012-05-11）