高會(huì)霞 劉玉珍

自身免疫性肝病是一組病因和發(fā)病機(jī)理尚不完全清楚、但多數(shù)認(rèn)為和自身免疫有關(guān)的肝臟疾病，臨床常見的主要有自身免疫性肝炎(AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)及原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC).早期診斷及治療對(duì)這些疾病發(fā)展及預(yù)后至關(guān)重要，而實(shí)驗(yàn)室檢查特別是自身抗體檢查對(duì)這些疾病的診斷有重要意義。本研究對(duì)我院2914 份自身抗體檢驗(yàn)結(jié)果并結(jié)合臨床進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2007年10月至2010年10月我醫(yī)院門診及住院就診肝病患者2914 例送檢標(biāo)本，并對(duì)自身抗體陽(yáng)性529病例的查閱臨床資料。乃入病例中，男139例，女390例;平均年齡(49±15)歲;診斷為PBC的61例和AIH的57例患者均符合美國(guó)肝病學(xué)會(huì)2000年版PBC和AIH診療指南。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)患者外周血自身抗體及其滴度:采用德國(guó)歐蒙實(shí)驗(yàn)診斷公司肝臟馬賽克，間接免疫熒光法檢測(cè)患者外周血自身抗體:抗核抗體(ANA)、抗線粒體抗體(AMA)、抗平滑肌抗體(ASMA)、抗肝腎微粒體抗體(LKM)、，抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型抗體(LC-1)、抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)，抗線粒體抗體(AMA)-M2亞型，。待檢血清自1:100起稀釋，與組織細(xì)胞孵育30分鐘;加入異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的抗體結(jié)合30分鐘;洗片、封片后熒光顯微鏡觀察結(jié)果。組織或細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)特異性綠色熒光、血清稀釋度〉1∶100為陽(yáng)性。

1.2.2 ELISA法檢測(cè)全部血清的病毒學(xué)肝炎指標(biāo):HbsAg、抗-HBs、HbeAg、抗-HBe、抗-HBc、HAVIgM、HCVIgG、HEVIgM、CMV-IgM、EB-IgM等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率進(jìn)行描述，應(yīng)用四格表χ2檢驗(yàn)，P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2 結(jié)果

2.1 2714 份臨床送檢標(biāo)本中肝病相關(guān)自身抗體檢測(cè)結(jié)果自身抗體陽(yáng)性472例，陽(yáng)性率17.4%，抗核抗體(ANA)陽(yáng)性418例，陽(yáng)性率15.4%，抗線粒體抗體(AMA)陽(yáng)性124例，陽(yáng)性率4.57%，抗平滑肌抗體陽(yáng)性91例，陽(yáng)性率3.35%，抗肝腎微粒體抗體(LKM)陽(yáng)性12例，陽(yáng)性率0.59%，抗肝細(xì)胞膜抗體陽(yáng)性(LMA)8例，陽(yáng)性率0.29%，抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型抗體(LC-1)陽(yáng)性5例，陽(yáng)性率0.18%，抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)陽(yáng)性3例，陽(yáng)性率0.11%，2914 例送檢標(biāo)本中診斷為AIH 59例，檢出率為2.17%，診斷為 PBC 61例，檢出率為2.24%。自身抗體陽(yáng)性患者74.57%診斷為病毒性肝炎及相關(guān)疾病。見表1。

表1 472例不同肝病患者自身抗體檢測(cè)結(jié)果 例(%)

2.2 不同肝病患者自身抗體與臨床診斷的關(guān)系 PBC組和AIH組血清中各種自身抗體陽(yáng)性率及滴度明顯高于其他肝病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.01)。77.0%的PBC患者 ANA陽(yáng)性，滴度均為1∶320以上，而且PBC患者中73.8%的AMAM2亞型陽(yáng)性;98.3%的AIH患者ANA陽(yáng)性，滴度均為1∶320以上，在AIH中可見23.7%的ASMA陽(yáng)性，且98%熒光模型為滴度大于1∶320的抗肌動(dòng)蛋白型，并可見20.3%的LKM、8.5%的LC-1、3.4%的LSP抗體陽(yáng)性。在其他肝病中多見ANA抗體陽(yáng)性，且多為低滴度。見表1。

2.3 AIH和PBC的熒光模型 ANA的核型特征顯著，抗核模型抗體在PBC中的比例51.1%顯著高于在AIH中比例6.9%，AIH中多以顆粒型、著絲點(diǎn)型、以及二者的混合核型常見。見圖 1、表 2。

圖1 ANA在AIH與PBC中的熒光模型

表2 ANA陽(yáng)性的AIH和PBC患者的熒光模型例(%)

2.4 ANA檢測(cè)陽(yáng)性滴度≥1∶320、1∶100及陰性乙型肝炎患者肝功能比較 ANA檢測(cè)陽(yáng)性滴度≥1∶320乙型肝炎患者與滴度1∶100及ANA陰性乙型肝炎患者ALT AST ALP GGT之間均數(shù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 ANA檢測(cè)陽(yáng)性滴度≥1∶320、1∶100及陰性乙型肝炎患者肝功能指標(biāo)比較 U/L

表3 ANA檢測(cè)陽(yáng)性滴度≥1∶320、1∶100及陰性乙型肝炎患者肝功能指標(biāo)比較 U/L

ALT AST GGT ALP TBIL ALB ANA陽(yáng)性≥1∶320 512±47 312±15 411±287 504±371 58±35 32±9類別187±21 117±33 92±61 142±73 63±37 33±10 ANA陽(yáng)性1∶100 212±13 110±26 88±55 139±67 53±46 31±11 ANA陰性

3 討論

近年來，隨著自身抗體的檢測(cè)越來越受到臨床及實(shí)驗(yàn)室的重視，臨床醫(yī)生對(duì)自身免疫性肝病認(rèn)識(shí)程度明顯提高，相繼有文章報(bào)道，但對(duì)于自身免疫性肝病的發(fā)病率及患病率的報(bào)道較少。本研究連續(xù)收集我院門診及住院就診肝病患者2914 例送檢標(biāo)本，具有一定的參考價(jià)值。

從查閱到的529例患者的臨床資料分析，AIH患者59例，檢出率為2.17%，其中ANA陽(yáng)性率最高(58/59)98.3%，且滴度大于1∶320，可見ANA的檢測(cè)在AIH的診斷中的重要性。未發(fā)現(xiàn)ANA較特定的熒光模型，表明ANA單個(gè)抗體無診斷價(jià)值。在AIH中可見23.7%的ASMA陽(yáng)性，且98%熒光模型為滴度大于1∶320的抗肌動(dòng)蛋白型(抗-actin)，其他肝病患者中ASMA陽(yáng)性率低，且多為低滴度?？梢姼叩味鹊目筧ctin是Ⅰ型AIH的特異性標(biāo)志，與報(bào)道一致，故臨床上開展抗actin抗體檢測(cè)能增加Ⅰ型AIH的診斷率。LKM是Ⅱ型AIH的標(biāo)志性抗體，本組資料中LKM陽(yáng)性率(12/59)20.3%，顯著高于其他肝病，因此檢測(cè)LKM可提高ANA陰性的AIH患者診斷率。LMA陽(yáng)性率(8/59)13.6%，LC-1陽(yáng)性率(5/59)8.5%，LSP陽(yáng)性率(3/59)3.4%，這幾種抗體是Ⅱ型AIH另三個(gè)標(biāo)志性抗體，對(duì)AIH的診斷具有較高的特異性。

本研究中PBC的檢出率為2.24%，AMA陽(yáng)性是本病最重要的免疫學(xué)診斷指標(biāo)，AMAM2亞型為 PBC 特異性抗體［1，2］，通過檢測(cè)AMA-M2可早期發(fā)現(xiàn)PBC［3］。本資料61例 PBC患者中AMAM2亞型的陽(yáng)性率是74%，在其他肝病中未見AMAM2亞型陽(yáng)性，說明M2抗體對(duì)PBC診斷最具特異性，與國(guó)內(nèi)外的報(bào)道一致［4］。PBC患者出現(xiàn)的ANA的陽(yáng)性率為77%，其主要熒光模型中為核膜型(51.1%)、著絲點(diǎn)型(21.1%)，并顯著高于其他肝病，可見ANA熒光模型分析對(duì)AMA陰性的PBC有相當(dāng)重要的意義。

本研究結(jié)果還提示病毒性肝炎(HBV、HCV、HEV等)可見低滴度(1∶100)的 ANA、ASMA、AMA，高滴度少見，可見低滴度自身抗體對(duì)自身免疫性肝病無明確診斷意義。對(duì)于病毒性肝炎患者臨床查出病毒指標(biāo)后，不再對(duì)病人進(jìn)行自身抗體檢測(cè)，而明確此次發(fā)病原因是自身免疫性疾病并發(fā)了病毒感染還是病毒性肝炎發(fā)病是非常重要的，通常高滴度自身抗體的存在與自身免疫性疾病密切相關(guān)［4，5］。本文比較了 ANA滴度≥1∶320、1∶100 及陰性乙型肝炎患者肝功能，發(fā)現(xiàn) ANA≥1∶320陽(yáng)性乙型肝炎患者的ALT、AST、ALP GGT明顯高于ANA 1∶100及陰性乙型肝炎患者，提示病毒感染過程中自身免疫反應(yīng)加重了患者肝損傷［6］，而臨床上治療兩種疾病方法不同，如將ANA≥1∶320陽(yáng)性乙型肝炎患者進(jìn)行抗病毒治療，可能更加增強(qiáng)自身免疫性細(xì)胞，將會(huì)加重原有病情。因此在為患者進(jìn)行抗病毒治療前，需進(jìn)行自身抗體及滴度檢測(cè)以實(shí)施有針對(duì)性的個(gè)體治療［7，8］。

綜上所述，自身抗體檢測(cè)不僅對(duì)自身免疫性肝病的臨床診斷、鑒別診斷、治療的具有重要意義，對(duì)其他抗病毒治療的乙肝患者進(jìn)行自身抗體檢測(cè)有助于疾病的治療。

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