程 敏 葉小弟 鄭高利 浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 杭州 310013

朱選文 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院

改善淀粉耐量，降低餐后血糖水平是糖尿病和糖耐量異常患者重要治療方法。阿卡波糖通過抑制淀粉消化酶活性可顯著降低餐后血糖水平。研究報(bào)道一些中藥成分也可通過相似途徑改善糖耐量，降低餐后血糖。川厚靈片由黃芪、桑葉和苦瓜等中藥組成，根據(jù)浙江湖州已故國家級(jí)名老中醫(yī)朱古亭主任醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)方改良而成，臨床用于治療糖尿病。本實(shí)驗(yàn)觀察川厚靈片對(duì)正常和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠淀粉耐量的改善作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥品與試劑 川厚靈片（干浸膏），深棕色粉末，由湖州中草醫(yī)藥開發(fā)應(yīng)用研究所提供。阿卡波糖片，拜耳醫(yī)藥保健有限公司生產(chǎn)，批號(hào)116789。葡萄糖測(cè)定試劑盒（GOP-PAP法），寧波賽克生物技術(shù)有限公司。四氧嘧啶，SIGMA生產(chǎn)，Lot 12k1460。血清蛋白沉淀劑（配方：Na2HPO410g、Na2WO410g、Na?Cl 9g、1N HCl 125mL蒸餾水配制1000mL），自配。

1.2 儀 器 BA-815型半自動(dòng)生化分析儀，上海三科儀器有限公司生產(chǎn)。

1.3 動(dòng) 物 ICR小鼠，雄性，清潔級(jí)，由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證：SCXK（浙）2008-0033。

1.4 血糖測(cè)定 剪鼠尾尖采全血50μL，加到150μL血清蛋白沉淀劑中，混勻，離心分離無蛋白血濾液，葡萄糖測(cè)定試劑盒測(cè)血糖含量。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用組間t檢驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 川厚靈片對(duì)正常小鼠淀粉負(fù)荷糖耐量的影響ICR小鼠50只，雄性，體質(zhì)量24～28g，禁食6h后斷尾采血測(cè)血糖濃度，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、阿卡波糖組、川厚靈片大、中、小劑量組，每組10只。即日起按正常對(duì)照組給予自來水，阿卡波糖組給予阿卡波糖100mg/kg，川厚靈片大、中、小劑量組分別給予10mL/kg川厚靈供試液10、5和2.5g/kg灌胃，連續(xù)給藥7天。末次給藥后24h，空腹（禁食6h）斷尾采血測(cè)血糖濃度，再灌胃給藥1次，0.5h后各組均給予淀粉2.5g/kg灌胃，在給淀粉后0.5、1、2和3h分別尾靜脈采血測(cè)血糖，計(jì)算血糖曲線下面積AUC（1/4A+1/2B+3/4C+D+1/2E mmol·h/L，A、B、C、D、E分別為給淀粉后0、0.5、1.0、2.0和3.0h血糖值）和增加的AUC（ΔAUC=AUC-C淀粉負(fù)荷前×3h）[1]。

表1 川厚靈片對(duì)正常小鼠淀粉負(fù)荷糖耐量的影響（） mmol/L

表1 川厚靈片對(duì)正常小鼠淀粉負(fù)荷糖耐量的影響（） mmol/L

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組 別正常對(duì)照組阿卡波糖組川厚靈組n/只10 10 10劑量/（g/kg）給淀粉后給淀粉前5.51±0.58 5.45±0.61 5.58±0.83 5.53±0.86 5.37±0.42 0.1 10 5 2.5 0.5h 9.49±1.49 5.92±0.73**5.45±0.74**5.90±0.99**6.69±1.21**1.0h 9.22±1.64 6.10±0.78**6.07±0.61**6.90±0.97**7.92±1.53 2.0h 6.70±0.67 5.73±0.62**6.72±0.52 6.41±1.00 6.49±1.15 3.0h 5.05±0.66 5..7±0.58 5.76±0.90 4.35±0.91 4.46±0.72

圖1 川厚靈片對(duì)正常小鼠淀粉負(fù)荷血糖曲線下面積的影響（n=10）

表1和圖1結(jié)果顯示，川厚靈片能明顯降低正常小鼠給淀粉后0.5和1.0h的血糖水平，降低血糖峰值、推遲達(dá)峰時(shí)間，降低血糖曲線下面積AUC和因淀粉負(fù)荷后增加的血糖曲線下面積ΔAUC，劑量關(guān)系明確。

2.2 川厚靈片對(duì)四氧嘧啶性糖尿病模型小鼠淀粉負(fù)荷糖耐量的影響 ICR小鼠80只，雄性，體質(zhì)量22～24g，其中10只尾靜脈注射生理鹽水，另70只尾靜脈注射四氧嘧啶80mg/kg，7天后剪尾尖取血測(cè)飽腹血糖。正常動(dòng)物單獨(dú)成組，模型動(dòng)物選取血糖值在30.0～50.0mmol/L小鼠50只并結(jié)合體質(zhì)量狀態(tài)隨機(jī)分為模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、川厚靈片大、中、小劑量組。正常、模型對(duì)照組給予自來水，陽性對(duì)照組給予阿卡波糖100mg/kg，川厚靈片大、中、小劑量組給予10mL/kg川厚靈供試液10、5和2.5g/kg，灌胃，連續(xù)給藥23天。末次給藥后24h，空腹（禁食5h）斷尾取血測(cè)血糖，再灌胃給藥1次，0.5h后灌胃給予淀粉2.5g/kg，在給淀粉后0.5、1、1.5、2和3h測(cè)血糖值，同法計(jì)算血糖AUC和ΔAUC。

表2 川厚靈片對(duì)糖尿病小鼠淀粉負(fù)荷耐量的影響（） mmol/L

表2 川厚靈片對(duì)糖尿病小鼠淀粉負(fù)荷耐量的影響（） mmol/L

注：與模型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組 別正常對(duì)照組模型對(duì)照組阿卡波糖組川厚靈組n/只10 10 10 10劑量/（g/kg）給淀粉后0.1 10 5 2.5給淀粉前7.06±0.62 21.45±1.91 19.88±1.82 20.78±3.76 21.56±0.97 22.36±1.30 0.5h 11.52±1.51 26.46±1.84 22.79±1.88**21.43±2.73**23.63±1.26**24.26±1.71**1.0h 10.66±1.15 29.36±1.00 24.11±1.46**22.31±1.85**25.33±1.63**27.13±2.06**1.5h 10.15±1.03 30.08±1.81 26.35±1.61**23.47±2.12**26.69±1.08**28.29±2.49 2.0h 9.04±1.38 28.77±1.66 27.05±1.04 22.34±2.69**27.01±1.94 29.44±3.07 3.0h 7.71±0.96 26.71±1.92 25.08±1.79 22.08±3.25**25.69±2.77 27.24±2.85

表2和圖2結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組比較，川厚靈片各劑量組均能明顯降低小鼠淀粉負(fù)荷后的血糖峰值，AUC和ΔAUC也顯著降低，劑量關(guān)系明確。

3 討論

圖2 川厚靈片對(duì)糖尿病小鼠淀粉負(fù)荷血糖曲線下面積的影響（n=10）

糖耐量低減（impaired glucose tolerance，IGT），是指空腹血糖正常而餐后血糖介于正常人與糖尿病患者血糖值之間的一種代謝狀態(tài)，是糖耐量異常的表現(xiàn)形式[2]。IGT目前還不能視為一種疾病，卻是一種可發(fā)展為2型糖尿病和心腦血管疾病的高危狀態(tài)，其發(fā)病率與2型糖尿病相仿或更高。中國IGT人群向糖尿病轉(zhuǎn)化的百分比每年達(dá)8%～11%[3]。因此，在IGT階段進(jìn)行早期干預(yù)，可最大限度減少IGT向DM發(fā)展，降低心腦血管疾病的危險(xiǎn)性。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，川厚靈片2.5、5.0和10.0g/kg劑量均能顯著降低小鼠淀粉負(fù)荷后的血糖水平和血糖曲線下面積，延遲血糖達(dá)峰時(shí)間，劑量關(guān)系良好，推測(cè)其可能通過抑制淀粉分解和抑制葡萄糖吸收途徑調(diào)節(jié)糖耐量。有關(guān)川厚靈片的有效成分、作用調(diào)控機(jī)制還需進(jìn)一步的研究。

［1］玄光善，潘士佳，南姬.桑葉有效成分降糖作用研究［J］.食品科學(xué)，2011，32（7）:323-326.

［2］楊春花，彭巧君.糖耐量減低癥干預(yù)措施的研究進(jìn)展［J］.護(hù)理研究，2010，24（6）:1411-1413.

［3］劉椏，陳秋.糖調(diào)節(jié)受損的病因病機(jī)及證治研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2011，37（7）:1470-1471.