郝智慧，張瑞麗，劉元元，邱 梅，沈 巍，龐云露，崔亮亮

(1.青島農業(yè)大學化學與藥學院，山東青島 266111;2.青島康地恩藥業(yè)股份有限公司，山東青島 266061)

臨床調查研究發(fā)現(xiàn)，目前對寵物耳道真菌感染具有良好治療效果的藥物極少。為豐富臨床用藥，我們研制了新的復方制劑——復方氟康唑軟膏，主要成份為三唑類抗真菌藥物氟康唑、氨基糖苷類抗生素硫酸新霉素和腎上腺糖皮質激素曲安奈德［1－3］。該組方能夠有效控制動物耳道撓癢癥，使用于皮膚及耳道表面，可有效舒解炎癥反應及止癢。為了解新制劑在外用給藥過程中對皮膚的刺激性，用家兔進行了如下試驗。

1 材料與方法

1.1 實驗器具 剪毛剪、砂紙、紗布、膠帶等。

1.2 實驗藥物 受試藥品:復方氟康唑軟膏，批號20081021，由青島康地恩藥業(yè)股份有限公司提供，淡黃色軟膏。對照藥品:復方制霉菌素軟膏(Oridermyl)，批號200704121，法國威隆制藥。

1.3 實驗動物 成年健康白色家兔8只(2 kg左右)，雌雄各半，由揚州大學醫(yī)學院提供。

1.4 試驗方法

1.4.1 家兔皮膚準備［4］給藥前24 h將背部兩側去毛，范圍約占整個體表面積的10%(約150 cm2)，去毛后24 h檢查去毛皮膚。家兔皮膚分為兩種情況，一種為皮膚無損傷，該類家兔做完整性皮膚試驗組;一種為皮膚有損傷，將去毛消毒皮膚用砂紙磨擦，以微滲血為度，兩側破損程度基本一致，此類家兔做破損性皮膚試驗組。

1.4.2 試驗方法 試驗采用左右側自身對比，一側為對照組，另一側為試藥組。將受試物1 g涂于左側受試區(qū)，右側涂等量的復方制霉菌素軟膏或滴生理鹽水作為對照，并采用無刺激紗布、膠布等固定，每只動物單籠飼養(yǎng)。給受試藥物24 h后，用溫水或生理鹽水洗滌清洗涂抹部位，去除殘留受試物，分別觀察記錄去除受試物后1、24、48、72 h涂抹部位有無紅腫、水腫等反應。涂抹部位按表1進行評分［5］，記錄各次評分值。

1.4.3 結果評價標準［5］結果評價標準見表2。根據(jù)平均分值評價受試物的刺激強度、恢復程度和時間。

2 結果與分析

皮膚刺激性試驗的結果見表3?？梢钥闯觯瑥头椒颠蜍浉鄤┡c對照品對完好皮膚與損傷皮膚的平均反應分值無明顯差異。對正常皮膚組的動物，復方氟康唑軟膏劑與對照藥的平均反應分值均低于0.5分，表明兩者對完整皮膚無刺激性。對破損皮膚組動物，復方氟康唑軟膏劑與對照藥的平均反應分值在用藥后1 h和24 h均大于0.5分，但低于3.0分，表明兩者對破損皮膚有輕度刺激性;但給藥48 h后，反應平均分值均低于0.5分，這種刺激性消失。

表1 皮膚刺激性反應評分標準

表2 皮膚刺激性強度評分標準

實驗過程中家兔無任何中毒反應以及死亡情況。皮膚毛發(fā)以及眼和粘膜、呼吸、活動、循環(huán)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)活動等均正常。

表3 復方氟康唑軟膏劑對動物皮膚刺激反應的分值

3 討論

本品為氟康唑、硫酸新霉素和曲安奈德三藥組方的軟膏制劑，國內外尚未有這三種成分的組方制劑。其中，氟康唑為三唑類抗真菌藥物，1990年在美國上市，抗菌譜與酮康唑相似，抗菌活性比酮康唑強，其口服生物利用度高，藥物相互作用少，毒副作用?。?］。臨床應用多年，主要用于各種真菌感染、隱球菌病、真菌性腦膜炎、肺部真菌感染、腹部感染、泌尿道感染及皮膚真菌感染等。李建等［7］進行了氟康唑乳膏劑對兔子皮膚和角膜的刺激性研究，發(fā)現(xiàn)皮膚未產生發(fā)紅、發(fā)疹、水泡等現(xiàn)象，角膜無充血、雙眼無流淚、羞明及家兔無騷動不安等現(xiàn)象，即該乳劑對皮膚和角膜無刺激性。硫酸新霉素為一種氨基糖苷類抗生素，對引起皮膚感染的葡萄球菌屬、大腸桿菌屬等具有較好的效果，局部給藥可治療子宮內膜炎及耳、眼、皮膚感染。郭維等［8］對比觀察了復方硫酸新霉素滴眼液、5%辣椒酊、生理鹽水局部應用、單次給藥和連續(xù)給藥1周對家兔眼的刺激性。結果表明，復方硫酸新霉素滴眼液單次及多次給藥對兔眼均無明顯影響，雙眼角膜透明，無混濁，虹膜紋理清晰，結膜無充血、水腫、分泌物，表明復方硫酸新霉素滴眼液臨床應用是安全的。曲安奈德為長效的腎上腺糖皮質激素，其抗炎作用強而持久，可供局部用藥。高逢喜［9］研究了復曲膏(乳膏中主要成分為醋酸曲安奈德和氧氟沙星)對兔子的皮膚刺激性，結果顯示，兔子左右側用藥局部均無紅斑及水腫等不良現(xiàn)象。

此次皮膚刺激性試驗結果顯示，復方氟康唑軟膏對完整皮膚無刺激性，對破損皮膚組在24 h內有輕度刺激，但48h后刺激作用消失。試驗表明，復方氟康唑軟膏對皮膚的刺激性較小，與市面上治療真菌感染的藥物復方制霉菌素軟膏相比，對正常及破損皮膚組的刺激性相似，可作為一種新型的外用制劑在臨床中推廣應用。

［1］張士霞，王洪斌，肖建華.國內犬皮膚病流行現(xiàn)狀及診治方法［J］.吉林畜牧獸醫(yī)，2008，29(1):61 －62.

［2］Ram S U，Sanjay J，Neelima S，et al.Synthesis of novel substituted tetrazoles having antifungal activity［J］.European Journal of Medicinal Chemistry，2004，39(3):572 －579.

［3］滕 慧，張亞雄.新霉素研究進展［J］.三峽大學學報，2008，30(2):95－98.

［4］馮秀娟，李忠生，李 冰.皮特芬溶液對家兔皮膚刺激性試驗［J］.中國動物檢疫，2007，24(1):41.

［5］中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.新藥臨床前研究指導原則匯編(藥學;藥理學;毒理學)［S］.1993:206.

［6］Sheehan D J，Hitchcock C A，Sibley C M.Current and emerging azole antifungal agents［J］.Clin Microbiol Rev，1999，12(1):40－79.

［7］李建平，劉震東，馮先義，等.氟康唑乳膏劑的制備及質量標準研究［J］.中國藥學雜志，2002，37(10):791 －792.

［8］郭 維，姜 波，范光杰.復方硫酸新霉素滴眼液的安全性研究［J］.中國健康月刊，2011，30(1):141 －142.

［9］高逢喜.復曲膏的研制及臨床應用研究［D］.武漢:華中科技大學，2004:20－21.