張建群

（河北省巨鹿縣醫(yī)院外科，河北巨鹿 055250）

EAS混合溶劑體外溶石的研究

張建群

（河北省巨鹿縣醫(yī)院外科，河北巨鹿 055250）

目的探討純乙基叔丁醚，氨羧混合液以及5%氨氧化鈉（EAS）混合溶劑分別對人膽道結(jié)石的直接溶解作用。方法通過體外對比試驗(yàn)表明，EAS混合溶劑對常見類型的各種膽道結(jié)石有很強(qiáng)的快速溶解作用。結(jié)果0.2g左右的結(jié)石在4h內(nèi)體外溶石率可達(dá)90%～100%。結(jié)論該溶劑有可能成為一種實(shí)用的膽石快速接觸性溶劑。

膽結(jié)石；溶劑；體外研究

本研究以尋求適合溶解各種結(jié)石的溶石劑為目的，經(jīng)對比實(shí)驗(yàn)選擇了乙基叔丁醚（E）、氨羧混合溶劑（A）、5%氫氧化鈉（S）混合溶石劑，EAS混合溶劑對各類結(jié)石均有較強(qiáng)的溶解性，有可能成為一種實(shí)用的膽道結(jié)石快速直接溶石劑［1-2］。

1 資料與方法

1.1 材料：結(jié)石取自手術(shù)患者。根據(jù)結(jié)石成分分析，選擇固醇型（固醇含量＞60%），色素型（膽紅素及其鹽含量＞60%），混合型（固醇及色素含量各占50%）。乙基叔丁醚（ethyl tertbutyl ether，ETBE）M=102.17，n2D0=1.374 6 bp=74℃。中藥雞內(nèi)金汁

10mL（取新鮮雞內(nèi)金汁50mg，清洗干凈，50℃水浸泡4h，壓榨取汁包裝，蒸汽滅菌器消毒10min備用）。氨羧混合溶液，分別將氨羧化合物乙二胺四乙酸二鈉（ethylene diamine teraacetic acid，EDTA）、乙 二 醇 乙 醚 二 胺 四 乙 酸［ ethylene bis（oxgethyleneitriol）acid，EGTA］、氨三乙酸（NTA）與吐溫-80、二甲基亞砜等按一定比例混合，用蒸餾水配成水溶液即可。5%氫氧化鈉（NaOH）溶液，按質(zhì)量百分比配成水溶液。

1.2 EAS混合溶劑的配制：利用正交設(shè)計(jì)法（4h）以溶石率為優(yōu)化指標(biāo)，選擇混合溶劑中各組的最佳配比。

1.3 體外溶石實(shí)驗(yàn)：將直徑相似，質(zhì)量相似（0.2g左右）的各種結(jié)石，分別置入50mL梨形瓶中，加入等量的溶石劑，裝上球形冷凝管，置入水浴箱中，35℃恒溫，間斷式振蕩，保持4h將梨形瓶中的溶解物過濾，濾渣自然干燥稱質(zhì)量，計(jì)算溶石率。

2 結(jié) 果

2.1 ETBE的溶石效果：用ETBE分別對固醇型、色素型、混合型結(jié)石進(jìn)行溶石研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，固醇型結(jié)石4h溶石率達(dá)90% ～100%，混合型Ⅰ60%～70%，混合型Ⅱ30%～40%，色素型20%～30%；混合型Ⅰ中固醇含量大于混合型Ⅱ，混合型Ⅱ色素含量高。

2.2 氨羧混合溶液的溶石效果：用EDTA氨羧混合液對各類結(jié)石進(jìn)行溶解，結(jié)果表明，固醇型4h溶石率5% ～10%，混合型Ⅰ 20% ～30%，混合型Ⅱ0%～60%，色素型80%～90%。

2.3 EAS混合溶劑最佳比例選擇：根據(jù)2.1，2.2的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將一定量的ETBE、氨羧混合液、5%氫氧化鈉溶液組成的混合溶劑進(jìn)行溶石研究，由于影響溶石的因素較多，采用L9（33）正交實(shí)驗(yàn)法，固定反應(yīng)溫度35℃，反應(yīng)時(shí)間4h，樣品用量0.2g左右（直徑相近），改變混合溶液中3種組分的用量，以溶石率為優(yōu)化指標(biāo)。表觀好條件為a3、b1、c3，其溶石率最高為92.5%，由K值最大分析的好條件為a2、b1、c3，正交表中無此條件，為此對其做對比試驗(yàn)，結(jié)果后者溶石率為79.79% 。故確定最佳條件為 a3（2ml 5%NaOH）、b1（1ml EDTA混合溶液）、c3（4ml ETBE），見表1。

表1 L9（33）正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4 EAS混合溶劑的溶石效果比較：利用上述實(shí)驗(yàn)得到的最佳溶石條件，對不同氨羧混合液進(jìn)行了對比實(shí)驗(yàn)，各種氨羧化合物組成的EAS混合溶劑對各類結(jié)石的溶石效率大小順序?yàn)镋GTA＞EDTA＞NTA。這與氨羧配位劑與鈣形成絡(luò)合物的平衡常數(shù)的大小順序是完全一致的。見表2。

表2 ETBE與不同氨羧混合溶液組成的溶石劑及溶石效果

3 討 論

膽道結(jié)石的溶石研究是近些年深受關(guān)注的課題，但長期以來未取得滿意的效果，直到20世紀(jì)70年代初，隨著膽汁理化特性等基礎(chǔ)研究的深入，膽結(jié)石溶石治療有了較大的發(fā)展［3-7］。我國醫(yī)務(wù)工作者為了尋找較好的溶石劑，曾先后對多種中藥及1%去氧膽酸鈉-EDTA-2Na單辛酯無機(jī)溶劑對膽結(jié)石進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)。近年來又采用了甲基正丁醚、復(fù)方甲基叔丁醚-二甲基亞砜等有機(jī)溶劑進(jìn)行溶石，結(jié)果都不理想，有的對固醇型結(jié)石溶解效果好，而對色素型結(jié)石只有25%～40%的溶解效果。對膽結(jié)石的各種類型的溶解沒有一個(gè)比較完整全面的報(bào)道。對膽結(jié)石患者膽汁與膽石中主要金屬離子的測定表明，膽固醇結(jié)石和色素型結(jié)石患者膽汁中鈣離子較正常高。氨羧配位劑是鈣的良好配位劑，ETBE是膽固醇結(jié)石的較強(qiáng)熔劑，我們將二者配成混合溶劑，對各種結(jié)石進(jìn)行溶石比較結(jié)果表明，對混合型溶石率達(dá)100%，對色素型結(jié)石溶解率達(dá)90%以上，均高于單純使用甲基叔丁醚，而且溶石劑pH為8.5與生理膽汁的pH一致，溶解后殘?jiān)?.5mm。

通過使用EAS混合溶劑對各類結(jié)石的溶解行為的對比，可得出如下結(jié)論：①ETBE是固醇型結(jié)石的良好溶劑，其溶石率可達(dá)90%～100%，不僅溶石率高且可減輕對膽囊黏膜的刺激；②EGTA混合溶液是色素型結(jié)石良好溶劑，其溶石率達(dá) 80% ～90%；③EAS混合溶劑中ETBE-EGTA混-S是各類結(jié)石的良好溶劑，對各類結(jié)石的溶石率分別為，固醇型 90.02%，混合型Ⅰ100.00%，混合型Ⅱ99.18%，色素型95.73%。其主要原因是混合溶劑中各組分可選擇性地溶解其易溶成分，氨羧混合物是鈣的良好絡(luò)合劑，尤其是配合5%NaOH溶液使其對膽紅素鈣具有很好的溶解性。ETBE對膽固醇及蛋白支架有良好的可溶性。因此，可獲得滿意的體外溶石實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

本研究在該溶石劑中加入雞內(nèi)金汁可提高固醇型結(jié)石的溶石效果，中藥學(xué)理論認(rèn)為雞內(nèi)金汁有化石作用，而且對膽道黏膜無刺激，是一種良好的輔助溶石的藥物。本研究目前只是體外溶石試驗(yàn)，在以后的研究過程中將對溶石劑進(jìn)行動物毒理實(shí)驗(yàn)以及人體毒理試驗(yàn)。通過該實(shí)驗(yàn)有望能對肝膽外科手術(shù)后膽道殘留結(jié)石溶解作出貢獻(xiàn)。

［1］孟平蕊，王永紅，楊春霞.正交實(shí)驗(yàn)法微機(jī)化及其在有機(jī)合成實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用［J］.山東建材學(xué)院報(bào)1994，8（3）：94-97.

［2］裴德凱，張蒞霞傅湘琦，等.黑色結(jié)石的成分的掃描結(jié)構(gòu)［J］.中華消化雜志，1983，3（2）：98.

［3］田立新，張惠東，李均樂，等.白笈加甲基叔丁醚灌注溶解膽固醇結(jié)石的研究［J］.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2009，26（5）：606-607.

［4］項(xiàng)正心，張麗麗，陳建孟，等.好氧顆粒污泥降解甲基叔丁醚的實(shí)驗(yàn)研究［J］.環(huán)境污染與防治，2008，30（11）：66-69，74.

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（本文編輯：劉斯靜）

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1007-3205（2012）11-1309-03

2012-03-16；

2012-05-21

張建群（1954-），男，河北巨鹿人，河北省巨鹿縣醫(yī)院主治醫(yī)師，從事肝膽外科疾病診治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.11.028