材料與方法

試驗(yàn)螯蝦與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取活潑健壯的螯蝦個(gè)體作為實(shí)驗(yàn)材料，體重約20g重量差為0.2g。選用37個(gè)1m2的水泥池分為12個(gè)試驗(yàn)組別，每組3個(gè)水泥池，另外一個(gè)水池作為對(duì)照組，水深約10㎝，模擬稻田養(yǎng)殖環(huán)境，每池放入一定量小浮萍，水花生，水池角落放入適量泥土，每池放入蝦15～20只，試驗(yàn)10天，依次向試驗(yàn)組⑴～⑿水池投入阿維菌素（殺蟲(chóng)劑）、稻散·毒死蜱（殺蟲(chóng)劑）、噻嗉酮異丙威（殺蟲(chóng)劑）、芐·丁(除草劑)、芐·乙 (除草劑)、氯吡·甲磺隆(除草劑)、甲霜·惡毒靈(殺菌劑)、使百克(殺菌劑)、井岡·烯唑醇 (殺菌劑)、莊豐(生長(zhǎng)劑)、甲天下衛(wèi)士(生長(zhǎng)劑)、天豐素(生長(zhǎng)劑)。

試驗(yàn)農(nóng)藥用量

芐乙施用濃度為：0.05g/m2，芐丁施用濃度為：0.15g/ m2，氯吡·甲磺隆的施用濃度為： 20.03ml/ m2，井岡-稀唑醇施用濃度為：0.1507g/ m2 ，使百克施用濃度為：0.1530g/ m2，甲霜-噁霉靈施用濃度為：0.9990 g/ m2 ，莊豐施用濃度為：0.4620g/ m2， 甲天下衛(wèi)士的施用濃度為：0.2738g/m2，天豐素的施用濃度為：0.6522g/ m2，阿維菌素的施用濃度為：0.0210ml/ m2，稻散·毒死蜱的施用濃度為：0.5ml/ m2， 噻嗉酮異丙威的施用濃度為：0.05g/ m2。

樣品制備

每池取三只螯蝦，在冰盤中活體解剖 ，剔除附著物，然后剖開(kāi)， 取出全部肝胰臟、胃和腸道，用生理鹽水清洗胃和腸道內(nèi)容物，濾紙吸干表面水分后分別稱重。將肝胰臟、胃和腸道樣本稱重，然后剪碎，加入5倍體積(w/v)的預(yù)冷雙蒸水(4℃)，低溫條件下使用玻璃勻漿器制成勻漿后，勻漿液用高速冷凍離心機(jī)4500r/min ，4℃離心15 min；取上清液(即粗酶液)，用于測(cè)定蛋白酶、淀粉酶活力 (4℃保存， 24h內(nèi)測(cè)定完畢，或短期保存于-18℃低溫冰箱)。

消化酶測(cè)定

測(cè)定持續(xù)10d。隔天測(cè)一次，每次每池隨機(jī)取3只蝦。取蝦時(shí)間上午10點(diǎn)。

蛋白酶活力測(cè)定:采用酪蛋白為底物的福林—酚試劑顯色法。蛋白酶活性定義為:在一定的pH和溫度下，每min水解酪蛋白產(chǎn)生1€%eg酪氨酸為1個(gè)酶活力單位(€%eg/min)。

淀粉酶活力測(cè)定：采用淀粉—碘法，淀粉酶活性定義為：在37℃、30min和100mL酶液中的淀粉酶能完全水解淀粉10mg時(shí)為一個(gè)淀粉酶活力單位(€%eg/min)。

結(jié)果與分析

農(nóng)藥對(duì)克氏原螯蝦毒性的影響

由于幾個(gè)殺蟲(chóng)劑大多有軟殼現(xiàn)象，所以殺蟲(chóng)劑應(yīng)該會(huì)造成蝦軟殼。2號(hào)池稻散·毒死蜱和8號(hào)池 使百克經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)肝臟變?yōu)榈G色或褐色，是由于農(nóng)藥的施用對(duì)其造成了毒性影響。。施藥當(dāng)天偶爾下小雨，第2天多云，第3天小雨，后都是晴天，對(duì)消化酶活性有一定影像。

農(nóng)藥的持續(xù)時(shí)間對(duì)克氏原螯蝦消化酶活性的影響

克氏原螯蝦施用十二種農(nóng)藥后，可以看出芐乙對(duì)蛋白酶的影響是相當(dāng)大的并且殘留時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，且對(duì)蛋白酶是有抑制作用，效果比較穩(wěn)定；氯吡·甲磺隆對(duì)淀粉酶的影響比較大，在藥物施用后很快的會(huì)抑制淀粉霉的活性，殘留時(shí)間較長(zhǎng)；噻嗪酮對(duì)蛋白霉的活性影響非常大，下藥后蛋白活性馬上升高超常，達(dá)到60ug/min€?05之后又在3天內(nèi)驟然下降到21ug/min€?05，這個(gè)過(guò)程可能會(huì)造成蝦大量死亡；井岡-稀唑醇在4天內(nèi)會(huì)使蛋白酶上升到一個(gè)最高點(diǎn)然后有會(huì)在2天內(nèi)急劇下降到標(biāo)準(zhǔn)活性，這6天中可能會(huì)造成蝦大量死亡；使百克施用后會(huì)使蛋白酶降低到10ug/min€?05隨后有個(gè)緩慢上升下降的過(guò)程總體上對(duì)蝦的影響不大；甲霜-噁霉靈藥物使用后蛋白酶活性會(huì)急劇上升到一個(gè)至高點(diǎn)有會(huì)在4天內(nèi)下降到標(biāo)準(zhǔn)活性，后期比較平穩(wěn)。井岡-稀唑醇會(huì)導(dǎo)致淀粉酶很不穩(wěn)定并在第6天會(huì)使淀粉酶降低到300um/min，而且這個(gè)低谷會(huì)持續(xù)4天以上，對(duì)蝦的生長(zhǎng)影響較大；使百克前期變化不明顯到第6天后蛋白酶活性才會(huì)有逐漸下降反應(yīng)，這一期間蝦有充分的適應(yīng)時(shí)間；甲霜-噁霉靈對(duì)蝦淀粉酶的響相當(dāng)大，施用藥物后馬上會(huì)是淀粉酶活性上升到800ug/min，隨后4天內(nèi)有降低到300ug/min，之后抑制在300ug/min-500ug/min起伏，影響蝦的生長(zhǎng)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成大量死亡。莊豐對(duì)蛋白酶的影響是最大的但是其上升下降時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，蝦有充分的適應(yīng)時(shí)間，不會(huì)造成大量死亡現(xiàn)象；另兩種藥物波動(dòng)幅度不大，且緩沖時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)蝦的影響不大。滴滴神與莊豐對(duì)蝦淀粉酶的影響相當(dāng)大，施藥后就會(huì)使淀粉酶活性降低到200um/min左右，其后兩天內(nèi)又急劇上升到700um/min，應(yīng)急反應(yīng)可能會(huì)造成蝦大量死亡；田豐素基本無(wú)影響。

討論

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，殺蟲(chóng)劑與其他農(nóng)藥差異顯著，毒性較大，對(duì)生長(zhǎng)劑較敏感，但影響不大，說(shuō)明其毒性較小，而有些農(nóng)藥一般在3d才開(kāi)始急劇下降或上升，故克氏原鰲蝦對(duì)其具有一定的耐受性。其呈現(xiàn)不同的規(guī)律，表明農(nóng)藥在克氏原鰲蝦體內(nèi)的分布、激活和解毒等過(guò)程比較復(fù)雜，同一種蝦對(duì)于不同農(nóng)藥的敏感性各不相同，不同農(nóng)藥的持續(xù)時(shí)間對(duì)消化酶的活性的影響也各不相同。最后結(jié)果：不同蝦由于生理?xiàng)l件不同，對(duì)同一種農(nóng)藥的敏感性各不相同，同一種農(nóng)藥對(duì)不同蝦和同種蝦的不同發(fā)育階段的毒性也布相一致。因此，在稻田養(yǎng)蝦里對(duì)水稻用藥防治病蟲(chóng)要嚴(yán)格掌握藥物品種、濃度和使用方法， 才能增加養(yǎng)蝦產(chǎn)量。

（作者單位：長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院）