李健,王雯,孫小紅

摘要：采用溶劑提取法和水蒸氣蒸餾法提取黃秋葵（Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ L.）種子中的脂肪酸和揮發(fā)油，運(yùn)用氣相色譜－質(zhì)譜（ＧＣ－ＭＳ）聯(lián)用儀進(jìn)行分析。結(jié)果表明，從黃秋葵種子揮發(fā)油中共鑒定出１１種化合物，其中正癸烷含量最高，達(dá)２１．１８０％；從黃秋葵種子脂肪酸中鑒定出１３種脂肪酸，主要是不飽和脂肪酸，含量最高的為亞油酸，占總量的４０．２２５％。黃秋葵種子中的揮發(fā)油和脂肪酸成分值得進(jìn)一步研究。

關(guān)鍵詞：黃秋葵（Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ L.）種子；揮發(fā)油；脂肪酸；ＧＣ－ＭＳ

中圖分類號：Ｒ２８４．２；Ｏ６５７．７＋１文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）05－1006-02

Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｏｉｌ ａｎｄ Ｆａｔｔｙ Acid ｆｒｏｍ Ｓｅｅｄ ｏｆ

Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ

ＬＩ Ｊｉａｎ，ＷＡＮＧ Ｗｅｎ，ＳＵＮ Ｘｉａｏ－ｈｏｎｇ

（Ｙｕａｎｐｅｉ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｓｈａｏｘｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｏｘｉｎｇ ３１２０００， Zhejiang， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ａｎｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｅｅｄ ｏｆ Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ L.（ｏｋｒａ ｓｅｅｄ） ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｓｔｅａｍ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｏｌｖｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＧＣ－ＭＳ． １１ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｏｋｒａ ｓｅｅｄ， ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ ｄｅｃａｎｅ ｈａｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｃｏｎｔｅｎｔ （２１．１８０％）， ａｎｄ １３ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ， ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｈａｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｃｏｎｔｅｎｔ （４０．２２５％）． Ｆｕｒｔｈｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｔｈｅ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｉｎ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ａｎｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｏｆ ｏｋｒａ ｓｅｅｄ ｗａｓ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｓｅｅｄ ｏｆ Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ L.； ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ； ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ； ＧＣ－ＭＳ

黃秋葵（Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｌ．）是錦葵科秋葵屬一年生草本植物，原產(chǎn)于非洲，目前在我國南北方均有黃秋葵的分布與栽培。黃秋葵是菜、藥、花兼用型植物，果實(shí)營養(yǎng)豐富，具有顯著的保健作用。美、英、法、日等國都把它列入新世紀(jì)最佳綠色食品名錄之中；美國人還給了它一個(gè)更容易被記住的名字——“植物偉哥”。

目前對黃秋葵的開發(fā)應(yīng)用主要集中在果實(shí)上［１，２］，但黃秋葵種子的應(yīng)用前景也非常重要，國外研究發(fā)現(xiàn)成熟黃秋葵種子烤熟磨成細(xì)粉，其味芳香，沖調(diào)溶解快，可作咖啡添加劑或代用品［３］。黃秋葵種子含有豐富的脂肪酸［４］，包括豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、亞麻酸、亞油酸等，含有較高的脂肪量，能直接用來生產(chǎn)秋葵子油，可望用來緩解當(dāng)今世界的油源緊張問題。

為進(jìn)一步明確國內(nèi)引種的黃秋葵種子揮發(fā)油和脂肪酸的組成，本研究對其揮發(fā)油和脂肪酸成分進(jìn)行了提取和衍生化處理，并用ＧＣ－ＭＳ聯(lián)用技術(shù)對其揮發(fā)油和脂肪酸衍生物進(jìn)行了測定，為綜合利用黃秋葵種子提供依據(jù)。

１材料與方法

１．１試驗(yàn)儀器

６８９０Ｎ／５９７５ＭＳＤ氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）；ＲＥ－５２ＡＨ旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；水蒸氣蒸餾裝置。

１．２試驗(yàn)材料

黃秋葵種子于２０１０年采自浙江紹興，經(jīng)紹興文理學(xué)院元培學(xué)院金自學(xué)教授鑒定為錦葵科秋葵屬植物黃秋葵的種子；所用試劑皆為分析純。

１．３試驗(yàn)方法

１．３．１黃秋葵種子揮發(fā)油的提取黃秋葵種子采用粉碎機(jī)粉碎。取粉末１００ ｇ放入圓底燒瓶中，加水５００ ｍＬ浸泡４ ｈ，并用水蒸氣發(fā)生器進(jìn)行蒸餾，提?。?ｈ，分出揮發(fā)油層，用無水硫酸鈉干燥，收集于磨口試管中，產(chǎn)率約為０．０６％。

１．３．２黃秋葵種子脂肪酸的提取和甲酯化取黃秋葵種子粉末１００ ｇ，加環(huán)己烷３００ ｍＬ于具塞燒瓶中，超聲提?。常?ｍｉｎ，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到黃秋葵種子脂肪酸。移取黃秋葵種子脂肪酸置于２０ ｍＬ試管中，加入４ ｍＬ ０．５ ｍｏｌ／Ｌ的 ＫＯＨ－ＣＨ３ＯＨ后于６０ ℃水浴３０ ｍｉｎ；然后加入２ ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ 酸化，溶液ｐＨ調(diào)至２．０；再加入乙醚進(jìn)行萃取，分層后取出油層；加入２．５％ Ｈ２ＳＯ４－ＣＨ３ＯＨ在６０ ℃水浴條件下甲酯化１ ｈ；再加入乙醚和水各２ ｍＬ，振蕩萃取，吸取上層油層，再加入２ ｍＬ乙醚重復(fù)萃取１次。將萃取液合并，加入無水ＭｇＳＯ４并放置過夜；再吸取上清液，并用乙醚洗滌，合并后揮干乙醚待測。

１．３．３色譜條件氣相色譜條件：色譜柱ＤＢ－ＷＡＸ （３０ ｍ × ０．２５ ｍｍ × ０． ２５ μｍ），升溫程序：８０ ℃下１０ ℃／ｍｉｎ升至２２０ ℃；載氣為Ｈｅ，流速為１ ｍＬ／ｍｉｎ；進(jìn)樣口溫度為２５０ ℃；分流比為２０∶１；進(jìn)樣量為1．0 μＬ。

質(zhì)譜條件：電離源ＥＩ；電離源溫度２００ ℃；電子轟擊能量７０ ｅＶ；倍增器電壓為２ ｋＶ；掃描范圍為２０～４００ ａｍｕ。

２結(jié)果與分析

２．１黃秋葵種子揮發(fā)油的測定結(jié)果

按照上述的ＧＣ－ＭＳ條件，對黃秋葵種子的揮發(fā)油提取液進(jìn)行分析，揮發(fā)油中共分離出１１個(gè)成分，用面積歸一法測定各組分的百分含量，并對所得質(zhì)譜圖經(jīng)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索，按各峰的質(zhì)譜裂片圖與文獻(xiàn)資料核對，確定了黃秋葵種子的揮發(fā)性成分。從其分析結(jié)果（表１）可知，揮發(fā)油中主要成分為各類烷烴，其中含量最高的為正癸烷，占２１．１８０％，還含有甲基環(huán)戊烷、正辛烷、正十二烷、正十四烷，含量分別為１５．９５８％、１２．９１２％、１７．5７９％、９．９０６％。還有部分烯烴類，橋式四氫化雙環(huán)戊二烯占２．３７９％。烷烴類化合物一般沒有香味或香味較弱，可以不考慮它們的香氣貢獻(xiàn)。

２．２脂肪酸測定結(jié)果

按照試驗(yàn)方法所述ＧＣ－ＭＳ條件，對黃秋葵種子中的脂肪酸提取液進(jìn)行分析。從黃秋葵種子脂肪酸中共分離出１３種成分，其含量如表２所示，黃秋葵種子１３種脂肪酸中，含量較多的是亞油酸（４０．２２５％）、棕櫚酸（２３．９７６％）、油酸（２２．５５８％），其中不飽和酸的總量為６８．８％，與參考文獻(xiàn)［５］相符。

３小結(jié)與討論

黃秋葵種子揮發(fā)油中主要含有各種烷烴，試驗(yàn)結(jié)果與國外研究報(bào)道黃秋葵種皮中的揮發(fā)油主要成分為酯類和倍半萜烯類成分差距較大［６］，可能種皮成分與完整種子中成分有差別，其香味主要來自種皮。試驗(yàn)過程中也發(fā)現(xiàn)，從黃秋葵種子中提取得到的揮發(fā)油的成分含量并不高。這可能也限制了黃秋葵揮發(fā)油在生產(chǎn)實(shí)際中的應(yīng)用。

從黃秋葵種子中鑒定出１３種脂肪酸，不飽和脂肪酸含量較高，達(dá)到６８．８％。不飽和脂肪酸類化合物有明顯降低血清膽固醇作用，進(jìn)而降低高血壓、心臟病及中風(fēng)等疾病的發(fā)病率。油酸在降低血清低密度脂蛋白膽固醇的同時(shí)還會(huì)升高血清高密度脂蛋白膽固醇，促進(jìn)脂質(zhì)的正常代謝，有安全脂肪酸之稱；亞油酸是人體重要的必要脂肪酸，有良好的生物活性，對人體的新陳代謝有重要作用，對由高血脂引起的心腦血管疾病和抗血栓形成方面有較好療效［７］，為復(fù)合亞油酸膠囊的主要成分。

綜上，黃秋葵種子是極具開發(fā)研究潛力的資源物種，可望用于緩解油源危機(jī)，值得對其種子進(jìn)行研究。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 董彩文，梁少華． 黃秋葵的功能特性及綜合開發(fā)利用［Ｊ］． 食品研究與開發(fā)，２００７，２８（５）：１８０－１８２.

［２］ 賈陸，李煥芬，敬林林．黃秋葵正丁醇部位化學(xué)成分的研究［Ｊ］．中草藥，２０１０，４１（１１）：１７７１－１７７３.

［３］ ＯＬＡＴＵＮＪＩ Ｉ Ｉ，ＩＪＩＷＯＬＥ Ｔ，ＡＷＯＢＡＪＯ Ｆ Ｏ． Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｄｅｌｅｔｅｒｉｏｕｓ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｑｕｅｏｕｓ ｆｒｕｉｔ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ（ｏｋｒｏ ｆｒｕｉｔ） ｏｎ ｓｏｍｅ ｍａｌｅ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｉｎ ｓｐｒａｇｕｅ ｄａｗｌｅｙ ｒａｔｓ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｔｏｌｏｇｙ，２００９，１（６）：４６１－４６８.

［４］ ＣＡＭＣＩＵＣ Ｍ， ＤＥＰＬＡＧＮＥ Ｍ，ＶＩＬＡＲＥＭ Ｇ， ｅｔ ａｌ． Ｏｋｒａ－Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｌ．（Ｍｏｅｎｃｈ） ａ ｃｒｏｐ ｗｉｔｈ ｅｃｏｎｏｍｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ｓｅｔ ａｓｉｄｅ ａｃｒｅａｇｅ ｉｎ Ｆｒａｎｃｅ［Ｊ］． Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｃｒｏｐｓ ａｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，１９９８，７：２５７－２６４．

［５］ ＣＨＩＳＨＯＬＭ Ｍ Ｊ， ＨＯＰＫＩＮＳ Ｃ Ｙ． Ａｎ ｏｘｙｇｅｎａｔｅｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｏｉｌ ｏｆ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ［Ｊ］． Ｃａｎａｄｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９５７，３５：３５８－３６４.

［６］ ＭＡＲＩＵＳ Ｃ， ＪＥＡＮ Ｍ Ｂ， ＧＥＲＡＲＤ Ｖ． ｅｔ ａｌ． Ｖｏｌａｔｉｌｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｏｋｒａ ｓｅｅｄ ｃｏａｔ［Ｊ］． Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９８，４８（２）：３１２－３１５．

［７］ ＲＯＸＡＮＮＥ Ｎ． Ｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＥＲＢＢ２ ｏｎｃｏｇｅｎｅ［Ｊ］． Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ，２００５，６（２）：６９－７３．