肖冰梅 劉義芳 郭錦明 龔力民
湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙 410208
向日葵Helianthus annuus是菊科向日葵屬植物,在我國(guó)種植已有400多年的歷史。我國(guó)的《植物名實(shí)圖考》對(duì)向日葵早有記載,現(xiàn)在全國(guó)各地均有種植。主要分布在東北、西北和華北地區(qū),如內(nèi)蒙古、吉林、遼寧、黑龍江、山西等省、自治區(qū)[1-2]。向日葵是蒙族、景頗族等多個(gè)少數(shù)民族的傳統(tǒng)藥,其根、莖髓、花盤、莖葉、種子、花等均可入藥。蒙族、景頗族用向日葵根治小便澀痛、血淋、尿路結(jié)石等癥,傣藥用其治眩暈、失眠、高血壓,療效顯著,沿用至今[3]。
國(guó)外對(duì)向日葵屬植物地上部分的化學(xué)成分作了詳細(xì)的研究,已從其中分離出了黃酮類,倍半萜類及二萜類等化學(xué)成分130多種,但這些研究主要都集中在向日葵地上部分,國(guó)內(nèi)也只局限在對(duì)向日葵種子中的脂肪酸和綠原酸、根醇提物進(jìn)行了研究[4-6],對(duì)向日葵根揮發(fā)油的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本文首次利用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)向日葵根部揮發(fā)油做了檢測(cè),成功檢測(cè)到三十三個(gè)成分。為建立向日葵根的藥用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、進(jìn)行深入的開(kāi)發(fā)利用提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器
本實(shí)驗(yàn)采用的材料為菊科植物向日葵屬植物向日葵(Helianthus annuus)根,購(gòu)自遼寧。經(jīng)本校中藥鑒定教研室劉塔斯教授鑒定無(wú)誤。
本實(shí)驗(yàn)所需的試劑為濃度95%乙醇﹑無(wú)水乙醇、乙酸乙酯、石油醚﹑氯仿﹑水合氯醛﹑稀甘油等,均為分析純。蒸餾水。
儀器采用島津GC-MSQP2010氣質(zhì)聯(lián)用儀。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 揮發(fā)油提?。?]
方法 將向日葵根在60℃干燥2h,粉碎,過(guò)篩制成向日葵根粉備用,將制好的向日葵根粉50克裝入1000 ml的燒瓶中,按固液比1:10添加500ml蒸餾水。將燒瓶置于水浴鍋上,安裝回流裝置,檢查氣密性。用電熱套加熱;在裝置的另一端的濃縮瓶?jī)?nèi)加入10ml乙醚,反復(fù)提取十次,共計(jì)500g?;厥杖苡袚]發(fā)油的乙醚溶液。得率為1%。
1.2.2 GC-MS測(cè)定條件
將揮發(fā)油用無(wú)水硫酸鈉脫水,再用微孔濾膜過(guò)濾,除去其中微粒,以保護(hù)儀器。將濾液放在一個(gè)干凈的錐形瓶中,用1ml的移液管移取,放入10ml的容器中,定容。
測(cè)定條件 氣相色譜柱:Rtx-5ms(30 m×0.25 mm×0.25 μm);載氣:He,流速:1.0 mL/min;進(jìn)樣口溫度:220℃;程序升溫:60℃保持1min,以5℃/min升溫到190℃,保持33min;進(jìn)樣量:1 μL;分流比:10︰1。離子源溫度:200℃ ;電離方式:EI,電子能量:70 eV;溶劑延遲時(shí)間:3.0 min;質(zhì)量掃描范圍:40~550 amu;采集方式:SCAN掃描。色譜分析總離子流圖如圖1所示。
本實(shí)驗(yàn)利用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)首次對(duì)向日葵根部揮發(fā)油做了分析,成功檢測(cè)到33個(gè)有效成分,結(jié)果如表1。由表1可知,揮發(fā)油中主要含有脂肪酸及萜類成分,其中以脂肪酸和倍半萜類成分所占比重最大,如棕櫚酸占樣品總量的16.29%,白菖烯占12.17%,β-甜沒(méi)藥烯占6.4%。顯示出以低沸點(diǎn)成分為主。因此,用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油很難提取到揮發(fā)油。我們經(jīng)多次試驗(yàn)之后采用乙醚溶解揮發(fā)油的方法順利提取到了揮發(fā)油,得率為1%,效果較好。
倍半萜內(nèi)酯類、二萜類、甾體類、黃酮苷元類、香豆素類等藥理作用主要為抗腫瘤、抗炎、抗衰老、抗心絞痛、降壓等[8-10]。所以向日葵根的揮發(fā)油應(yīng)該具備廣泛的生物活性,可以開(kāi)發(fā)成降壓藥、消炎藥及抗腫瘤藥等新型藥物,有藥用價(jià)值和綜合利用價(jià)值。
本實(shí)驗(yàn)對(duì)向日葵根揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行了研究,并確認(rèn)主要為脂肪酸和倍半萜類成分,為其揮發(fā)油相關(guān)藥物的開(kāi)發(fā)打下了基礎(chǔ)。
表1 向日葵根揮發(fā)油的GC-MS檢測(cè)結(jié)果
Peak Name Mol Wt Formula Similarity Ret.time Area%27 n-Hexadecanoic acid棕櫚酸 256 C16H32O288 27.470 16.26 28 Kaur-16-ene扁枝烯 272 C20H32 94 28.613 1.15 29 Cycloartanyl acetate環(huán)木菠蘿烯醇乙酸酯 470 C32H54O2 80 29.988 10.33 30 (Z,Z) -9,12-Octadecadienoic acid十八碳二、三烯酸 280 C18H32O2 84 31.400 4.06 31 (Z)-9-Octadecenoic acid OleicAcid十八烯酸油酸 282 C18H34O2 93 31.481 2.55 32 7-Tetradecenal,(Z) - 十四烯 210 C14H26O 88 31.558 0.81 33 Labda-8(20),13(16),14-triene未知 272 C20H3282 32.935 1.36
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