劉美玲 彭慧敏 郭旭光 陳 瓊

廣州醫(yī)學(xué)院 第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510150

蒼白密螺旋體蒼白亞種 (Treponema.pallidumsubsp.pallidum，Tp)俗稱梅毒螺旋體，是人類性傳播疾病(STD)梅毒 (syphilis)的病原體。梅毒是一種嚴(yán)重危害人類健康的性傳染性疾病，其不僅嚴(yán)重?fù)p害人體的多個(gè)器官從而引起全身性損害［1］。梅毒主要經(jīng)性接觸、血液和母嬰垂直途徑傳播，傳染性強(qiáng)。其實(shí)驗(yàn)室檢測是診斷和發(fā)現(xiàn)梅毒的主要手段［2］。當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后4～10周，血清中可產(chǎn)生抗類脂抗原的非特異性抗體和抗梅毒螺旋體特異抗原的抗體［3］。本文對5928份標(biāo)本用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme－linked immunoadsordent assay;ELISA)和化學(xué)發(fā)光分析 (chemiluminescence immunoassay，CLIA)檢測方法進(jìn)行測定，并比對分析如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源。標(biāo)本為某院2011年12月至2012年5月5928份血清標(biāo)本。其中男性患者2951例，女性患者2977例，年齡0～88歲，平均年齡32.4±5.5歲。

1.2 試劑?；瘜W(xué)發(fā)光試劑購自雅培公司，ELISA檢測試劑盒購自北京華大吉比愛生物技術(shù)有限公司。

1.3 儀器。ABBOTT AXSYM Plus全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀購自美國雅培公司。

1.4 方法。所有血清標(biāo)本分別用ELISA法和化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行梅毒螺旋體特異性抗體血清學(xué)檢測。操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

表1 ELISA和化學(xué)發(fā)光檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果

在5928份血清標(biāo)本中，ELISA法檢測陽性151例，陽性率2.55%，化學(xué)發(fā)光法檢測陽性198例，陽性率3.34%，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=6.52，P＜0.05)。

3 討論

人體感染梅毒螺旋體后機(jī)體產(chǎn)生兩類抗體，一類是梅毒螺旋體破壞患者組織后釋放一種抗原物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生的具有抗體物質(zhì)的反應(yīng)素 (非特異性梅毒螺旋體抗體，)，另一類是抗梅毒螺旋體的特異性抗體，在梅毒感染的潛伏期即產(chǎn)生，感染2～4周即可檢出，治愈后相當(dāng)長的時(shí)間內(nèi)仍然存在較高的陽性率，甚至終生陽性。

臨床應(yīng)用中，梅毒反應(yīng)素的檢測 (如RPR、USR和TRUST等)一般用于觀察梅毒的治療效果、判斷復(fù)發(fā)及現(xiàn)行感染。因檢測易出現(xiàn)假陽性，并且在疾病非活動期和治療后容易消失，對Ⅰ期、Ⅲ期梅毒和治療后梅毒的檢出率低，晚期梅毒時(shí)又可以轉(zhuǎn)陰，因此不適用于一期梅毒早期、三期梅毒的診斷。此類試驗(yàn)結(jié)果必須結(jié)合梅毒螺旋體特異性抗體檢測。目前梅毒螺旋體特異性抗體常用的篩查方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)與化學(xué)發(fā)光分析 (CLIA)等。必要時(shí)加做梅毒螺旋體抗體確證試驗(yàn)。

本世紀(jì)70年代中期Arakawe首次報(bào)道用發(fā)光信號進(jìn)行酶免疫分析，利用發(fā)光的化學(xué)反應(yīng)分析超微量物質(zhì)，特別是用于臨床免疫分析中檢驗(yàn)超微量活性物質(zhì)［4］。目前，這一技術(shù)已從實(shí)驗(yàn)室的稀有技術(shù)過渡到臨床醫(yī)學(xué)的常檢測手段［5］?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析 (Chemiluminescence Immunoassay，CLIA)是將化學(xué)發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標(biāo)記免疫測定技術(shù)。其檢測原理與放射免疫 (RIA)和酶免疫 (EIA)相似，不同這處是以發(fā)光物質(zhì)代替放射性核素或酶作為標(biāo)記物，并借助其自身的發(fā)光強(qiáng)度直接進(jìn)行測定［6］。

化學(xué)發(fā)光免疫分析既具有放射免疫的高靈敏度，又具有酶聯(lián)免疫的操作簡便、快速的特點(diǎn)，易于標(biāo)準(zhǔn)化操作。且測試中不使用有害的試劑，試劑保持期長，應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究和臨床實(shí)驗(yàn)診斷工作，成為非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。國內(nèi)近年來新開發(fā)的CLIA梅毒特異性抗體檢查方法，采用儀器進(jìn)行檢測分析，結(jié)果客觀準(zhǔn)確，數(shù)據(jù)保存方便，同時(shí)也有利于對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量控制等規(guī)范操作［7］。有報(bào)道認(rèn)為，其敏感性和特異性與梅毒的確診試驗(yàn)梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集試驗(yàn) (TPPA)相當(dāng)，可作為其替代試驗(yàn)，在臨床中廣泛應(yīng)用［8，9］。

綜上所述，與ELISA法相比，CLIA法檢測梅毒螺旋體抗體操作較規(guī)范，易批量操作，漏檢率低，是較為理想的梅毒篩查方法。

［1］蔣傳好，趙飛駿，吳移謀.梅毒螺旋體致病相關(guān)蛋白的研究進(jìn)展.中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志.2011.39(5):481－486.

［2］李璇，王輝.HIV/梅毒共感染國內(nèi)外研究進(jìn)展.中國艾滋病性病.2011.17(5):610－612.

［3］蒙在楊，謝智光.梅毒檢測技術(shù)進(jìn)展.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床.2011.8(21):2627－2628.

［4］Olsson T，Brunius G，Carlsson HE，Thore A.Luminescence immunoassay(LIA):a solid－phase immunoassay monitored by chemiluminescence.J Immunol Methods.1979.25(2):127 －35.

［5］Neupert W，Oelkers R，Brune K，Geisslinger G.A new reliable chemiluminescence immunoassay(CLIA)for prostaglandin E2 using enhanced luminol as substrate.Prostaglandins.1996.52(5):385 －401.

［6］Yu F，Wu Y，Yu S，et al.A competitive chemiluminescence enzyme immunoassay for rapid and sensitive determination of enrofloxacin.Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc.2012.93:164－8.

［7］馬紅霞，周運(yùn)恒，楊藺，黃斌，范列英.不同的梅毒血清學(xué)試驗(yàn)方法檢測1808例血清標(biāo)本結(jié)果分析.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào).2011.32(12):1350－1352.

［8］吳志周，祝新.TPPA法與化學(xué)發(fā)光法檢測梅毒螺旋體特異性抗體的比較［J］.嶺南皮膚性病科雜志，2008，15(3):138－139.

［9］侯曉菁，梁艷，陳潔，等.化學(xué)發(fā)光法檢測梅毒螺旋體特異性抗體的試驗(yàn)評價(jià)［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，25(5):365－367.